(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211233879.5 (22)申请日 2022.10.10 (71)申请人 山东天润和生物工程有限公司 地址 251601 山东省济南市商河县经济开 发区科源街 (72)发明人 郭芳坤　关志勇　郭艳苹　王维帅　 陈姗姗　 (74)专利代理 机构 山东瑞宸知识产权代理有限 公司 37268 专利代理师 于晓丽 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12R 1/10(2006.01) (54)发明名称 一种新型地衣芽孢杆菌的发酵培养基配方 及其培养方法 (57)摘要 本发明涉及微生物发酵技术领域， 尤其是一 种新型地衣芽孢杆菌的发酵培养基配方及其培 养方法。 所述发酵培养基配方为： 玉米淀粉1050 ‑ 1100g、 黄豆饼粉950 ‑1000g、 中性蛋白酶18 ‑21g、 中性淀粉酶9 ‑11g、 碳酸钙70 ‑80g、 氯化钠20 ‑ 25g、 玉米浆150 ‑160g、 磷酸二氢钾24 ‑26g及硫酸 锰2.0‑2.5g， 水20 ‑25L； 所述培养 方法为： a)种子 液的制备、 b)配制液体发酵培养基、 c)发酵培养。 采用本发酵培养基配方和发酵方法发酵的地衣 芽孢杆菌的活菌数可达368*108cfu/g， 极大的提 高了活菌数。 权利要求书1页 说明书4页 附图1页 CN 115466700 A 2022.12.13 CN 115466700 A 1.一种新型地衣芽孢杆菌的发酵培养基配方， 其特征在于： 包括玉米淀粉1050 ‑1100g、 黄豆饼粉9 50‑1000g、 中性蛋白酶18 ‑21g、 中性淀粉酶9 ‑11g、 碳酸钙70 ‑80g、 氯化钠2 0‑25g、 玉米浆15 0‑160g、 磷酸二氢钾24 ‑26g及硫酸锰2.0 ‑2.5g， 水20 ‑25L。 2.一种新型地衣芽孢杆菌的发酵培 养方法， 其特 征在于： 包括以下步骤： a)种子液的制备 将‑80℃甘油管保藏的地衣芽孢杆菌接种于LB培养基的三角瓶中， 在37℃的温度， 200r/min摇床培养7h， 备用； b)配制液体发酵培 养基 按照玉米淀粉1050 ‑1100g、 黄豆饼粉950 ‑1000g、 中性蛋白酶18 ‑21g、 中性淀粉酶9 ‑ 11g、 碳酸钙70 ‑80g、 氯化钠20 ‑25g、 玉米浆150 ‑160g、 磷酸二氢钾24 ‑26g及硫酸锰2.0 ‑ 2.5g， 水20 ‑25L配制液体发酵培 养基； c)发酵培 养 按4‑5*106cfu/g的接种量将地衣芽孢杆菌的菌液接入到液体发酵培养基中进行发酵培 养， 发酵温度为3 5‑39℃， pH值 为6.5‑7.5， 发酵压力为0.04 ‑0.05MPa， 转速为20 0‑600r/min。 3.根据权利要求2所述的一种新型地衣芽孢杆菌的发酵培养方法， 其特征在于： 所述地 衣芽孢杆菌购买于广东省微 生物菌种保藏中心， 保藏 号为GDMCC1.11。 4.根据权利要求2所述的一种新型地衣芽孢杆菌的发酵培养方法， 其特征在于： 在发酵 培养中的发酵温度为37℃， 发酵pH为7.0， 发酵压力为0.0 5MPa， 转速为 400r/min。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115466700 A 2一种新型地衣芽孢杆菌的发酵培养基配方及其培养方 法 技术领域 [0001]本发明涉及 微生物发酵技术领域， 尤其是一种新型地衣芽孢杆菌的发酵培养基配 方及其培 养方法。 背景技术 [0002]地衣芽孢杆菌(Bacillus  licheniformis)是芽孢杆菌中较具应用潜力的菌种之 一。 其属于革兰氏阳性杆状细菌， 可产生内生芽孢， 抗逆性强， 可在高温以及酸性等不利的 外界环境中以内生孢子的形式存在， 生存期 长且不消耗养 分， 不失活， 转移到合适的环境中 后能够萌发生成活细胞， 继续 发挥营养作用。 随着研究 的不断深入， 地衣芽孢杆菌已广泛应 用于畜牧业及农业等领域， 近年来， 地衣芽孢杆菌的应用研究日益增多。 地衣芽孢杆菌作为 饲料添加剂 被广泛应用在饲料中。 此外， 地衣芽孢杆菌在农业上也有其应用价值。 地衣芽孢 杆菌通过与病原菌竞争营养和生存空间， 产生抑制病原菌生长的代谢产物， 如抗菌蛋白及 几丁质酶等， 作用于致病菌细胞壁、 细胞膜， 抑制常见植物致病菌活性， 减少植物病害。 地衣 芽孢杆菌也可以应用在环境污染治理， 降解水体及空气 中的污染物， 可以维持水中菌群平 衡； 可调节氨氮、 亚硝酸盐氮的含量， 使氮磷比达到平衡； 可降解水中粪便、 悬浮物， 清洁水 体。 [0003]但是， 在现有技术中， 地衣芽孢杆菌发酵的活菌数很低， 严重影响了地衣芽孢杆菌 在生产生活中的研究和应用， 因此我们急需提高地衣芽孢杆菌发酵的活菌数， 扩大地衣芽 孢杆菌的生产应用。 发明内容 [0004]为了解决上述技术问题， 提高地衣芽孢杆菌发酵的活菌数， 本发明提供了一种新 型地衣芽孢杆菌的发酵培 养基配方及其培 养方法。 [0005]本发明提供的一种新型地衣芽孢杆菌的发酵培养基配方， 包括玉米淀粉1050 ‑ 1100g、 黄豆饼粉950 ‑1000g、 中性蛋白酶18 ‑21g、 中性淀粉酶9 ‑11g、 碳酸钙70 ‑80g、 氯化钠 20‑25g、 玉米浆15 0‑160g、 磷酸二氢钾24 ‑26g及硫酸锰2.0 ‑2.5g， 水20 ‑25L。 [0006]一种新型地衣芽孢杆菌的发酵培 养方法， 包括以下步骤： [0007]a)种子液的制备 [0008]将‑80℃甘油管保藏的地衣芽孢杆菌接种于LB 培养基的三角瓶中， 在 37℃的温度， 200r/min摇床培养7h， 备用； [0009]b)配制液体发酵培 养基 [0010]按照玉米淀粉1050 ‑1100g、 黄豆饼粉950 ‑1000g、 中性蛋白酶18 ‑21g、 中性淀粉酶 9‑11g、 碳酸钙70 ‑80g、 氯化钠20 ‑25g、 玉米浆150 ‑160g、 磷酸二氢钾24 ‑26g及硫酸锰2.0 ‑ 2.5g， 水20 ‑25L配制液体发酵培 养基； [0011]c)发酵培 养 [0012]按4‑5*106cfu/g的接种量将地衣芽孢杆菌的菌液接入到液体发酵培养基中进行说　明　书 1/4 页 3 CN 115466700 A 3