(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211273344.0 (22)申请日 2022.10.18 (71)申请人 湖北共同药业股份有限公司 地址 441000 湖北省襄阳市宜城市小河高 坑一组 (72)发明人 系祖斌　艾文　陶琳　马雷　杨兵　 (74)专利代理 机构 北京睿智保诚专利代理事务 所(普通合伙) 11732 专利代理师 董大媛 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12P 33/00(2006.01) C12R 1/34(2006.01) (54)发明名称 一种耻垢分枝杆菌菌液及其制备方法和在 制备甾体 类药物中间体中的应用 (57)摘要 本发明涉及甾体类药物中间体制备技术领 域。 本发明提供了一种耻垢分枝杆菌菌液及其制 备方法和在制备甾体类药物中间体中的应用， 所 述耻垢分枝杆菌菌液的制备方法包括如下步骤： (1)将耻垢分枝杆菌接种到预培养基中培育， 得 到预培养的耻垢分枝杆菌； (2)将预培养的耻垢 分枝杆菌接种到液体培养基中培育， 得到耻垢分 枝杆菌菌液。 本发明制备的耻垢分枝杆菌菌液能 够用于甾体类药物中间体的生产， 高效催化甾体 类药物中间体原料的转化， 有效降低生产过程中 的污染。 权利要求书1页 说明书4页 CN 115433698 A 2022.12.06 CN 115433698 A 1.一种耻垢分枝杆菌 菌液的制备 方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： (1)将耻垢分枝杆菌 接种到预培 养基中培 育， 得到预培 养的耻垢分枝杆菌； (2)将预培 养的耻垢分枝杆菌 接种到液体培 养基中培 育， 得到耻垢分枝杆菌 菌液。 2.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 步骤(1)中所述预培养基的配方为： 葡 萄糖20～30g/L、 蛋白胨15～20g/L、 糖蜜5～15g/L、 蔗糖10～20g/L、 琼脂20～30g/L， 步骤 (1)中所述预培 养基的pH值 为5.3～5.5 。 3.根据权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 步骤(1)中所述培育的温度为30～32 ℃， 步骤(1)中所述培 育的时间为5～7d。 4.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 步骤(2)中所述液体培养基的配方为： 葡萄糖10～15g/L、 蛋白胨30～35g/L、 麦芽糖20～30g/L、 牛肉膏5～7g/L、 麦芽膏粉40～ 60g/L， 步骤(2)中所述液体培 养基的pH值 为5.5～5.8。 5.根据权利要求4所述的制备方法， 其特征在于， 步骤(2)中所述培育的温度为30～34 ℃， 步骤(2)中所述培 育的时间为18～3 0h。 6.根据权利要求1～5任意一项所述的制备方法， 其特征在于， 步骤(2)中所述培育时采 用摇床培 养， 所述摇床培 养过程中的转速为120～140r/mi n。 7.一种权利要求1～6任意 一项所述制备 方法制备的耻垢分枝杆菌 菌液。 8.权利要求7 所述耻垢分枝杆菌 菌液在制备甾体 类药物中间体中的应用。 9.根据权利 要求8所述的应用， 其特征在于， 所述甾体类药物中间体为11α,17α ‑双羟黄 体酮、 11α‑羟基坎利酮、 1 1α‑羟基‑4‑熊烯二酮或1 1α‑羟基黄体酮。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115433698 A 2一种耻垢分枝杆菌 菌液及其制备方 法和在制备甾体类药物中 间体中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及甾体类药物中间体制备技术领域， 尤其涉及 一种耻垢分枝杆菌菌液及 其制备方法和在制备甾体 类药物中间体中的应用。 背景技术 [0002]甾体就是类固醇类物质， 通常指 这一类的激素： 肾上腺皮质激素、 雄激素、 雌激素， 具有一定的抗炎作用。 与甾体类药物对应的一般说的是肾上腺皮质激素， 各种名字以 “松” 结尾的药物， 具有一定的抗炎作用。 非甾体类药物主要是双氯芬酸类还有布洛芬类还有 COX2抑制剂。 [0003]甾体类药物使用广 泛， 但是其生产过程中存在诸多问题， 如产出率低、 生产过程中 污染严重， 这些都制约着甾体 类药物的发展。 发明内容 [0004]本发明的目的在于提供一种耻垢分枝杆菌菌液及其制备方法和在制备甾体类药 物中间体中的应用， 能够高效催化甾体类药物中间体原料 的转化， 有效降低生产过程中的 污染。 [0005]为了实现上述发明目的， 本发明提供以下技 术方案： [0006]本发明提供了一种耻垢分枝杆菌 菌液的制备 方法， 包括如下步骤： [0007](1)将耻垢分枝杆菌 接种到预培 养基中培 育， 得到预培 养的耻垢分枝杆菌； [0008](2)将预培 养的耻垢分枝杆菌 接种到液体培 养基中培 育， 得到耻垢分枝杆菌 菌液。 [0009]作为优选， 步骤(1)中所述预培养基的配方为： 葡萄糖20～30g/L、 蛋白胨15～20g/ L、 糖蜜5～15g/L、 蔗糖10～20g/L、 琼脂2 0～30g/L， 步骤(1)中所述预培养基的pH值为5.3～ 5.5。 [0010]作为优选， 步骤(1)中所述培育的温度为30～32℃， 步骤(1)中所述培育的时间为5 ～7d。 [0011]作为优选， 步骤(2)中所述液体培养基的配方为： 葡萄糖10～15g/L、 蛋白胨30～ 35g/L、 麦芽糖20～30g/L、 牛肉膏5～7g/L、 麦芽膏粉40～60g/L， 步骤(2)中所述液体培养基 的pH值为5.5～5.8。 [0012]作为优选， 步骤(2)中所述培育的温度为30～34℃， 步骤(2)中所述培育的时间为 18～30h。 [0013]作为优选， 步骤(2)中所述培育时采用摇床培养， 所述摇床培养过程中的转速为 120～140r/mi n。 [0014]本发明还提供了一种耻垢分枝杆菌 菌液。 [0015]本发明还提供了所述耻垢分枝杆菌 菌液在制备甾体 类药物中间体中的应用。 [0016]作为优选， 所述甾体类药物中间体为11α,17α ‑双羟黄体酮、 11α ‑羟基坎利酮、 11α ‑说　明　书 1/4 页 3 CN 115433698 A 3