(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210797070.9 (22)申请日 2022.07.08 (71)申请人 辽宁大学 地址 110000 辽宁省沈阳市沈北新区道义 南大街58号 (72)发明人 陈立江　郝俊旭　陶旭　李指航　 (74)专利代理 机构 沈阳杰克知识产权代理有限 公司 21207 专利代理师 罗莹 (51)Int.Cl. A61K 9/51(2006.01) A61K 31/337(2006.01) A61K 47/42(2017.01) A61K 47/46(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种生物膜包裹的载药蛋白纳米粒及其制 备方法 (57)摘要 本发明涉及一种生物膜包裹的载药蛋白纳 米粒及其制备方法， 属于药物制剂领域。 该生物 膜包裹的载药蛋白纳米粒是通过生物相容性好、 无毒性、 易于表面修饰的天然高分子蛋白载体与 疏水性抗肿瘤药物自组装成载药蛋白纳米粒子， 进而采用高压挤出法制备生物膜包裹的载药蛋 白纳米粒。 本发 明制备的生物膜包裹的载药蛋白 纳米粒通过生物膜粘附于肠道并被小肠上皮细 胞吞噬， 实现疏水性抗肿瘤药物的口服给药， 改 善疏水药物的抗肿瘤效果， 降低不良反应 。 权利要求书2页 说明书6页 附图6页 CN 114983970 A 2022.09.02 CN 114983970 A 1.一种生物膜包裹的载药蛋白纳米粒， 其特征在于， 所述的一种生物膜包裹的载药蛋 白纳米粒是通过天然高分子蛋白载体与疏水性抗肿瘤药物自组装成载药蛋白纳米粒子， 然 后采用生物 膜包裹载 药蛋白纳米粒子 。 2.根据权利要求1所述的一种生物膜包裹的载药蛋白纳米粒， 其特征在于， 所述的生物 膜为红细胞膜、 免疫细胞膜或细菌 外膜囊泡。 3.根据权利要求2所述的一种生物膜包裹的载药蛋白纳米粒， 其特征在于， 所述的天然 高分子蛋白载体为丝素蛋白或白蛋白。 4.根据权利要求3所述的一种生物膜包裹的载药蛋白纳米粒， 其特征在于， 所述的疏水 性抗肿瘤药物为 紫杉醇、 阿霉素、 喜树碱、 姜黄素、 索拉菲尼或吉西他滨。 5.根据权利要求4所述的一种生物膜包裹的载药蛋白纳米粒， 其特征在于， 所述的生物 膜为细菌外膜囊泡； 所述的天然高分子蛋白载体为丝素蛋白； 所述的疏水性抗肿瘤药物为 紫杉醇。 6.权利要求5所述的一种生物膜包裹的载药蛋白纳米粒的制备方法， 其特征在于， 包括 如下步骤： 1)丝素蛋白的提取： 取10g剪碎后的茧壳， 置于Na2CO3水溶液中， 100℃加热搅 拌30min后 使用大量蒸馏水冲洗， 以上对剪碎后的茧壳的处理过程重复三次后， 60℃ 烘干得脱胶蚕丝， 取5g脱胶蚕丝置于50mL  LiBr水溶液中， 65℃加热搅拌2h， 制得丝素蛋白水溶液， 透析后离 心收集上清液， 即为丝素蛋白溶 液， 经冷冻干燥后得到固体粉末， 于4℃环境下密封保存； 2)紫杉醇丝素蛋白纳米粒的制备： 取紫杉醇溶于无水乙醇中， 逐滴加入到步骤1)得到 的丝素蛋白溶液中并搅拌， 在较低的离心转速下离心5min除去产物中絮状物， 随后在较高 的离心转速下离心20min收集紫杉醇丝素蛋白纳米粒， 蒸馏水洗涤3次， 冻干后 ‑20℃环境下 保存； 3)细菌外膜囊泡的提取： 取大肠埃希菌培养液， 离心收集上清液， 使用0.45μm滤膜过 滤， 而后将滤液放入超滤离心管中， 继续离心至体积 变为原来的20％， 得到浓缩的细菌外膜 囊泡混悬 液； 4)细菌外膜囊泡包裹的紫杉醇丝素蛋白纳米粒的制备： 采用高压挤出法制备细菌外膜 囊泡包裹的紫杉醇丝素蛋白纳米粒， 而后4℃ 环境下以20000rpm离心1h， 收集沉淀即为目标 产物。 7.根据权利要求6所述的一种生物膜包裹的载药蛋白纳米粒的制备方法， 其特征在于， 步骤1)中， 所述的Na2CO3水溶液的浓度是0.2mol/L； 所述的LiBr水溶液的浓度是9.5mol/L； 所述的透析采用的是分子量 为12000kDa的透析袋。 8.根据权利要求6所述的一种生物膜包裹的载药蛋白纳米粒的制备方法， 其特征在于， 步骤2)中， 所述的紫杉醇取样量是12.66mg； 所述的丝素蛋白溶液的浓度是3.78mg/mL； 所述 的搅拌时间是 75min。 9.根据权利要求6所述的一种生物膜包裹的载药蛋白纳米粒的制备方法， 其特征在于， 步骤2)中， 所述的较低的离心转速为6 000rpm； 所述的较高的离心转速为13 000rpm。 10.根据权利要求6所述的一种生物膜包裹的载药蛋白纳米粒的制备方法， 其特征在 于， 步骤4)中， 所述的高压挤出法的具体步骤如下： 取紫杉醇丝素蛋白纳米粒重悬， 与浓缩 的细菌外膜囊泡混悬液混合均匀， 将混合液放于脂质体挤出仪中， 经200nm的聚碳酸酯膜 挤权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114983970 A 2出， 挤出过程重复10次。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114983970 A 3