(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211211728.X (22)申请日 2022.09.30 (71)申请人 武汉工程大 学 地址 430074 湖北省武汉市洪山区雄楚大 街693号 (72)发明人 肖春桥　金泳彤　池汝安　 (74)专利代理 机构 湖北武汉 永嘉专利代理有限 公司 42102 专利代理师 闭钊 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/14(2006.01) C12N 11/14(2006.01) C12N 11/12(2006.01) C12N 1/38(2006.01)C05F 17/20(2020.01) C05G 3/60(2020.01) C05G 3/80(2020.01) C12R 1/125(2006.01) C12R 1/685(2006.01) C12R 1/80(2006.01) C12R 1/885(2006.01) (54)发明名称 一种用于秸秆高温堆肥的复合微生物菌剂 及其制备方法 (57)摘要 本发明涉及一种用于秸秆高温堆肥的复合 微生物菌剂及其制备方法。 首先分别将枯草芽孢 杆菌、 拟康氏木霉菌、 草酸青霉菌、 黑曲霉菌接种 至种子培养基中培养一次， 然后再分别接种至液 体发酵培养基中培养， 得到四种不同菌液； 将各 个菌液按比例混合， 再加入营养物质、 吸附载体 等， 混合均匀后静置1 ‑2天， 最后喷雾干燥得到复 合微生物菌剂成 品。 本发明提供的复合微生物菌 剂用于生物肥料制备时， 能够非常显著的提高生 物肥料的制备效率， 还具有显著改善土壤理化条 件、 改善植物根际生长和防病虫害、 增产效果， 具 有较好的应用前 景。 权利要求书2页 说明书6页 CN 115418335 A 2022.12.02 CN 115418335 A 1.一种用于秸秆高温堆肥的复合微生物菌剂， 其特征在于： 该复合微生物菌剂的组成 包括复合菌群、 营养物质、 吸附载体。 2.如权利要求1所述的复合微生物菌剂， 其特征在于： 所述复合菌群由枯草芽孢杆菌、 拟康氏木霉菌、 草 酸青霉菌、 黑曲霉菌按照3 0‑35： 20‑25： 20‑25： 30‑35的重量比复合而成。 3.如权利要求1所述的复合微生物菌剂， 其特征在于： 所述营养物质包括脱脂奶粉、 蔗 糖、 甘露醇等。 4.如权利要求1所述的复合微生物菌剂， 其特征在于： 所述吸附载体选自凹凸棒土、 硅 藻土、 生物炭、 膨润土、 滑石粉、 秸秆粉中的至少两种。 5.如权利要求1所述的复合微生物菌剂， 其特征在于： 所述复合微生物菌剂为粉末状， 活菌数≥10.0亿/g， 复合微生物菌剂中营养物质 、 吸附载体的质量含量分别相当于干燥前 菌液总重量的1％ ‑3％、 20％ ‑30％。 6.权利要求1所述用于秸秆高温堆肥的复合微生物菌剂的制备方法， 其特征在于， 该方 法包括以下步骤： (a)分别将枯草芽孢杆菌、 拟康氏木霉菌、 草酸青霉菌、 黑曲霉菌接种至培 养基中培养， 得到一系 列发酵菌液； (b)将各个菌液按比例混合， 再加入营养物质、 吸附载体 并混合均匀， 所 得混合物喷雾 干燥即可。 7.如权利要求6所述的方法， 其特征在于步骤(a)中各个菌种的培养方法如下： 将菌种 接种至种子培养基中培养， 培养完再次接种至发酵培养基中继续培养， 直至发酵液中的活 菌数达到目标值时停止发酵， 由此 得到发酵菌液。 8.如权利要求7所述的方法， 其特征在于： 枯草芽孢杆菌的培养条件为： 第一次培养时 的接种量为0.5％ ‑2％， 培养温度30 ‑35℃， 搅拌转速160 ‑200rpm/min， 培养时间1 ‑4天， pH值 6.5‑7.5， 溶解氧20％ ‑30％； 第二次培养时的接种量为5％ ‑10％， 搅拌转速160 ‑200rpm/ min， 培养温度30 ‑35℃， 培养时间3 ‑5天， pH值6.5 ‑7.5， 溶解氧20％ ‑30％； 停止发酵时发酵 液中的活菌数需达到(1 ‑3)×1010cfu/g； 拟康氏木霉菌的培养条件为： 第一次培养时的接种 量为1％‑2％， 培养温度28 ‑30℃， 搅拌转速180 ‑200rpm/min， 培养时间1 ‑4天， pH值6.5 ‑7.5， 溶解氧20％ ‑30％； 第二次培养时的接种量为5％ ‑8％， 搅拌转速180 ‑200rpm/min， 培养温度 28‑30℃， 培养时间3 ‑7天， pH值6.5 ‑7.5， 溶解氧20％ ‑30％； 停止发酵时发酵液中的活菌数 需达到(1 ‑3)×1010cfu/g； 草酸青霉菌的培养条件为： 第一次培养时的接种量为3％ ‑5％， 培 养温度25 ‑28℃， 搅拌转速160 ‑180rpm/min， 培养时间3 ‑4天， pH值6.5 ‑7.5， 溶解氧20％ ‑ 30％； 第二次培养时的接种量为5％ ‑10％， 搅拌转速160 ‑180rpm/min， 培养温度25 ‑28℃， 培 养时间5‑7天， pH值6.5 ‑7.5， 溶解氧20％ ‑30％； 停止发酵时发酵液中的活菌数需达到(1 ‑3) ×1010cfu/g； 黑曲霉菌的培养条件为： 第一次培养时的接种量为0.5％ ‑1.5％， 培养温度28 ‑ 30℃， 搅拌转速170 ‑200rpm/min， 培养时间1 ‑4天， pH值6.5 ‑7.5， 溶解氧20％ ‑30％； 第二次 培养时的接种量为3％ ‑5％， 搅拌转速170 ‑200rpm/min， 培养温度28 ‑30℃， 培养时间3 ‑7天， pH值6.5‑7.5， 溶解氧20％ ‑30％； 停止发酵时发酵 液中的活菌数需达 到(1‑3)×1010cfu/g。 9.如权利要求6所述的方法， 其特征在于： 所述种子培养基按照质量百分数计的配方 为： 牛肉膏0.3％， 蛋白胨0.7％， NaCl  0.3％， 溶剂为去离子水， pH为7.0左右； 所述发酵培养 基的配方为： 蔗糖10g/L， 胰蛋白胨10g/L， 氯化钠5g/L， 磷酸氢二钾0.19g/L， 五水硫酸铜 0.002g/L， 溶剂为去离 子水， pH为7.0左右。 10.如权利要求6所述的方法， 其特征在于： 步骤(b)中将枯草芽孢杆菌菌液、 拟康氏木权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115418335 A 2霉菌菌液、 草酸青霉菌菌液、 黑曲霉菌菌液按照30 ‑35： 20‑25： 20‑25： 30‑35的重量比混合， 再加入吸附载体、 营养物质并搅拌均匀， 在24 ‑30℃恒温下静置1 ‑4天后进行干燥； 其中吸附 载体、 营养物质的加入量相当于混合菌液质量的1 ‑5倍、 2‑3倍。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115418335 A 3