(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211218878.3 (22)申请日 2022.09.30 (83)生物保 藏信息 GDMCC 62498 202 2.05.30 GDMCC 61231 2020.10.15 (71)申请人 海南师范大学 地址 571158 海南省海口市琼 山区龙昆南 路99号 (72)发明人 李鹏　曹秀兰　郑丽　 (74)专利代理 机构 北京中济纬天专利代理有限 公司 11429 专利代理师 于跃 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A01N 63/20(2020.01)A01P 1/00(2006.01) A01P 3/00(2006.01) A01P 21/00(2006.01) A01G 22/05(2018.01) A01G 13/00(2006.01) A01G 7/06(2006.01) (54)发明名称 一种增强生防贝莱斯芽孢杆菌根际定殖和 防效的多功能复合菌剂的开发和应用 (57)摘要 本发明涉及一种增强生防贝莱斯芽孢杆菌 根际定殖和防效的多功能复合菌剂的开发和应 用。 该复合菌剂由贝莱斯芽孢杆菌HNU24和弗朗 克杆菌HNU6 ‑13构成。 两株菌均分离自茄子砧木 根际土壤， 双菌间存在代谢互养关系， 弗朗克杆 菌HNU6‑13可以显著增强贝莱斯芽孢杆菌HNU24 的生物膜形成， 增强了贝莱斯芽孢杆菌对茄雷尔 氏菌的拮抗效果， 且双菌组合可以在番茄根际稳 定定殖， 可协同作用降低青枯病的发病率。 该复 合菌群还可以显著增强对镰刀菌和拟茎点霉的 拮抗效果， 在防治香蕉枯萎病和槟榔椰子叶斑病 也有一定的生防前 景。 权利要求书1页 说明书5页 附图4页 CN 115369064 A 2022.11.22 CN 115369064 A 1.一种弗朗克杆菌HNU6 ‑13， 其特征在于其菌种保藏信息： 保藏单位名称： 广东省微生 物菌种保藏中心； 保藏单位地址： 广州市先烈中路100号大院59 号楼5楼， 广东省科学院微生 物研究所； 保藏日期： 2022年5月30日； 保藏编号： GDMCC  No .62498； 分类命名： Franconibacter pulveris。 2.权利要求1所述的弗朗克杆菌HNU6 ‑13在防治番茄植株青枯病和/或香蕉枯萎病中的 应用。 增强植物根际定殖中的应用。 3.权利要求1所述的弗朗克杆菌HNU6 ‑13在协同增强贝莱斯芽孢杆菌HNU24防治番茄植 株青枯病和/或香蕉枯萎病中的应用。 增强植物根际定殖中的应用。 4.一种复合菌剂， 其特征在于该复合菌剂的有效成分包含贝莱斯芽孢杆菌HNU24、 权利 要求1所述的弗朗克杆菌HNU6 ‑13。 其中菌量比例优选HNU24:HNU6 ‑13＝2:1至10:1。 所述贝 莱斯芽孢杆菌HNU24的保藏单位名称： 广东省微生物菌种保藏中心； 保藏单位地址： 广州市 先烈中路100号大院59号楼5楼， 广东省科学院微生物研究所； 保藏 日期： 2020年10月15日； 保藏编号： GDM CC No.61231； 分类命名： Baci llus sp.。 5.权利要求4所述的一种复合菌剂， 其特征在于该复合菌剂的制备方法包括如下步骤： 将培养获得去基质菌体HNU24和HNU6 ‑13分别用无菌水重悬至菌液OD600至1.0‑2.0， 按照 HNU24:HNU6 ‑13＝2:1至10:1的比例混合均匀， 即得 所述复合菌剂。 6.权利要求4 ‑5任一项所述的复合菌剂在防治番茄植株青枯病和/或香蕉枯萎病中的 应用。 7.权利要求 4‑5任一项所述的复合菌剂在增强植物根际定殖中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115369064 A 2一种增强生防贝莱斯芽孢杆菌根际定殖和防效的多功能复合 菌剂的开发和应用 技术领域 [0001]本发明属于农业微生物领域， 涉及基于混合菌群代谢互养和抗性激发的根际生物 膜共定殖的植物促生复合菌剂的开发， 其对番茄青枯病、 香蕉枯萎和槟榔椰子叶斑病防治 有应用前 景。 背景技术 [0002]由茄雷尔氏菌(Ralstonia  solanacearum， 简称青枯菌)引起的作 物青枯病是一种 世界性的植物病害， 而且还不断有青枯菌导致的新病害报道， 已有统计表明青枯病已成为 世界上第二大植物细菌病害。 青枯病也一直是我国农业生产上最严重的病害之一， 据 统计 至少在国内的30个省份里有青枯病发生的报道， 尤其是在长江流域以南的省份番茄、 茄子、 辣椒、 烟草、 花生和生姜等90多种 作物时有青枯病发生， 对番茄、 茄子、 辣椒和烟草等经济作 物造成了严重的损失。 因此， 深入研究青枯菌侵染机制和 致病力调控对于病害的防控具有 重要的意 义。 [0003]微生物是自然界丰富的资源， 在农业方面， 微生物菌剂具有绿色高效、 无污染、 无 作用、 针对性强等优点。 近年来， 合成生物学成为相关领域研究热点， 从自然微生物资源库 中， 遵循一定的设计原理， 针对某一目的人工组合两种或两种以上微生物， 使其成为具备一 定特定功能的合成微生物群落。 相比单一微生物菌剂， 合成微生物群落可控性高， 稳定性 好。 合成微生物群落在农业上 的应用正处于起步阶段， 也将成为未来一段时间内合成生物 学相关方面的主 要研究方向。 [0004]目前， 在农业领域内， 被研究和开发最多的微生物种类是芽孢杆菌， 我国登记在册 的微生物肥料中， 70％以上均属于此类。 芽孢杆菌属内大部 分是有益微生物， 能够分泌 大量 的、 不同类型的次级代谢产物， 并且其能够产生芽孢， 更容易在复杂环境内保持活性。 以芽 孢杆菌为中心， 在广阔的微生物资源库内寻找芽孢杆菌的 “激发剂”， 放大芽孢杆菌在生防 方面的特性， 增加其在植物根际的定殖能力， 充分发挥其强大的促生、 抗菌活性， 对充分利 用微生物制剂在抗病 、 促生方面具有重大意 义。 [0005]为了解决茄科作物青枯病的绿色防控问题， 本发明提出一种应用双菌株 组合进行 防治番茄青枯病的菌液及其应用方法。 此外， 同时发现该组合菌群还对引起香蕉枯萎病的 尖孢镰刀菌、 引起槟榔椰子叶斑病的拟茎点霉等病原菌也具有较好的拮抗效果。 鉴于香蕉 枯萎病的严重危害性， 香蕉在经济作物和粮食作物中的重要地位， 同时槟榔和椰子也作为 海南地区重要的经济作物， 该发明具有重要的应用价 值。 发明内容 [0006]本发明提供一种弗朗克杆菌HNU6 ‑13， 其特征在于其菌种保藏信息： 保藏单位名 称： 广东省微生物菌种保藏中心； 保藏单位地址： 广州市先烈中路100号大院59号楼5楼， 广 东省科学院微生物研究所； 保藏日期： 2022年5月30日； 保藏编号： GDMCC  No.62498； 分类命说　明　书 1/5 页 3 CN 115369064 A 3