(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211149700.8 (22)申请日 2022.09.21 (71)申请人 重庆智合 生物医药有限公司 地址 400700 重庆市北碚区安 礼路128号大 学科技园科技创业中心C座21 1室 (72)发明人 但彦春　杨艳舒　廖鹏　 (74)专利代理 机构 北京酷爱智慧知识产权代理 有限公司 1 1514 专利代理师 刘志刚 (51)Int.Cl. C12P 13/00(2006.01) C12N 1/20(2006.01) (54)发明名称 一种四乙酰 植物鞘氨醇的发酵生产方法 (57)摘要 本发明公开了一种四乙酰植物鞘氨醇的发 酵生产方法， 所述四乙酰植物鞘氨醇的发酵生产 方法包括如下步骤： 将产生四乙酰植物鞘氨醇的 菌种进行活化， 得到种子液； 将种子液接种至种 子培养基中进行一级培养， 得到一级种子液， 再 将一级种子液接种至种子培养基中进行二级培 养， 得到二级种子液； 将二级种子液接种至发酵 培养基中进行发酵培养、 放罐； 本发明发酵生产 方法通过培养基、 发酵工艺的优化， 并配套最优 糖点分段控制工艺、 pH值分段控制工艺， 显著提 高了四乙酰植物鞘氨醇发酵水平， 具体产率提高 30％以上， 大幅度降低了生产成本， 同时节约了 能源， 提高了劳动生产率。 权利要求书1页 说明书6页 CN 115323012 A 2022.11.11 CN 115323012 A 1.一种四乙酰 植物鞘氨醇的发酵生产方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： (a)将产生四乙酰 植物鞘氨醇的菌种进行活化， 得到种子液； (b)将种子液接种至种子培养基 中进行一级培养， 得到一级种子液， 再将一级种子液接 种至种子 培养基中进行二级培 养， 得到二级种子液； (c)将二级种子液接种至发酵培 养基中进行发酵培 养、 放罐； 所述发酵培 养基包含如下组分： 葡萄糖5％～8％、 酵母浸粉0.2％～0.8％、 酵母粉0.2％～0.5％、 磷酸二氢钾0.5％～ 1％、 硫酸铵0.1％～0.5％、 氯化钙0.2％～0.5％、 七水硫酸镁0.2％～0.8％、 一水柠檬酸 0.001％～0.01％、 烟酸0.001％～0.005％、 七水合硫酸亚铁0.002％～0.005％、 盐酸硫胺 素0.002％～0.0 05％， 消泡剂0.1～0.6ml/L。 2.根据权利要求1所述的四乙酰植物鞘氨醇的发酵生产方法， 其特征在于， 所述种子培 养基包含如下组分： 葡萄糖5％～8％、 酵母浸粉0.2％～0.8％、 酵母粉0.2％～0.5％、 磷酸二氢钾0.1％～ 0.5％、 磷酸氢二钾0.5％～1％、 硫酸铵0.1％～0.5％、 氯化钙0.2％～0.5％、 一水柠檬酸 0.001％～0.01％、 烟酸0.001％～0.005％、 七水合硫酸亚铁0.002％～0.005％、 盐酸硫胺 素0.002％～0.0 05％， 消泡剂0.1～0.6ml/L。 3.根据权利要求1所述的四乙酰植物鞘氨醇的发酵生产方法， 其特征在于， 所述一级培 养为在22～28℃、 溶解氧饱和度为3 0％～50％的条件下通气搅拌培 养30～50h； 所述二级培养为在22～28℃、 溶解氧饱和度为30 ％～50％的条件下通气搅拌培养20～ 35h。 4.根据权利要求3所述的四乙酰植物鞘氨醇的发酵生产方法， 其特征在于， 所述一级培 养中搅拌转速为10 0～250rpm， 通气量 为18～27m3/h； 所述二级培养中搅拌转速为10 0～160rpm， 通气量 为100～120m3/h。 5.根据权利要求1所述的四乙酰植物鞘氨醇的发酵生产方法， 其特征在于， 所述发酵培 养为在在22～28℃、 溶解氧饱和度为20％～3 0％的条件下通气搅拌培 养。 6.根据权利要求5所述的四乙酰植物鞘氨醇的发酵生产方法， 其特征在于， 所述发酵培 养中搅拌转速为6 0～150rpm， 通气量 为800～1000m3/h。 