ICS 11.020 CCS C 05 DB22 吉 林 省 地 方 标 准 DB 22/T 3256—2021 血常规检验结果审核规范 Standard for validation of blood routine test results 2021 - 06 - 01 发布 吉林省市场监督管理厅 2021 - 06 - 15 实施 发 布 DB22/T 3256—2021 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本文件由吉林大学提出。 本文件由吉林省卫生健康委员会归口。 本文件起草单位：吉林大学第一医院 。 本文件主要起草人：续薇、曲林琳、王学军、李映潼、赵旭、黄晶、许建成、陈显秋。 I DB22/T 3256—2021 血常规检验结果审核规范 1 范围 本文件规定了血常规检验结果审核的仪器与试剂、样本、规则建立流程、限值/临界值确定、质量 控制、自动审核规则适宜性评价和安全性保证。 本文件适用于临床实验室血常规检验结果的自动审核。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 WS/T 246 白细胞分类计数参考方法 WS/T 347 血细胞分析的校准指南 WS/T 616 临床实验室定量检验结果的自动审核 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 自动审核 autoverification 应用简单或复杂的规则，根据事先建立的实验室标准，为常规结果的审核和发送提供高效的过程。 3.2 假阴性 false negative 样本结果未触发自动审核规则同时符合镜检阳性的标准。 3.3 真阳性 true positive 样本结果触发自动审核规则同时符合镜检阳性的标准。 3.4 假阳性 false positive 样本结果触发自动审核规则同时不符合镜检阳性的标准。 3.5 真阴性 true negative 样本结果未触发自动审核规则同时不符合镜检阳性的标准。 3.6 通过率（放行率） pass rate 未触发自动审核规则的样本例数/样本总例数。 3.7 1 DB22/T 3256—2021 通过正确率 pass accuracy 未触发自动审核规则的样本中真阴性例数/放行样本的总例数。 4 仪器与试剂 4.1 仪器 4.1.1 4.1.2 4.1.3 4.1.4 4.1.5 4.1.6 4.1.7 4.1.8 4.2 试剂与耗材 4.2.1 4.2.2 4.2.3 4.2.4 5 全自动血液分析仪。 全自动推片染片机。 全自动阅片机。 标准普通光学显微镜，含低倍镜（10×10）、高倍镜（10×40）、油浸镜（10×100）的显微镜。 乙二胺四乙酸二钾（EDTA～K2）,抗凝剂终浓度为每毫升血液 1.5 mg～2.2 mg 的真空采血管。 37 ℃恒温水浴箱。 医用冰箱：2 ℃～8 ℃。 低温高速离心机：最高转速≥24000 g。 血液分析仪用试剂、质控品、校准品，宜使用仪器配套试剂。 瑞氏吉姆萨染液及磷酸盐缓冲液（pH 6.4～7.0）。 镜检高倍视野用镜油。 血涂片用载玻片。 样本 5.1 采集 5.1.1 5.1.2 5.2 采集 EDTA～K2 抗凝静脉血样本 1.5 mL～2.0 mL。 样本接收记录采用实验室的 LIS 系统自动记录。 保存运输 待检样本在15 ℃～30 ℃的室温下及时送检，宜4 小时内完成检测。 5.3 拒收样本 实验室应制定拒收的不合格样本如： a) 抗凝不充分，有凝块的样本； b) 无标签或标签信息不明确的样本； c) 采集量不符合要求的样本； d) 采集管或抗凝剂使用错误的样本； e) 类型不正确的样本； f) 空管、漏管等情况的样本等。 5.4 2 样本入组 DB22/T 3256—2021 5.4.1 建立自动审核规则时，随机选择门急诊或住院患者的血常规样本，其中首诊样本 80%，复诊样 本 20%，用于差值检验（delta check）规则的建立，差值检查样本时限宜为 1 天～7 天。样本量至少为 1000 份，包括 800 份首诊患者样本，200 份为之前在 800 例样本中已经检测过的样本。 5.4.2 自动审核规则建立时应进行验证，要至少收集 300 份门急诊或住院患者的血常规样本并检测用 于规则的验证。 5.4.3 自动审核规则建立后应进行周期性验证，至少在 5000 份以上日常检测样本数据进行验证。 6 6.1 规则建立流程 调试校准 6.1.1 按照全自动血液分析仪生产厂家说明书的要求将仪器调试到正常可用状态。 6.1.2 样本上机检测前应进行仪器的校准，校准过程应符合 WS/T 347 的要求，如采用血液分析仪配套 校准品来校准仪器。 6.1.3 确认通过性能验证，如仪器正确度、精密度、可报告范围等。 6.2 形态学考核 6.2.1 参与镜检的人员应进行形态学考核，考核通过后可参与自动审核规则建立与验证中的形态学镜 检工作。 6.2.2 建议由在相关专业工作不少于 5 年，具有丰富临床实验室工作经验的中级及以上职称人员完成 镜检工作。 