(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211012101.1 (22)申请日 2022.08.23 (71)申请人 杭州负熵健康科技有限公司 地址 311199 浙江省杭州市钱塘区下沙街 道元成时代中心3幢1219室 (72)发明人 张亚林　石丽华　向沙沙　王鑫洋　 朱炫　陈杰　 (74)专利代理 机构 杭州浙科专利事务所(普通 合伙) 33213 专利代理师 沈渊琪 (51)Int.Cl. C12M 1/40(2006.01) C12M 1/36(2006.01) C12M 1/04(2006.01) C12M 1/02(2006.01)C12M 1/34(2006.01) C12M 1/107(2006.01) C12M 1/00(2006.01) C12Q 1/37(2006.01) C12Q 1/25(2006.01) C12Q 1/02(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种荒漠肉苁蓉及其提取物的体外胃肠消 化评价方法及应用 (57)摘要 本发明一种荒漠肉苁蓉及其提取物的体外 胃肠消化模拟评价方法及应用， 包括模拟评价装 置及模拟 评价系统的建立， 评价体系的建立包括 模拟胃消化液及小肠消化液的配制、 粪便菌液的 制备、 发酵培养液的配制及体外模拟消化系统的 建立。 本发明通过特有的体外模拟评价装置， 提 供了一整套荒漠肉苁蓉及其提取物的体外胃肠 消化评价标准化方案， 从而可以预测荒漠肉苁蓉 及其提取物的可消化性、 生物可及率以及物理结 构的变化， 评估荒漠肉苁蓉对人体的潜在价 值。 权利要求书2页 说明书6页 附图5页 CN 115369031 A 2022.11.22 CN 115369031 A 1.一种荒漠肉苁蓉及其提取物的体外胃肠消化模拟评价方法， 其特征在于， 包括以下 步骤： A、 模拟评价装置的建立 评价装置包括至少一个胃消化罐 （1） 、 一个小肠消化罐 （2） 、 一个补料罐 （4） 及一个结肠 发酵罐 （3） ， 胃消化罐 （1） 、 小肠消化罐 （2） 、 结肠发酵 罐 （3） 依次通过 连接管路 （10） 串联； B、 模拟评价系统的建立 步骤一： 模拟胃消化液及小肠消化液的配制； 步骤二： 粪便菌液的制备： 称取人体新鲜粪便用pH6.8缓冲液进行搅拌溶解， 纱布过滤 掉固体颗粒， 所 得滤液即为含粪便微 生物的菌液， 厌氧环境下保存备用； 步骤三： 发酵培养液的配制： 将玉米淀粉、 蛋白胨、 酵母提取物、 胰蛋白胨、 黏液素、 L ‑半 胱氨酸盐酸盐、 3号胆盐、 血 红素、 氯化钠、 吐温、 氯化钾、 磷酸二氢钾、 六水氯化镁、 六水氯化 钙和微量元素储备液的各组分进行混合以配制发酵培 养液； 步骤四： 体外模拟消化系统的建立 1） 将步骤四制备的发酵培养液加入补料罐 （4） 和结肠发酵罐 （3） 中， 调节结肠发酵罐 （3） 的pH值和温度； 2） 将步骤二中的粪便 菌液接入至结肠发酵 罐 （3） 中， 启动搅拌； 3） 在结肠发酵罐 （3） 中的菌群趋于稳定后， 在胃消化罐 （1） 中加入模拟 胃消化液、 胃蛋 白酶和荒漠肉苁蓉样品， 调节pH和温度， 搅拌消化两小时； 4） 胃消化完成后， 利用连接管路 （10） 将消化产物转移至小肠消化罐 （2） ， 同时加入模拟 小肠消化液和胰酶， 并调节pH和温度， 搅拌消化两小时， 消化完成后通过连接管路 （10） 转移 至结肠发酵 罐 （3） 中； 5） 在3） 、 4） 消化完成后应取少量消化产物进行物理指标和化学指标测定； 6） 重复3） 和4） 连续7天后停止发酵， 采集0 ‑7天结肠发酵罐 （3） 中的发酵液， 低温保存样 品备用， 并收集结肠发酵 罐 （3） 的发酵气体。 2.如权利要求1所述的一种荒漠肉苁蓉及其提取物的体外胃肠消化模拟评价方法， 其 特征在于所述胃消化罐 （1） 、 小肠消化罐 （2） 以及结肠发酵罐 （3） 上均设置有便于稳定pH值 的输入酸液或碱液的输液管 （5） ， 以及恒温装置、 搅拌装置； 在结肠发酵罐 （3） 还设有输入惰 性气体的输气管 （1 1） 及培养液的输入管路和发酵后废液的输出 管路 （8） 。 3.如权利要求1所述的一种荒漠肉苁蓉及其提取物的体外胃肠消化模拟评价方法， 其 特征在于所述胃消化罐 （1） 、 小肠消化罐 （2） 以及结肠发酵罐 （3） 内均插接设置有温度计 （6） 及pH计 （7） ， 所述输液管 （5） 、 连接管路 （10） 及输出管路 （8） 上均设置有蠕动泵 （12） ， 所述补 料罐 （4） 上还设置有补料 管 （9） 。 4.如权利要求1所述的一种荒漠肉苁蓉及其提取物的体外胃肠消化模拟评价方法， 其 特征在于胃消化液的配制是指将氯化钾、 磷酸二氢钾、 碳酸氢钠、 氯化钠、 六水氯化镁、 碳酸 铵按照比例混合配制； 小肠消化液的配制是指将氯化钾、 磷酸二氢钾、 碳酸氢钠、 氯化钠、 六 水氯化镁按照比例混合配制。 5.如权利要求1所述的一种荒漠肉苁蓉及其提取物的体外胃肠消化模拟评价方法， 其 特征在于所述微量元素储备液包含七水硫酸镁、 七水硫酸亚铁、 二水氯化钙、 四水氯化锰、 七水硫酸钴、 五水硫酸铜、 七水硫酸锌、 六 水氯化镍的组分。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115369031 A 26.如权利要求1所述的一种荒漠肉苁蓉及其提取物的体外胃肠消化模拟评价方法， 其 特征在于粪便接种液在接种培养24h之后， 为维持结肠发酵罐 （3） 内微生物的正常生长， 每 日由补料管 （9） 向结肠发酵罐 （3） 补给部分培养液， 同时结肠发酵罐 （3） 排出等量废液， 以维 持结肠发酵 罐 （3） 内培 养液体积不变。 7.如权利要求1所述的一种荒漠肉苁蓉及其提取物的体外胃肠消化模拟评价方法， 其 特征在于每日早、 中、 晚对每个结肠发酵罐 （3） 通氮气以排尽结肠发酵罐内的空气， 直至结 肠发酵罐 （3） 内的微 生物趋于稳定。 8.如权利要求1所述的一种荒漠肉苁蓉及其提取物的体外胃肠消化模拟评价方法， 其 特征在于物理指标包括粒径和表 观黏度， 化学指标包括还原糖、 总游离氨基酸、 总苷。 9.权利要求1 ‑8任一所述的一种荒漠肉苁蓉及其提取物的体外胃肠消化模拟评价方法 在评估荒漠肉苁蓉对人体潜在价 值方面的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115369031 A 3