(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211358161.9 (22)申请日 2022.11.01 (71)申请人 山东迈雅生物科技股份有限公司 地址 266000 山东省青岛市莱西市经济开 发区嫩江路2号 (72)发明人 董朝辉　 (74)专利代理 机构 青岛海知誉知识产权代理事 务所(普通 合伙) 37290 专利代理师 张晓琳 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A01N 63/20(2020.01) A01N 63/27(2020.01) A01N 63/22(2020.01) A01P 3/00(2006.01)C12R 1/25(2006.01) C12R 1/39(2006.01) C12R 1/07(2006.01) C12R 1/06(2006.01) C12R 1/125(2006.01) C12R 1/11(2006.01) C12R 1/10(2006.01) (54)发明名称 一种防治生姜叶部病害的微生物菌剂及其 制备方法与应用 (57)摘要 本发明公开了一种防治生姜叶部病害的微 生物菌剂及其制备方法与应用， 该微生物菌剂 包 括菌落总数为12.0 ×109cfu/mL的植物乳酸杆 菌、 菌落总数为12.0 ×109cfu/mL的荧光假单胞 菌、 菌落总数为12.0 ×109cfu/mL的节杆菌、 菌落 总数为12.0 ×109cfu/m的多粘芽孢杆菌、 菌落总 数为8.0×108cfu/mL的枯草芽 胞杆菌、 菌落总数 为8.0×108cfu/mL的巨大芽 胞杆菌、 菌落总数为 8.0×108cfu/mL的地衣芽孢杆菌、 菌落总数不小 于1.0×108cfu/mL的侧胞芽胞杆菌和菌落总数 不小于1.0 ×108cfu/mL的解淀粉芽 胞杆菌。 本发 明所述的一种防治生姜叶部病害的微生物菌剂 的菌种组合合理， 作用高效， 既有芽胞菌， 也有非 芽胞菌， 不会发生菌种之间互相拮抗和抑制、 影 响各自生长的现象。 权利要求书2页 说明书7页 CN 115491333 A 2022.12.20 CN 115491333 A 1.一种防治生姜叶部病害的微生物菌剂， 其特征在于： 该微生物菌剂包括菌落总数为 12.0×109cfu/mL的植物乳 酸杆菌、 菌落总数为12.0 ×109cfu/mL的荧光假单胞菌、 菌落总数 为12.0×109cfu/mL的节杆菌、 菌落总数为12.0 ×109cfu/m的多粘 芽孢杆菌、 菌落总数为8.0 ×108cfu/mL的枯草芽胞杆菌、 菌落总数为8.0 ×108cfu/mL的巨大芽胞杆菌、 菌落总数为8.0 ×108cfu/mL的地衣 芽孢杆菌、 菌落总数不小 于1.0×108cfu/mL的侧胞芽胞杆菌和菌 落总数 不小于1.0 ×108cfu/mL的解淀粉芽胞 杆菌。 2.根据权利要求1所述的一种防治生姜叶部病害的微生物菌剂的制备方法， 其特征在 于： 包括以下步骤： (1)、 斜面培养； (2)、 一级种子液培 养； (3)、 二级种子液培 养； (4)、 混合液发酵培 养； (5)、 菌剂与助剂及其 他有机质混合。 3.根据权利要求2所述的一种防治生姜叶部病害的微生物菌剂的制备方法， 其特征在 于： 步骤(1)中斜面培养时将植物乳酸杆菌、 荧光假单胞菌、 节杆菌、 枯草芽胞杆菌、 多粘芽 孢杆菌、 巨大芽胞杆菌、 地衣芽胞杆菌、 侧胞芽胞杆菌和解淀粉芽胞杆菌 分别接种于斜面培 养基， 在3 0℃～37℃条件下培 养48—72小时， 活化菌株。 4.根据权利要求2所述的一种防治生姜叶部病害的微生物菌剂的制备方法， 其特征在 于： 步骤(2)中一级种子液培养时将步骤(1)中活化的菌株菌种在无菌条件下分别接种于含 有液体培养基的200ml三角烧瓶中， 在30℃～37℃条件 下摇床培养48—72小时， 进行一级扩 增培养。 5.根据权利要求2所述的一种防治生姜叶部病害的微生物菌剂的制备方法， 其特征在 于： 步骤(3)中二级种子液培养时将步骤(2)得到的一级种子液按5 ‑10％的接种量分别接种 于含有液体培养基的1000ml的三角烧瓶中， 在30℃～37℃条件下摇床培养48—72小时， 进 行二级扩增培养， 培养完毕用显微镜计数法或紫外分光光度计法计数， 使每一菌株浓度达 到所要求的浓度基础值。 6.根据权利要求2所述的一种防治生姜叶部病害的微生物菌剂的制备方法， 其特征在 于： 步骤(4)中混合液发酵培养时将步骤(3)得到的8株菌种的二级种子培养菌液混合接种 于含有液体培养基的发酵罐中， 进一步进行扩增 培养， 在30℃～37℃条件下培养48—72小 时。 7.根据权利要求2所述的一种防治生姜叶部病害的微生物菌剂的制备方法， 其特征在 于： 步骤(5)中菌剂与助剂及其他有机质混合时将步骤(4)混合 发酵得到的菌液与助剂及 有 机质载体以2： 4： 4的比例混合， 得到防治生 姜叶部病害的复合 微生物菌剂。 8.根据权利要求2所述的一种防治生姜叶部病害的微生物菌剂的制备方法， 其特征在 于： 步骤(1)中斜面培养基、 步骤(2)和步骤(3)中液体培养基的培养基成分为牛肉膏5g、 蛋 白胨10g、 氯化钠5g和蒸馏水10 00mL， 培养基的pH为7.0 ‑7.2。 9.根据权利要求2所述的一种防治生姜叶部病害的微生物菌剂的制备方法， 其特征在 于： 步骤(4)中液体培养基成分包括助剂及有机质载体制备而成， 助剂为糖蜜， 载体为有机 质载体， 机质载体包括3 0％的黄腐酸钾、 3 0％的腐殖酸钾 和40％的复合氨基酸。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115491333 A 210.根据权利要求1所述的一种防治生姜叶部病害的微生物菌剂的用途， 其特征在于： 该微生物菌剂用于防治生 姜叶部病害。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115491333 A 3