(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210563161.6 (22)申请日 2022.05.18 (71)申请人 北京蓝晶微 生物科技有限公司 地址 102206 北京市昌平区生命科 学园生 命园路20号院4 号楼1层 (72)发明人 宗夜晴　王世崇　雷林翰　方施皓　 白悦琪　齐心怡　程萧璇　吴禹卿　 薛子湉　廖梓涵　汪思宇　张登钤　 张之瀚　钱秋晔　周卓楠　王崇毅　 倪好　张梓玥　史泽渝　杨翔翔　 金晏冰　 (74)专利代理 机构 北京路浩知识产权代理有限 公司 11002 专利代理师 商秀玲(51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12R 1/38(2006.01) (54)发明名称 一种沼泽红假单胞菌快速培养方法和培养 基 (57)摘要 本发明涉及微生物培养技术领域， 具体涉及 一种沼泽红假单胞菌快速培养方法和培养基。 本 发明提供用于沼泽红假单胞菌有氧培养的培养 基， 其包括如下组分： 有机氮源3.00～9.00g/L， 铵盐0.88～1.76g/L， 丁二酸钠5.40～10.80g/L， 谷氨酸钠1.12～2.25g/L， 硫酸镁0.20～0.60g/ L。 利用该培养基和有氧培养方法， 沼泽红假单胞 菌可进行快速增殖， 具有较高的生长速率， 可在 短时间内获得较多的沼泽红假单胞菌菌体， 获得 的菌体经一步简单处理后， 即可满足沼泽红假单 胞菌厌氧发酵的需求， 极大地简化了培养过程， 缩短了培养周期。 权利要求书2页 说明书7页 附图1页 CN 114891682 A 2022.08.12 CN 114891682 A 1.用于沼 泽红假单胞菌有氧培养的培养基， 其特征在于， 所述培养基包括如下组分： 有 机氮源3.00～9.00g/L， 铵盐0.88～1.76g/L， 丁二酸钠5.40～10.80g/L， 谷氨酸钠1.12～ 2.25g/L， 硫酸镁0.20～0.6 0g/L。 2.根据权利要求1所述的用于沼 泽红假单胞菌有氧培养的培养基， 其特征在于， 所述培 养基中， 丁 二酸钠和谷氨酸钠的质量比为(4～6)： 1。 3.根据权利要求1所述的用于沼 泽红假单胞菌有氧培养的培养基， 其特征在于， 所述有 机氮源为酵母膏和蛋白胨； 优选地， 所述培养基中， 酵母膏的浓度为2.00～6.00g/L， 蛋白胨的浓度为2.00～ 6.00g/L； 和/或， 所述铵盐为选自硫酸铵、 氯化铵中的一种或两种。 4.根据权利要求1～3任一项所述的用于沼 泽红假单胞菌有氧培养的培养基， 其特征在 于， 所述培 养基还包括pH缓冲剂； 优选地， 所述pH缓冲剂为浓度为1.0 0～3.00g/L的3‑(N‑吗啡啉)丙磺酸； 更优选地， 所述培 养基的pH为6.8～7.6 。 5.用于沼泽红假单胞菌培养的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒包括权利要求1～4任 一项所述的用于沼泽红假单胞菌有氧培养的培养基以及用于沼泽红假单胞菌厌氧培养的 培养基； 优选地， 所述用于沼泽红假单胞菌厌氧培养的培养基包括如下组分： 酵母膏0.10～ 0.30g/L， 磷酸二氢钾1.00～2.00g/L， 磷酸氢二钾1.00～2.00g/L， 七水合硫酸镁0.10～ 0.20g/L， 二水合氯化钙0.01～0.10g/L， 氯化钠0.1～1.0g/L， 硫代硫酸钠0.10～0.20g/L， 柠檬酸铁 0.001～0.010g/L， 对氨基苯甲酸0.0 01～0.010g/L， 无机盐溶 液1.00～2.00mL。 6.根据权利要求5所述的用于沼 泽红假单胞菌快速培养的试剂 盒， 其特征在于， 所述无 机盐溶液包括如下组分： 氯化锌68～72mg/L， 四水合氯化锰9 5～105mg/L， 硼酸58～62mg/L， 六水合氯化钴190～210mg/L， 二水合氯化铜18～22mg/L， 六水合氯化镍18～22mg/L， 二水合 钼酸钠35～45mg/L。 7.权利要求1～4任一项所述的用于沼 泽红假单胞菌有氧培养的培养基或权利要求5或 6所述的用于沼泽红假单胞菌培养的试剂盒在沼泽红假单胞菌有氧培养、 厌氧发酵或菌剂 制备中的应用。 8.一种沼 泽红假单胞菌培养方法， 其特征在于， 所述方法包括： 将沼 泽红假单胞菌接种 于权利要求1～4任一项所述的用于沼泽红假单胞菌有氧培养的培养基中进行种子培养获 得种子液， 将所述种子液接种于权利要求 1～4任一项所述的用于沼泽红假单胞菌有氧培养 的培养基中进行有氧扩大培 养； 优选地， 所述种子培养或有氧扩大培养为在30～37℃条件下震荡、 搅拌和/或通气培 养。 9.根据权利要求8所述的沼泽红假单胞菌培养方法， 其特征在于， 在种子培养前， 还包 括将沼泽红假单胞菌进 行活化的步骤， 所述活化为将沼泽红假单胞菌接种于权利要求 1～4 任一项所述的用于沼泽红假单 胞菌有氧培 养的培养基中进行培 养； 优选地， 活化培 养为在30～37℃条件下震荡、 搅拌和/或通气培 养。 10.根据权利要求8 或9所述的沼 泽红假单胞菌培养方法， 其特征在于， 所述方法还包括权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114891682 A 2在有氧扩大培养后， 收集培养获得的沼泽红假单胞菌， 接种于用于沼泽红假单胞菌厌氧培 养的培养基中进行厌氧光照培 养的步骤； 所述用于沼泽红假单 胞菌厌氧培 养的培养基如权利要求5或6中所述； 优选地， 所述厌氧光照培 养为在3000～5000Lux的光照、 3 0～37℃条件下密闭培 养。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114891682 A 3