(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211206192.2 (22)申请日 2022.09.30 (71)申请人 贵州大学 地址 550025 贵州省贵阳市花溪区贵州大 学 (72)发明人 刘丽　郭松　李响　粟小烈　何季　 陈孝玉龙　 (74)专利代理 机构 北京市浩 东律师事务所 11499 专利代理师 孙莉 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 11/14(2006.01) A01N 63/27(2020.01) A01N 63/22(2020.01)A01N 25/28(2006.01) A01N 37/10(2006.01) A01N 25/32(2006.01) A01P 1/00(2006.01) A01P 3/00(2006.01) A01P 21/00(2006.01) C12R 1/07(2006.01) C12R 1/125(2006.01) C12R 1/385(2006.01) (54)发明名称 一种生防菌微胶囊菌剂、 制备方法及应用 (57)摘要 本发明属于生防菌微胶 囊菌剂技术领域， 公 开了一种生防菌微胶囊菌剂、 制备方法及应用。 本发明提供的生防菌微胶囊菌剂、 制备方法及应 用采用喷雾干燥微胶囊技术制备微生物微胶囊 菌剂， 物料真空喷雾冷冻过程中冷媒与物料不接 触， 保证了最终微生物微胶囊菌剂的洁净度与无 菌性， 使制备得到的生防菌微胶囊菌剂性能更加 稳定， 生产过程设计合理、 工艺简单； 本发明的生 防菌微胶囊菌剂施用方便， 使用前无需经过活化 和扩大培养， 可直接施加到种植栎属植物的土壤 中， 且该微生物菌剂接近中性， 不会改变土壤pH， 维持了植物根系的土 壤环境的恒定 。 权利要求书1页 说明书4页 附图1页 CN 115537354 A 2022.12.30 CN 115537354 A 1.一种生防菌微胶囊菌剂， 其特征在于， 所述生防菌微胶囊菌剂按重量份数由以下组 份组成： 铜绿假单 胞菌2份、 枯 草芽孢杆菌2份、 解淀粉芽孢杆菌 3份。 2.一种如权利要求1所述生防菌微胶囊菌剂的生防菌微胶囊菌剂的制备方法， 其特征 在于， 所述 生防菌微胶囊菌剂的制备 方法包括以下步骤： 步骤一， 接种发酵； 步骤二， 制备囊芯； 将发酵成熟的菌液与载体均匀混合， 使载体充分吸附菌体， 将充分吸附菌体的载体作 为囊芯； 步骤三， 糊化； 向制备得到的囊芯中加入壁材、 保护剂和植物生长调节剂， 搅拌2 9min使其糊化； 步骤四， 成型； 经过糊化后的材料进行真空喷雾冷冻干燥， 真空喷雾冷冻干燥结束后收集所得产物， 即为生防菌微胶囊菌剂。 3.如权利要求2所述 生防菌微胶囊菌剂的制备 方法， 其特 征在于， 所述接种发酵 方法： (1)在无菌操作条件下， 用移液枪将甘油管保存的铜绿假单胞菌、 枯草芽孢杆菌、 解淀 粉芽孢杆菌各0.1mL分别接种到装有第一培养基的玻璃平皿上， 37℃培养18h进行菌种活 化； (2)将活化后的菌株分别接种到装有第二培 养基的三角培 养瓶中， 发酵 得种子液； (3)将种子液分别移入 装第三培 养基的发酵 罐中。 4.如权利要求3所述生防菌微胶囊菌剂的制备方法， 其特征在于， 所述将活化后的菌株 分别接种到装有第二培养基的三角培养瓶中， 发酵得种子液， 其中接种量为6％， 发酵时间 为15h， 转速为1 19r/min， 发酵温度为3 0℃。 5.如权利要求3所述生防菌微胶囊菌剂的制备方法， 其特征在于， 所述将种子液分别移 入装第三培养基的发酵罐中， 接种量为2％， 发酵时间为27h， 转速为115r/min， 温度为30℃， 通气量20 0L/h。 6.