6.2.3 多人进行形态学镜检是应进行人员比对，比对以有经验的形态学人员为基准，一致性的符合率 应≥80%。 6.2.4 血涂片镜检方法应符合 WS/T 246 的要求。 6.2.5 镜检阳性判断应符合如下条件： a) 细胞形态≥2+，且只要发现疟原虫均认为是红细胞有阳性形态改变； b) 大血小板形态≥2+； c) 血小板偶见聚集； d) Döhle 小体≥2+； e) 中毒颗粒≥2+； f) 空泡变性≥2+； g) 原始和幼稚细胞≥1%； h) 早幼粒细胞和中幼粒细胞≥1%； i) 晚幼粒细胞≥2%； j) 异型淋巴细胞>5%； k) 有核红细胞>1%； l) 浆细胞>1%。 6.2.6 镜检报告中使用的异常血细胞的名称，见附录 A。 6.3 数据采集 6.3.1 随机挑选日常门急诊或住院的患者血常规样本在全自动血液分析仪上进行检测，检测后备份或 导出每个样本的检测结果报告数据； 6.3.2 镜检形态学检查的数据如下： 3 DB22/T 3256—2021 a) 每个样本推片染色 2 张血涂片，镜检人员对血涂片镜检检查， b) 低倍镜观察：观察血片的整体，涂片的制作以及染色的状态，并找出适合镜检的部位。 c) 观察白细胞和血小板的增减，估计血小板的数量，是否有血小板聚集，估计聚集血小板的堆数， 是否有红细胞聚集或缗钱状出现，血涂片的左右两侧以及尾部是否有巨大细胞（肿瘤细胞）出 现，是否有白细胞聚集。 d) 油浸镜观察：镜下观察 200 个白细胞分类及形态，红细胞的形态，血小板的形态及数量估计， 最后记录镜检结果。 e) 有条件的实验室，可以采用经验证的全自动阅片机进行自动阅片。 6.3.3 建立自动审核规需要血细胞分析仪检测的结果报告数据、镜检形态学检查的数据，此外还需要 每个样本的患者信息、临床信息、设备研究参数、报警信息、激光灵敏度参数等。 7 限值/临界值（cutoff）确定 7.1 审核规则项目条件的确定应依据全部检测结果报告参数、镜检形态学检查结果和研究参数、灵敏 度参数等其他参数的汇总后统计（宜使用微机进行数据统计），筛选确定自动审核规则中包含的项目。 7.2 设置审核规则项目的限值即临界值（cutoff 值）应在统计软件中输入自动审核条件（项目参数和 cutoff 值），并在 ROC 曲线上确定审核规则的 cutoff 值。 7.3 建立的自动审核规则的条件输入，利用临床样本的检测结果来验证规则，同时调整每个自动审核 规则项目的 cutoff 值，以确保漏检率小于 5%，且没有重要的异常细胞（如原始细胞）漏检等。 7.4 统计规则建立与验证的假阴性、真阳性、假阳性、真阴性、自动审核通过率及通过正确率等指标， 最终形成血常规检验结果自动审核规则，形成的自动审核规则示例见附录 B。 8 质量控制 8.1 应使用至少两水平仪器配套的质控品。 8.2 每天应至少做两批次质控分析，确保分析样本前后的质控结果在控，样本的数据才能用于自动审 核规则的建立与验证。 8.3 质控应覆盖所有自动审核规则中涉及的参数，包括报告参数、研究参数、激光的灵敏度参数等。 8.4 报警信息的质量控制应由激光的灵敏度参数决定，在激光灵敏度参数在控的情况下，报警信息的 质量可以得到保证。 9 自动审核规则适宜性评价 9.1 统计自动审核规则的假阴性率小于 5%。 9.2 自动审核规则筛选后自动放行的样本中没有重要的异常细胞（如原始细胞）漏检。 9.3 没有错误的结果漏检（依据临床反馈及报告假阴性率）。 9.4 在满足以上 3 点的情况下，尽可能降低假阳性，提高自动审核通过率。 9.5 宜采用人工审核的方式抽查自动审核规则有无漏检重要异常细胞和错误结果，是否存在规则失效 的情况。 9.6 定期与临床沟通，以便评估自动审核规则有误漏检重要异常细胞和错误结果。 9.7 自动审核规则项目及限值因检测系统不同而异，实验室应进行应用前验证。 10 安全性保证 4 DB22/T 3256—2021 10.1 在使用自动审核软件时，应设置使用者的权限，以防止随意更改。 10.2 在仪器出现质控失控、网络故障、仪器故障等情况时，授权人员随时关闭自动审核功能，转为人 工审核模式。 5 DB22/T 3256—2021 AA 附 录 A （规范性附录） 异常血细胞形态的命名标准 A.1 红细胞镜检判断标准（镜下观察不少于 1000 个红细胞） A.1.1 A.1.2 A.1.3 A.1.4 A.1.5 A.1.6 A.1.7 A.1.8 A.1.9 A.1.10 A.1.11 A.1.12 A.1.13 A.1.14 A.1.15 A.1.16 A.1.17 A.1.18 A.1.19 A.1.20 A.1.21 A.1.22 A.1.23 A.1.24 A.1.25 A.1.26 A.2 A.2.1 A.2.2 A.2.3 A.2.4 A.2.5 A.2.6 6 大红细胞（Macrocytes）>10%（红细胞直径大于8.5 μm，体积大于100fl） 卵圆形大红细胞（Oval macrocytes）>2% 小红细胞（Microcytes）>10%（红细胞直径小于7 μm，体积小于80 fl）