(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210538919.0 (22)申请日 2022.05.18 (83)生物保 藏信息 CGMCC No. 24721 202 2.04.19 (71)申请人 四川农业大 学 地址 625014 四川省雅 安市雨城区新康路 46号 (72)发明人 李建龙　李超伟　刘书亮　侯晓艳　 胡凯弟　李琴　李宜洹　郭家馨　 姚尚宇　 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12G 3/02(2019.01) C12R 1/085(2006.01) (54)发明名称 一株产蛋白酶的蜡样芽胞杆菌及其在大曲 中的应用 (57)摘要 本发明提供了一株产蛋白酶的蜡样芽胞杆 菌Bacillus  cereus SAU‑Q1及其应用， 属微生物 技术领域。 从白酒大曲中分离得到一株产蛋白酶 的蜡样芽胞杆菌， 保藏于中国普通微生物菌种保 藏管理中心， 保藏地点为北京市朝阳区北辰西路 1号院， 保藏号为CGMCC  No.24721， 保藏日期为 2022年4月19日。 菌株SAU ‑Q1在固体培养基产 蛋 白酶的活力为1733.16  U/g； 酶蜡样芽胞杆菌 SAU‑Q1分别在90℃、 pH  4.0和16%氯化钠浓度下 菌体存活率依然可以达到71.31%、 30.21%、 22.14%。 将菌株SAU ‑Q1应用于白酒大曲的强化实 验， 试验组 蛋白酶活提高了10%， 试验组白酒大曲 的的曲香味更浓。 菌株SAU ‑Q1在白酒大曲、 食醋 醋曲中具有良好的应用潜力。 权利要求书1页 说明书4页 序列表1页 附图1页 CN 114874942 A 2022.08.09 CN 114874942 A 1.一株产蛋白酶的蜡样芽胞杆菌 Bacillus cereus SAU‑Q1及其应用， 其特征在于： 保 藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心， 保藏号为CGMCC  No. 24721的蜡样芽胞杆菌 Bacillus cereus。 2.根据权利要求1所述产蛋白酶的蜡样芽胞杆菌， 其特征在于： 所述蜡样芽胞杆菌分离 自白酒大曲并应用于白酒大曲发酵。 3.根据权利 要求2所述的蜡样芽胞杆菌的应用， 其特征在于： 将蜡样芽胞杆菌 Bacillus   cereus SAU‑Q1按1% （v/m） 的接种量接种于固体培养基中， 35℃恒温静置培养3天， 蛋白酶活 力为1733.16 U/g。 4.根据权利 要求2所述的蜡样芽胞杆菌的应用， 其特征在于： 将蜡样芽胞杆菌 Bacillus   cereus SAU‑Q1接种至白酒大曲， 同未接种菌株SAU ‑F4的空白对照组对比， 试验组白酒大曲 中蛋白酶活力提高了10%， 且试验组白酒大曲的 的曲香味更浓。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114874942 A 2一株产蛋白酶的蜡样芽胞杆菌及其在大曲中的应用 技术领域 [0001]本发明属于微生物技术领域， 具体涉及一株从白酒大曲中分离得到的产蛋白酶的 蜡样芽胞 杆菌及其应用。 背景技术 [0002]白酒是粮食在酒曲和多种菌共同作用下糖化发酵， 再加上后期的蒸馏、 贮存等工 艺流程， 而成的蒸馏酒； 酒曲中， 微生物种类含量丰富， 不同的微生物可通过不同的生化作 用产生代谢产 物， 从而影响白酒的质量与口感； 蛋白酶在白酒酿造的过程中， 起到 分解原料 中蛋白质的作用； 其分解作用机理主要有3种： 一、 大分子蛋白质直接降解为小分子氨基酸， 生成的氨基酸可为酵母生长代谢所利用， 同时还可为其它生长节约能源； 二、 将原料的壳水 解掉， 使其裸露出来， 待微生物利用， 从而提高白酒产量； 三、 间接使酒中富含独特的香味， 蛋白酶催化了蛋白质的分解， 分解出氨基酸不仅参与了美拉德反应， 产生了吡嗪类、 呋喃类 等一系列具有特殊 香味的物质， 同时在微 生物和酶的催化下也能产生 香味物质。 [0003]在白酒酿造过程中， 微生物的参与及其重要， 其中芽孢杆菌是一类十分重要的产 蛋白酶的菌属， 其产蛋白酶能力极强； 不仅如此， 这类菌属能够拥有良好的环境耐受性， 能 够承受较高的酒精浓度； 朱 国星等从高温大曲中筛选出来的6株高产蛋白酶的菌属皆为芽 孢杆菌； 王婧等以酱香大曲为样品， 从 中分离得到的1株高蛋白酶的菌属， 亦为芽孢杆菌； 因 而在大曲中主产蛋白酶的菌属应为芽孢杆菌； 专利CN201510180738.5公开了产蛋白酶的芽 孢杆菌， 经过优化后蛋白酶活力为294.44U/mL； 发明专利CN202111620797.1公开了一株高 产蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌， 蛋白酶活力达1390.6  U/mL； 王婧从酱香型大曲分离得到地衣 芽孢杆菌FBKL1.0199， 实验室条件下中性蛋白酶达3925.80  U/g； 本发 明专利公开的蜡样 芽 孢杆菌筛选过程蛋白酶活力达1733.16  U/g， 同时本发明专利公开的蜡样芽孢杆菌应用于 大曲发酵试验， 检测大曲中蛋白酶活力较高， 蜡样芽孢杆菌同地衣芽孢杆菌不同属， 特性差 异较大； 由于芽孢杆菌能形成芽孢， 在自然环境中的抵抗力强于其他微生物 （耐高温、 耐低 水分等） ， 菌株SAU ‑Q1在白酒大曲、 食醋大曲中的应用具有巨大的潜力。 发明内容 [0004]本发明主要目的是从白酒大曲中筛选得到一株产蛋白酶蜡样芽孢杆菌并对其应 用进行探索， 本发明极大的丰富了白酒大曲发酵中的产酶菌株资源。 [0005]本发明的目的通过以下技 术方案实现。 [0006]本发明提供一株产蛋白酶蜡样芽孢杆菌 Bacillus  cereus SAU‑Q1， 已于2022年4 月19日保藏于中 国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心， 保藏地点为北京市朝阳区 北辰西路1号院， 保藏 号为CGMCC No. 24721。 [0007]所述的蜡样芽孢杆菌分离于白酒大曲， 经初筛、 复筛、 纯化后得到纯菌， 具有较强 的产蛋白酶能力。 [0008]所述蜡样芽孢杆菌SAU ‑Q1培养特征为： 表面粗糙平整而并不透明， 颜色为污白色，说　明　书 1/4 页 3 CN 114874942 A 3