(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210533401.8 (22)申请日 2022.05.13 (83)生物保 藏信息 GDMCC No： 62395 202 2.04.18 (71)申请人 齐鲁工业大学 地址 250353 山东省济南市长清区大 学路 3501号齐鲁工业大学 (72)发明人 朱德强　刘新利　王清龙　韩乐闪　 彭硕　 (74)专利代理 机构 北京高沃 律师事务所 1 1569 专利代理师 薛红凡 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12P 21/02(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一株乳酸乳球菌乳酸亚种A32菌株及其衍生 产品和应用 (57)摘要 本发明提供了一株乳酸乳球菌乳酸亚种 (Lactococcuslactissubsp.Lactis)A32菌株及 其衍生产品和应用， 本发明属于微生物技术领 域。 本发明在原始菌株L.lactislxl的基础上经 过复合诱变获得乳酸乳球菌乳酸亚种A32菌株。 试验证明， 与原始菌株L.lacti slxl的Nisin效价 相比， 乳酸乳球菌乳酸亚种A32菌株具有高产 Nisin的能力， Nisin效价(5066.58IU/mL以上)提 高了3～4倍； 同时乳酸乳球菌乳酸亚种A32菌株 的生长曲线较原始菌株L.lactislxl稍有延迟， 但最大生物量基本一致。 本发明为大规模生产 Nisin提供了基础。 权利要求书1页 说明书7页 附图2页 CN 114958663 A 2022.08.30 CN 114958663 A 1.一株乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus  lactis subsp.lactis)A32菌株， 其特征在 于， 所述乳酸乳球菌 乳酸亚种A32菌株的保藏编号 为GDMCC No： 62395。 2.一种生产Nisin的菌剂， 其特征在于， 活性成分包括权利要求1所述乳酸乳球菌乳酸 亚种A32菌株。 3.权利要求1所述乳酸乳球菌乳酸亚种A32菌株或权利要求2所述菌剂在生产Nisin中 的应用。 4.根据权利 要求3所述应用， 其特征在于， 所述乳酸乳球菌乳酸亚种A32菌株对Nisin的 抗性为15000IU/mL。 5.根据权利要求3所述应用， 其特征在于， 所述乳酸乳球菌乳酸亚种A32菌株生产的 Nisin的效价为5066.58IU/mL以上。 6.一种基于权利要求1所述乳酸乳球菌乳酸亚种A32菌株生产Nisin的方法， 其特征在 于， 包括以下步骤： 将活化的乳酸乳球菌乳酸亚种A32菌株的菌液接种至发酵培养基中发酵培养， 收集发 酵液分离Nisin。 7.根据权利要求6所述方法， 其特 征在于， 所述发酵培 养基为CM1液体培 养基。 8.根据权利要求7 所述方法， 其特 征在于， 所述菌液的接种量 为8％～15％。 9.根据权利要求7 所述方法， 其特 征在于， 所述发酵培 养的温度为28～32℃。 10.根据权利要求6～9任意一项所述方法， 其特征在于， 所述发酵培养的时间为20～ 40h。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114958663 A 2一株乳酸乳球菌 乳酸亚种A32菌株及其 衍生产品和应用 技术领域 [0001]本发明属于微生物技术领域， 具体涉及一株乳酸乳球菌乳酸亚种  (Lactococcus   lactis subsp.lactis)A32菌株及其 衍生产品和应用。 背景技术 [0002]Nisin又称乳酸链球菌素、 尼辛， 是Rogers等人于1928年首次提出乳酸链球菌产生 的、 能够抑制其它乳酸菌的生长的代谢产物。 1933年， Witehead  等人发现两种野生乳链球 菌都能产生一种能够抑制乳酸菌的生长并阻止酸的产生的物质， 并证明该物质具有蛋白质 特性， 猜测其可能是一种多肽。 自  1944年开始， Mattick一直在 进行此物质的研究， 随后， 他 发现不同链球菌菌株在产Nisin的产量方面明显不同， 并筛选出了一株能够产生高产Nisin   的菌种， 并制备纯化这种多肽物质， 由于是N群中的乳酸菌所产生的抑菌物质， 故命名为N ‑ inhibitor Substance， 即N群抑菌物质， 简称为 Nisin， 也称乳酸链球菌素。 [0003]1928年， 美国农业部乳品工业局研究实验室报道了乳链球菌对保加利亚乳杆菌的 抑制作用； 1953年， NISAPLIN上市， 开创了Nisin商业应用的先河； 1969年， 粮农组织(FAO)、 世界卫生组织(WHO)和食品添加剂联合专家委员会(JECFA)先后批准Nisin作为防腐剂应用 于食品工业。 此后，  Nisin在乳制品、 罐头食品、 饮料、 及肉制品等品类食品加工、 运输和贮 存环节的防腐中发挥了重要作用， 可减少粮食变质导致的浪费并延长食品运输距离， 作为 食品防腐剂在世界一百多个国家和地区得到广泛应用。 [0004]随着社会经济发展， 人民对高品质生活和健康饮食的追求愈发强烈， 传统防腐剂 引发越来越多的安全和健康担忧， 乳酸链球菌素等生物防腐剂受到越来越多的重视和关 注。 作为国际公认的安全无毒的天然防腐剂， Nisin高效合成一直是领域内热点之一； 此外 由于其良好的生物安全性， 关于其应用价 值的研究早已超出食品防腐领域。 [0005]正是由于食品行业、 医疗行业等对Nisin的需求持续增长， 但目前缺乏具有高产 Nisin性能的优异菌株的报道。 发明内容 [0006]有鉴于此， 本发明的目的在于提供一株乳酸乳球菌乳酸亚种A32菌株及其衍生产 品和应用， 不仅具有较理想的遗传稳定性， 而且 还具有较高的生产  Nisin的能力。 [0007]本发明提供了一株乳酸乳球菌乳酸亚种A32菌株， 所述乳酸乳球菌乳酸亚种A32菌 株的保藏编号 为GDMCC No： 62395。 [0008]本发明提供了一种生产Nisin的菌剂， 活性成分包括所述乳酸乳球菌乳酸亚种A32 菌株。 [0009]本发明提供了所述乳酸乳球菌乳酸亚种A32菌株或所述菌剂在生产  Nisin中的应 用。 [0010]优选的， 所述乳酸乳球菌 乳酸亚种A32菌株对所述 Nisin的抗性为 15000IU/mL。 [0011]优选的， 所述乳酸乳球菌乳酸亚种A32菌株生产的Nisin的效价为  5066.58IU/mL说　明　书 1/7 页 3 CN 114958663 A 3