ICS 65.150 CCS B 51 37 山 东 省 地 方 标 准 DB 37/T 4342—2021 川蔓草种子收集与保存技术规范 Technical specifications for seed collection and storage in Ruppia sinensis 2021 - 03 - 11 发布 2021 - 04 - 11 实施 山东省市场监督管理局 发 布 DB 37/T 4342—2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由山东省海洋局提出并组织实施。 本文件由山东省海洋标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：威海虹润海洋科技有限公司、中国科学院海洋研究所、荣成峻鹏生物科技有限公 司。 本文件主要起草人：周毅、张晓梅、顾瑞婷、徐少春、杨红生、王培亮、王军杰。 I DB 37/T 4342—2021 川蔓草种子收集与保存技术规范 1 范围 本文件规定了川蔓草种子收集、保存的原则和技术方法等要求。 本文件适用于川蔓草种子收集与保存工作。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 海草 seagrass 可完全生活在海水中的高等被子植物，隶属于泽泻目（Alismatales）。 注： 我 国 分 布 的 海 草 包 括 四 科 ， 分 别 是 鳗 草 科 （ Zosteraceae ） ， 丝 粉 草 科 （ Cymodoceaceae ） ， 水 鳖 科 （Hydrocharitaceae）和川蔓草科（Ruppiaceae）。 3.2 川蔓草 Ruppia sinensis 生活在海湾以及咸水、半咸水生境的一年生或多年生被子植物，属于川蔓草科，川蔓草属（Ruppia）。 3.3 生殖枝 flowering shoot/reproductive shoot 海草进入花期/繁殖期后，发育形成花和种子等生殖器官的茎枝。 3.4 营养枝 vegetative shoot 不进行有性繁殖过程的茎枝。 4 种子收集和保存原则 4.1 4.2 法。 4.3 4.4 优先选择面积较大的川蔓草床作为种子来源。 应提前做好本底调查，确定目标草床的种子成熟期和休眠期，以明确种子采集最佳时间和保存方 种子采集时应合理调整采集量。 外观黑色且质地坚硬的种子一般均具有活力，宜进行保存。 5 收集 5.1 生殖枝种子收集 1 DB 37/T 4342—2021 5.1.1 采集时间 5.1.1.1 5.1.1.2 a) b) 生殖枝的采集应在种子开始成熟、但尚未脱落时进行，即大部分种子已颗粒饱满而外壳坚硬。 不同地理种群的种子成熟时间存在差异： 黄河口地区：7 月～9 月； 威海地区：9 月～10 月。 5.1.2 采集 5.1.2.1 徒步采集 种子大量成熟季节，当川蔓草床水深低于1 m时，可徒步进入草床，直接用孔径不大于0.5 mm的细筛 轻轻横扫川蔓草冠层，使带有川蔓草种子的果柄或花序轴落入筛子。 5.1.2.2 行船采集 当川蔓草床面积较大且水深大于1 m时，可行船进入川蔓草床，控制船速，用工具捞取冠层的生殖 枝部分。采集时应控制采集量、避免过度干扰草床。 5.1.3 运输 采集的生殖枝宜进行冷藏运输。运输时间较短时（＜6 hr）亦可采用常温避光运输，注意保持生殖 枝湿润状态。 5.1.4 暂养 3 将川蔓草生殖枝置于自然海水池中暂养，1 m 水体暂养生殖枝湿重应不超过2 kg。 自然光照，保持通氧，水温不宜超过25 ℃。每日换水并充分搅动生殖枝，以避免堆积缺氧，造成 种子腐烂。 5.1.5 种子收集 川蔓草生殖枝完全衰败后，将水体内腐败的组织碎屑捞出并反复筛洗，收集碎屑内的种子。 5.2 沉积物种子收集 5.2.1 沉积物采集 当错过生殖枝收集时，可在川蔓草花期结束、种子成熟脱落进入底泥且未萌发时，挖取草床表层10 cm以浅的沉积物，以收集其中包含的川蔓草种子。 5.2.2 沉积物运输 采集的沉积物宜进行冷藏运输。 5.2.3 种子收集 在海水中用不小于1.5 mm的大孔径网筛和不大于0.5 mm的小孔径网筛分别去除较大和较小的颗粒杂 质，人工挑选完整且坚硬的种子。沉积物筛洗过程需要大量海水，可在现场或有条件的实验室内进行。 5.3 收集记录 种子收集过程中，应记录时间、地点、采集方法、采集量以及后续处理细节，并填写种子采收记录 表（见附录A中表A.1、表A.2）。 2 DB 37/T 4342—2021 6 保存 6.1 运输过程中的保存 6.1.1 水环境运输 种子置于海水中，海水温度不超过4℃，种子密度应小于20万粒/L，每天对水体进行观察，出现浑 浊时应及时换水。换水频率宜为两天一次，且所换水体需进行提前预冷到同等温度。 6.1.2 干燥环境运输 种子置于空气中，空气相对湿度不高于40 %，且温度不超过20 ℃。该方法宜用于3 d内的短时运输， 当进行大于7 d的较长时间运输时，可能会造成部分种子活力降低。 6.2 种子的室内保存 6.2.1 干燥保存 保存过程中川蔓草种子表面保持相对干燥，且维持环境相对湿度不高于40 %，无直接光照，温度不 高于4 ℃。保存期限不宜超过6个月。 6.2.2 湿法保存 将川蔓草种子置于盐度为20～40的人工海水或灭菌的自然海水中，温度控制在0 ℃～1 ℃，避光保 存。每月换水一次以上，人工海水和容器应在同等温度下预冷4 h以上。保存过程中应定期观察，防止 水体出现结冰现象。 6.3 抗菌剂的使用 在种子短期和长期保存过程中，可加入浓度不小于2 ppm的纳米银或硫酸铜等抗菌剂。 6.4 保存记录 种子保存过程中，应记录保存编号、采收编号、保存地点、保存方法、起止时间、种子量、管理人 等，并填写种子保存记录表（见附录A中表A.3）。 3 DB 37/T 4342—2021 A A 附 录 A （资料性） 川蔓草种子收集记录报表格式 表A.1～表A.3给出了川蔓草生殖枝种子采集、底泥种子采集及种子保存记录表。 表A.1 川蔓草生殖枝种子采收记录表 采收 编号 地点 生殖枝采集 生殖枝暂养 种子收集 （记录人______） （记录人______） （记录人______） 方法 日期 重量（kg） 地点 条件 起止日期 收集日期 种子量(kg) 表A.2 川蔓草底泥种子采收记录表 底泥采集（记录人______） 采收 编号 地点 日期 底泥处理与种子收集（记录人______） 3 体积（m ） 地点 日期 种子量(kg) 种子量(kg) 管理人 表A.3 川蔓草种子保存记录表 保存编号 采收编号 保存地点 保存方法 起止时间 4