(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211156178.6 (22)申请日 2022.09.22 (83)生物保 藏信息 CCTCC M 20220 92 2022.01.18 (71)申请人 南昌大学 地址 330031 江西省南昌市新建区红谷滩 新区学府大道 999号 (72)发明人 张志鸿　邹开翔　李一娟　李新瑞　 李金梅　魏华　 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A23C 9/123(2006.01) A23K 10/18(2016.01) A23K 50/30(2016.01) C12R 1/225(2006.01) (54)发明名称 一株罗伊氏乳杆菌 HLRE05及其应用 (57)摘要 本发明属于微生物 技术领域， 具体涉及一株 罗伊氏乳 杆菌HLRE05及其应用。 该罗伊氏乳杆菌 HLRE05的名称为Lactobacillus  reuteri   HLRE05， 已于2 022年01月18日保藏于中国典型培 养物保藏中心， 编号为CCTCC  M 2022092。 本发明 提供了一株高产罗伊氏菌素的罗伊氏乳杆菌 HLRE05， 发酵液中罗伊氏菌 素浓度高达9.98g/L， 远高于标准株罗伊氏乳杆菌ATCC6475的产量 3.7g/L， 具有广 阔的工业应用前景， 可应用于制 备微生物饲料添加剂中， 极大促进仔猪的生长发 育和提高仔猪的免疫力； 还可应用于制备发酵酸 奶中， 保证了发酵酸奶的营养价值和保健功能的 同时降低了产品污染的风险， 并且能够在不改变 酸奶理化性质前提下显著延长发酵酸奶的货架 期。 权利要求书1页 说明书6页 附图4页 CN 115466697 A 2022.12.13 CN 115466697 A 1.一株罗伊氏乳杆菌HLRE05， 其特征在于， 所述罗伊氏乳杆菌HLRE05的名称为Lacto   bacillus  reuteri HLRE05， 已于2022年01月18日保藏于中国典型培养物保藏中心， 编号为 C CTCC M 2022092。 2.根据权利 要求1所述的罗伊氏乳杆菌HLRE05， 其特征在于， 所述罗伊氏乳杆菌HLRE05 的16S rRNA的序列如SEQ  ID No.1所示。 3.权利要求1或2所述的罗伊氏乳杆菌 HLRE05在制备微 生物饲料 添加剂中的应用。 4.一种微生物饲料添加剂的制备方法， 其特征在于， 包括以下步骤： 将权利要求1或2所 述的罗伊氏乳杆菌 HLRE05接种于包 含甘油的MRS液体培 养基中， 发酵 得到。 5.根据权利要求4所述的制备方法， 其特征在于， 发酵条件为： 发酵温度为37℃， 接种量 为1％， 发酵时间为24h 。 6.根据权利要求4所述的制备方法， 其特征在于， 发酵后还需进行喷雾干燥， 喷雾干燥 的条件为： 物料浓度10％， 进风温度为15 0℃， 出风温度为75℃。 7.一种微 生物饲料 添加剂， 其特 征在于， 由权利要求 4至6任一项所述的制备 方法制得。 8.权利要求1或2所述的罗伊氏乳杆菌 HLRE05在制备发酵酸 奶中的应用。 9.一种发酵酸奶， 其特征在于， 所述发酵酸奶由益生菌发酵鲜奶得到， 所述益生菌包括 权利要求1或2所述的罗伊氏乳杆菌 HLRE05。 10.一种用于权利要求9所述的发酵酸奶的生产方法， 其特征在于， 包括以下步骤： 每吨 鲜奶添加所述罗伊氏乳杆菌HLRE05  0.1kg， 在40℃条件下发酵4 ‑5h； 然后按照每吨鲜奶添 加4.6kg的比例加入甘油并均质， 然后在相同条件下继续发酵， 直至最终酸度达 到70°T。