(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210528519.1 (22)申请日 2022.05.16 (83)生物保 藏信息 CCTCC M 2022553 2022.05.02 (71)申请人 南京南方元生物科技有限公司 地址 210031 江苏省南京市浦口区江北新 区新锦湖路3-1号中丹生态生命科学 产业园一期A座395室 (72)发明人 张建法　孔畅畅　陈石俊胤 　李冰　 (74)专利代理 机构 南京理工大 学专利中心 32203 专利代理师 刘海霞 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12P 19/04(2006.01)A61L 24/08(2006.01) A61L 24/00(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一株类芽孢杆菌及其产生的止血多糖和应 用 (57)摘要 本发明公开了一株类芽孢杆菌及其产生的 止血多糖和应用。 本发明的类芽孢杆菌1229， 保 藏编号为CCTCC  NO： M 2022553， 生产的胞外多糖 Hemoadhican具有止血功能， 可制备成止血材料 应用于不同剂型的不同形式的止血， 具有止血速 度快、 无需长时间施压伤口、 安全无毒、 生物相容 性好、 使用后无需清除等优点， 适用于体外或体 内实质性脏器及弥漫性出血等不规则出血的止 血应用。 权利要求书2页 说明书8页 序列表1页 附图6页 CN 115197866 A 2022.10.18 CN 115197866 A 1.类芽孢杆菌(Paen ibacillussp.)1229， 保藏编号 为CCTCC NO： M 2022553。 2.类芽孢杆菌12 29生产的胞外多糖Hemoadhican， 其结构式如下： 其中n＝100 ‑100000， 由葡萄糖、 甘露糖、 半乳糖、 鼠李糖以摩尔比2:1:1:1组成， 其糖苷 健的连接 方式如下： →)‑α‑L‑Rhap‑(1→3)‑β‑D‑Glcp‑(1→4)[4,6‑ethylidene ‑α‑D‑Galp‑ (1→4)‑α‑D‑Glc‑(1→3)]‑α‑D‑Manp‑(1→。 3.根据权利要求2所述的胞外多糖Hemoadhican的生产方法， 其特征在于， 包括以下步 骤： 步骤1， 发酵： 将权利 要求1所述的类芽孢杆菌1229种子液接种到发酵培养基中， 发酵得 到发酵液； 步骤2， 纯化： 将发酵液稀释处理， 去除蛋白质， 再在上清液中加入2～3倍体积乙醇， 离 心收集沉淀， 烘干， 得到 Hemoadhican多糖纯品。 4.根据权利要求3所述的生产方法， 其特征在于， 发酵培养基的配方为： 碳源20～50g/ L， 氮源1～4g/L， NaH2PO4 0.5～2g/L， CaCl2 0.02～0.1g/L， MgSO4·7H2O 0.1～0.5g/L， FeSO4·7H2O 0.02～0.06g/L， MnSO4·H2O 0.005～0.0 1g/L， ZnCl2 0.01～0.02g/L， pH  5～ 9； 碳源选自葡萄糖、 蔗糖和淀粉中的一种或多种； 氮源选自硝酸钾、 硝酸钠、 硝酸铵、 蛋白胨 和酵母粉中的一种或多种。 5.根据权利 要求3所述的生产方法， 其特征在于， 发酵条件为： 发酵温度26～32℃， 发酵 时间48～72h； 去除蛋白质的方法为加入0.05～0.2％的NaOH、 采用20nm～2 μm的滤膜过滤和 采用截留分子量 为5kD～5 0kD的超滤膜超滤中的一种或多种。 6.根据权利要求3所述的生产方法， 其特征在于， 纯化的具体步骤为： 将发酵液与两倍 体积纯水混合后， 加 入NaOH， 使其终浓度为0.1％， 煮沸20min， 然后通过1μm滤膜过滤沉淀， 最后加入0.2％的乙酸钠和3倍体积的乙醇并搅拌均匀， 离心收集沉淀并烘干， 得到 Hemoadhican多糖纯品。 7.根据权利要求2所述的胞外多糖Hemoadhican在制备止血 材料中的应用。 8.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 所述的止血材料的成分为单独的胞外多糖 Hemoadhican， 或由胞外多糖Hemoadhican和医学上可接受的辅料组成， 或由胞外多糖权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115197866 A 2Hemoadhican和其他药物组成， 或由胞外多糖Hemoadhican、 医学上可接受的辅料和其他药 物组成。 9.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 所述的止血材料的应用形式为粉末、 海绵 或者凝胶。 10.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 所述的止血材料为用于治疗内脏出血、 动 脉出血或凝血障碍的出 血的止血 材料。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115197866 A 3