如权利要求3所述生防菌微胶囊菌剂的制备方法， 其特征在于， 所述第 一培养基配方 为： 蛋白胨1 1g/L， 酵母 浸粉6g/L， 氯化钠1 1g/L， 琼脂21g/L， pH值 为7.6。 7.如权利要求2所述生防菌微胶囊菌剂的制备方法， 其特征在于， 所述第 二培养基配方 为： 蛋白胨9g/L， 酵母 浸粉4g/L， 氯化钠9g/L， pH值 为7.4。 8.如权利要求2所述生防菌微胶囊菌剂的制备方法， 其特征在于， 所述第 三培养基配方 为： 酵母膏4g/L、 可溶性淀粉7g/L、 葡萄糖3g/L、 黄豆饼粉7g/L、 牛肉膏5g/L、 玉米粉7g/L， pH 值为7。 9.如权利要求2所述生防菌微胶囊菌剂的制备方法， 其特征在于， 所述载体为 白炭黑； 所述壁材为玉米淀粉与阿拉伯树胶的混合物。 10.如权利要求2所述生防菌微胶囊菌剂的制备方法， 其特征在于， 所述保护剂为海藻 糖、 脱脂奶粉和甘油的混合物； 所述 植物生长调节剂为萘乙酸钠； 所述糊化方法： 1)向制备 得到的囊芯中加入壁材、 保护剂和植物生长调节剂， 搅拌2 9min使其糊化。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115537354 A 2一种生防菌微胶囊菌剂、 制备方 法及应用 技术领域 [0001]本发明属于生 防菌微胶囊菌剂技术领域， 尤其涉及一种生 防菌微胶囊菌剂、 制 备 方法及应用。 背景技术 [0002]生防菌， 指可用于防治植物病害的有益微生物， 包括细菌、 真菌、 放线菌。 其中， 细 菌类的生防菌具有种类多、 代谢活动复杂且产物多、 抗菌方式多样、 繁殖力高、 易于人工培 养等优点。 在自然发生和人类应用的生物防治的活动中， 拮抗细菌及其代谢产物都起到了 重要作用； 然 而， 现有生防菌生存周期短， 性能差， 施用麻烦。 [0003]通过上述分析， 现有技 术存在的问题及缺陷为： 现有生防菌性能差， 施用麻烦。 发明内容 [0004]针对现有技术存在的问题， 本发明提供了一种生 防菌微胶囊菌剂、 制 备方法及应 用。 [0005]本发明是这样实现的， 一种生 防菌微胶囊菌剂按重量份数由以下组份组成： 铜绿 假单胞菌2份、 枯 草芽孢杆菌2份、 解淀粉芽孢杆菌 3份。 [0006]本发明的另一目的在于提供生防菌微胶囊菌剂制备 方法包括以下步骤： [0007]步骤一， 接种发酵； [0008]步骤二， 制备囊芯； [0009]将发酵成熟的菌液与载体均匀 混合， 使载体充分吸附菌体， 将充分吸附菌体 的载 体作为囊芯； [0010]步骤三， 糊化； [0011]向制备得到的囊芯中加入壁材、 保护剂和植物生长调节剂， 搅拌2 9min使其糊化； [0012]步骤四， 成型； [0013]经过糊化后的材料进行真空喷雾冷冻干燥， 真空喷雾冷冻干燥结束后收集所得产 物， 即为生防菌微胶囊菌剂。 [0014]进一步， 所述接种发酵 方法： [0015]在无菌操作条件下， 用移液枪将甘油管保存的铜绿假单胞菌、 枯草芽孢杆菌、 解淀 粉芽孢杆菌各0.1mL分别接种到装有第一培养基的玻璃平皿上， 30℃培养18h进行菌种活 化； [0016]将活化后的菌株分别接种到装有第二培 养基的三角培 养瓶中， 发酵 得种子液； [0017]将种子液分别移入 装第三培 养基的发酵 罐中。 [0018]进一步， 所述将活化后的菌株分别接种到装有第二培养基的三角培养瓶中， 发酵 得种子液， 其中接种量 为6％， 发酵时间为15 h， 转速为1 19r/min， 发酵温度为3 0℃。 [0019]进一步， 所述将种子液分别移入装第三培养基 的发酵罐中， 接种量为2％， 发酵时 间为27h， 转速为1 15r/min， 温度为3 0℃， 通气量20 0L/h。说　明　书 1/4 页 3 CN 115537354 A 3