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115466697 A 2一株罗伊氏乳杆菌HLRE05及其应用 技术领域 [0001]本发明属于微 生物技术领域， 具体涉及一株罗伊氏乳杆菌 HLRE05及其应用。 背景技术 [0002]食品和动物饲料在加工、 运输、 储存过程中， 极易受到如蜡样芽孢杆菌、 金黄色葡 萄球菌和单核增生李斯特菌等食源性致病菌的污染， 食用受污染后的食品或动物饲料后将 会对人和动物的健康造成较大影响， 并带来较大的经济损失。 [0003]例如酸奶在加工、 运输、 贮藏、 销售以及食用期间都可能遭受微生物的污染， 污染 后有可能引起急性短期效应的食源性疾病或具有慢性长期效应的长期危害。 目前食品工业 主要是通过添加人工合成化学添加剂可以防止食物变质、 延长食品保质期。 但经大量研究 发现， 过量摄入人工合成化学添加剂对人体健康有着不同程度的损耗， 随着相关部门的不 断重视以及消费者的健康意识不断增强， 开发一种新的降低污染方法十分有必要。 [0004]又例如腹泻是仔猪养殖过程中发病率非常高的疾病之一， 是影响仔猪成活率的重 要因素之一。 腹泻会影响仔猪的正常生长及精神状态， 严重甚至导致仔猪脱水死亡。 仔猪易 腹泻的原因是体内的肠道仍未发育完全， 免疫力较差， 此阶段是肠道菌群开始形成的时期， 极容易受到外界因素的影响， 尤其是大肠杆菌、 沙门氏菌等病原菌和病毒的感染， 导致仔猪 出现腹泻症状。 具体而言， 目前市场上针对细菌性腹泻治疗药物多为抗生素对症治疗。 然而 抗生素处理本身会影响仔猪肠道菌群平衡， 破坏肠道屏障， 产生 “超级细菌 ”并残留于产品 严重威胁着人类的健康， 副作用较大。 随着饲料产业全面禁用抗生素， 研发一种无副作用且 预防腹泻效果明显的新型饲料 添加剂已是饲料 行业的热点。 [0005]罗伊氏菌素， 主要成分是3 ‑羟基丙醛， 其在水溶液中的聚合和水合作用是可逆的， 形成3‑羟基丙醛的单体、 二聚体和水合物的动态平衡 混合体系， 即为罗伊氏菌素。 罗伊氏菌 素在较宽的pH值范围内(4.1 ‑7.0)保持活性， 对蛋白酶和解脂酶具有抗性， 热稳定性好， 对 革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌以及酵母均有抑制作用， 罗伊氏菌素被认为是一种潜在的适 合食品生物保存的添加剂， 具有较大的工业应用潜力。 但是目前， 极少量文献报道罗伊氏乳 杆菌代谢产罗伊氏菌素， 且产量低， 均不高于 50mmol/L(3.7g/L)。 [0006]因此， 开发一种能特异性代谢产罗伊氏菌素且高产量的罗伊氏乳杆菌能丰富益生 菌菌种资源， 同时为 其在工业 生成应用中提供 更多潜在价 值。 发明内容 [0007]本发明的第一个目的是提供一株高产罗伊氏菌素的罗伊氏乳杆菌， 发明人从健康 家禽新鲜排泄物中分离到一株罗伊氏乳杆菌， 具有编码罗伊氏菌素的pdu基因簇， 可以通过 代谢甘油产广谱抗菌物质罗伊氏菌素， 所述罗伊氏乳杆菌HLRE05的名称为Lactobacillus   reuteri HLRE05， 已于2022年01月18 日保藏于中国典型培养物保藏中心， 编号为CCTCC  M  2022092， 其16S rRNA的序列如SEQ  ID No.1所示： [0008]AGGCCCCTGCGGTGTGCTTATACTTGCAAGTCGTACGCACTGGCCCAACTGATTGATGGTGCTTGCAC说　明　书 1/6 页 3 CN 115466697 A 3