7.根据权利要求1所述的四乙酰植物鞘氨醇的发酵生产方法， 其特征在于， 所述发酵培 养过程中采用氨水控制pH值 为5.0～5.6 。 8.根据权利要求1所述的四乙酰植物鞘氨醇的发酵生产方法， 其特征在于， 所述发酵培 养过程通过添加补料培养基调节葡萄糖浓度， 其中， 在24～48h内葡萄糖浓度为10～20g/L； 48～72h内葡萄糖浓度为30～40 g/L； 72～96h 内葡萄糖浓度为50～80g/L； 96～118h内葡萄 糖浓度为90～1 10g/L； 所述补料培 养基为浓度为 400～600g/L的葡糖 糖溶液。 9.根据权利要求1所述的四乙酰植物鞘氨醇的发酵生产方法， 其特征在于， 所述放罐前 5h停止补料并且待葡萄糖浓度≤ 3g/L时进行放罐。 10.根据权利要求1所述的四乙酰植物鞘氨醇的发酵生产方法， 其特征在于， 所述活化 采用的培 养基为沙氏琼脂 培养基。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115323012 A 2一种四乙酰植物 鞘氨醇的发酵生产方 法 技术领域 [0001]本发明涉及四乙酰植物鞘氨 醇的生产技术领域， 具体涉及一种四乙酰植物鞘氨 醇 的发酵生产方法。 背景技术 [0002]四乙酰植物鞘氨醇， 磷脂质(Ceramides)的前驱物， 与皮肤脂质较为相 近， 是水分 保持和屏障功 能的重要组分； 是人体表皮中重要的油脂成分之一， 随着年龄加大和进入老 年期， 人体 皮肤中的植物鞘氨醇会渐渐减少， 导致干性皮肤和粗糙皮肤,外用植物鞘氨醇有 高效保持皮肤柔润、 并有保护皮层的作用； 植物鞘氨醇有抗菌性， 也有抗炎作用， 可用于痤 疮等皮肤疾患的防治。 [0003]目前， 四乙酰植物鞘氨醇的制 备方法包括菌种发酵法， 但现有菌种发酵方法由于 发酵工艺 不合理， 导致四乙酰 植物鞘氨醇的产量较低， 导 致生产成本较高。 [0004]有鉴于此， 特提出本发明。 发明内容 [0005]本发明的目的在于提供一种四乙酰植物鞘氨醇的发酵生产方法， 该发酵生产方法 通过培养基以及工艺的优化， 显著提高四乙酰 植物鞘氨醇的产率， 大幅降低了生产成本 。 [0006]为了实现本发明的上述目的， 特采用以下技 术方案： [0007]本发明第一方面提供一种四乙酰植物鞘氨 醇的发酵生产方法， 所述四乙酰植物鞘 氨醇的发酵生产方法包括如下步骤： [0008](a)将产生四乙酰 植物鞘氨醇的菌种进行活化， 得到种子液； [0009](b)将种子液接种至种子培养基中进行一级培养， 得到一级种子液， 再将一级种子 液接种至种子 培养基中进行二级培 养， 得到二级种子液； [0010](c)将二级种子液接种至发酵培 养基中进行发酵培 养、 放罐； [0011]所述发酵培 养基包含如下组分： [0012]葡萄糖5％～8％、 酵母浸粉0.2％～0.8％、 酵母粉0.2％～0.5％、 磷酸二氢钾 0.5％～1％、 硫酸铵0.1％～0.5％、 氯化钙0.2％～0.5％、 七水硫酸镁0.2％～0.8％、 一水 柠檬酸0.001％～0.01％、 烟酸0.001％～0.005％、 七水合硫酸亚铁0.002％～0.005％、 盐 酸硫胺素0.0 02％～0.0 05％， 消泡剂0.1～0.6ml/L。 [0013]优选地， 所述种子 培养基包含如下组分： [0014]葡萄糖5％～8％、 酵母浸粉0.2％～0.8％、 酵母粉0.2％～0.5％、 磷酸二氢钾 0.1％～0.5％、 磷酸氢二钾0.5％～1％、 硫酸铵0.1％～0.5％、 氯化钙0.2％～0.5％、 一水 柠檬酸0.001％～0.01％、 烟酸0.001％～0.005％、 七水合硫酸亚铁0.002％～0.005％、 盐 酸硫胺素0.0 02％～0.0 05％， 消泡剂0.1～0.6ml/L。 [0015]优选地， 所述一级培养为在22～28℃、 溶解氧饱和度为30％～50％的条件下通气 搅拌培养30～50h；说　明　书 1/6 页 3 CN 115323012 A 3