(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210539026.8 (22)申请日 2022.05.18 (83)生物保 藏信息 CGMCC No. 17642 2019.04.28 (71)申请人 四川生力源生物工程有限公司 地址 611530 四川省邛崃市临邛镇科旺路4 号 (72)发明人 宋洪宁　王风青　马艳芳　刘军　 张鑫　李丽　任小杰　 (74)专利代理 机构 北京睿智保诚专利代理事务 所(普通合伙) 11732 专利代理师 刘晓静 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12P 13/02(2006.01)C12R 1/125(2006.01) (54)发明名称 一种枯草芽孢杆菌的发酵培养基与一种生 产γ-聚谷氨酸的方法 (57)摘要 本发明涉及一种枯草芽孢杆菌的发酵培养 基与一种生产γ ‑聚谷氨酸的方法， 属于发酵技 术领域。 所述发酵培养基包括如下质量份数的组 分： 啤酒糟5～10份、 味精 0.15～0.3份、 水10～ 30 份； 所述啤酒糟的含水量为60～65％。 本发明的 枯草芽孢杆菌可以利用啤酒糟作为发酵培养基 发酵生产γ ‑聚谷氨酸， 为啤酒糟的综合利用寻 求了一条新路径； 并且发酵后产生的γ ‑聚谷氨 酸的含量高。 发酵生产γ ‑聚谷氨酸的培养基组 分简单， 容易获得， 成本低， 为γ ‑聚谷氨酸的生 产提供新途径。 权利要求书1页 说明书4页 CN 114854635 A 2022.08.05 CN 114854635 A 1.一种枯草芽孢杆菌的发酵培养基， 其特征在于， 所述发酵培养基包括如下质量份数 的组分： 啤酒糟5～10份、 味精0.15～0.3份、 水10～3 0份； 所述啤酒糟的含水量 为60～65％。 2.利用权利要求2所述的发酵培养基生产γ ‑聚谷氨酸的方法， 其特征在于， 包括如下 步骤： (1)将枯草芽孢杆菌 接种于液体培 养基中活化培 养， 得到种子液； (2)将所述种子液接种于 权利要求1所述的发酵培 养基中发酵培 养， 得到γ ‑聚谷氨酸； 所述枯草芽孢杆菌为 枯草芽孢杆菌 YB18； 所述草芽孢杆菌YB18， 保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC， 地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号， 中国科学院微生物研究所， 保藏编号为CGMCC   No.17642， 分类命名为 枯草芽孢杆菌Baci llus subtilis， 保藏时间为2019年 4月28日； 所述接种的种子 液中含有的初 始活菌数为1.0～1.5 ×108cfu/mL； 所述种子 液与发酵培 养基的体积比为 4～5:2500。 3.根据权利要求2所述的方法， 其特征在于， 步骤(1)所述液体培养基以水为溶剂包括 如下浓度的组分： 蛋白胨8～12g/L， 牛肉浸 粉2.5～3.5g/L， 葡萄糖18～ 22g/L， 氯化钠4～6g/L。 4.根据权利要求3所述的方法， 其特 征在于， 步骤(1)所述活化培 养的温度为3 5～39℃； 所述活化培 养的时间为16～ 20h； 所述活化培 养为振荡培 养； 所述振荡的转速为140～16 0rpm。 5.根据权利要求 4所述的方法， 其特 征在于， 步骤(2)所述发酵培 养的温度为3 5～39℃； 所述发酵培 养的时间为 45～72h； 所述发酵培 养为静止 培养。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114854635 A 2一种枯草芽孢杆菌的发酵培养基与一种生产 γ‑聚谷氨酸 的 方法 技术领域 [0001]本发明涉及发酵技术领域， 尤其涉及一种枯草芽孢杆菌的发酵培养基与一种生产 γ‑聚谷氨酸的方法。 背景技术 [0002]γ‑聚谷氨酸(Polyγ ‑glumatic  acid， γ‑PGA)是一种由D ‑和L‑谷氨酸单体组成 的生物可降解无毒害的阴离子均聚物， 可以作为保水剂、 果蔬鲜花储藏保鲜剂、 生长发育促 进剂、 肥料增效剂、 环境 抗逆剂、 土壤改良剂等广泛应用于农业领域。 [0003]啤酒糟， 是啤酒酿造过程中产生的最主要的副产物， 占啤酒生产全部副产物的 85％。 啤酒糟是麦芽和辅料在糖化过程中未溶解的残留物， 主要由麦芽的种皮、 外壳和少量 未完全溶解的淀粉胚乳颗粒等组成， 从化学组成上看， 主要为非淀粉多糖(纤维素、 半纤维 素； 30％～50％)和蛋白质(19％～30％)。 据估计， 全球啤酒糟的年均产量为3900万吨。 一般 每生产100L啤酒， 产生20kg湿啤酒糟； 在我国， 每吨麦芽能产生1.1～1.3吨含水量75％～ 80％的湿啤酒糟。 目前对啤酒糟的利用主要 是作为动物饲料， 随着全球啤酒产量逐年增长， 所产生的啤酒糟年均产量增加， 而饲料市场需求有限， 因此多余的啤酒糟一般作为固体废 物直接排放， 既浪费资源又污染环境。 随着人类环保意识的增强， 对啤酒糟的开发利用成为 研究热点。 纵观现有技术并未发现利用啤酒糟制备γ ‑聚谷氨酸的方法， 也未发现哪种菌株 可以利用啤酒糟来发酵γ ‑聚谷氨酸的先例。 发明内容 [0004]本发明的目的在于提供一种枯草芽孢杆菌的发酵培养基与一种生产γ ‑聚谷氨酸 的方法。 [0005]为了实现上述发明目的， 本发明提供以下技 术方案： [0006]本发明还提供了一种所述的枯草芽孢杆菌的发酵培养基， 所述发酵培养基包括如 下质量份数的组分： [0007]啤酒糟5～10份、 味精0.15～0.3份、 水10～3 0份； [0008]所述啤酒糟的含水量 为60～65％。 [0009]本发明还提供了利用所述的发酵培 养基生产γ ‑聚谷氨酸的方法， 包括如下步骤： [0010](1)将枯草芽孢杆菌 接种于液体培 养基中活化培 养， 得到种子液； [0011](2)将所述种子液接种于所述的发酵培 养基中发酵培 养， 得到γ ‑聚谷氨酸； [0012]所述枯草芽孢杆菌为 枯草芽孢杆菌 YB18； [0013]所述草芽孢杆菌YB18， 保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 CGMCC， 地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号， 中国科学院微生物研究所， 保藏编号为 CGMCC No.17642， 分类命名为枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis， 保藏时间为2019年4月28 日；说　明　书 1/4 页 3 CN 114854635 A 3