(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211397808.9 (22)申请日 2022.11.09 (83)生物保 藏信息 CGMCC No.24322 2022.01.17 (71)申请人 黄河三角洲京博化工 研究院有限公 司 地址 256500 山东省滨州市博兴县经济开 发区 (72)发明人 马娜娜　杨传伦　车树刚　张心青　 张萧萧　王建平　司更花　冯清敏　 李琪琪　 (74)专利代理 机构 北京集佳知识产权代理有限 公司 11227 专利代理师 王浩(51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C02F 3/34(2006.01) C12R 1/125(2006.01) C12R 1/01(2006.01) C02F 103/24(2006.01) (54)发明名称 复合菌种及其在高盐高脂皮革废水处理中 的应用 (57)摘要 本发明涉及微生物 技术领域， 特别涉及复合 菌种及其在及其在高盐高脂皮革废水处理中的 应 用 。该 复 合 菌 种 包 括 保 藏 编 号 为 CGMCCNO.24322的乙酸钙不动杆菌和保藏编号为 CGMCCNo.16167的枯草芽孢杆菌。 实验表明， 在体 系全盐为100000mg/L时， 该复合菌对初 始浓度为 5000mg/L的油脂24h降解率达97.88％， 表明本发 明所述复合菌及微生物菌剂对废水中的动物油 脂具有高效降解作用， 能够减 轻高盐高脂废水对 生化处理系统的冲击， 提高该股废水的处理效 率， 节省预处理工艺， 具有显著的经济与环保效 益。 权利要求书1页 说明书6页 附图3页 CN 115491336 A 2022.12.20 CN 115491336 A 1.一种复合菌种， 其特征在于， 包括保藏编号为CGMCC  NO.24322的乙酸钙不动杆菌 (Acinetobacter  calcoaceticus)和保藏编号为CGMCC  No.16167的枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis)。 2.根据权利要求1所述的复合菌种， 其特征在于， 所述乙酸钙不动杆菌和枯草芽孢杆菌 的有效菌数量之比为1:(0.8～3)。 3.一种微 生物菌剂， 其特 征在于， 其原料包括权利要求1或2所述的复合菌种。 4.根据权利要求3所述的微生物菌剂， 其特征在于， 其包括权利要求1或2所述的复合菌 种的活菌、 或其培 养物、 提取物中的至少一种。 5.权利要求3或4所述的微生物菌剂的制备方法， 其特征在于， 所述微生物菌剂为液体 菌剂或固体菌剂， 其制备 方法如下： 分别将CGMCC  NO.24322的乙酸钙不动杆菌和保藏编号为CGMCCNo.16167的枯草芽孢杆 菌活化、 制备种子液， 然后分别接种于发酵培养基中发酵， 收集发酵后的菌体， 获得液体菌 剂； 将所述液体菌剂依次进行吸附、 干燥和粉碎， 获得固体菌剂。 6.根据权利要求5所述的制备 方法， 其特 征在于， 所述活化 为室温条件下活化3 h～8h； 所述种子液的制备包括： 将活化后的菌种接种至液体培养基中， 于温度为28 ‑38℃， 摇 床转速为10 0‑200r/min的条件下， 振荡培 养16‑20h。 所述发酵为： 将所述菌种的种子液按体积百分比1％ ‑5％的接种量分别接种于发酵培 养基中进行高密度发酵； 所述高密度发酵的条件为： 罐压0.02 ‑0.05MPa， 温度为28～38℃， 转速为20 0‑400r/min， 溶解氧≧20％， 时间为15～3 6h。 7.根据权利要求5所述的制备方法， 其特征在于， 所述枯草芽孢杆菌发酵的培养基包 括： 豆粕2％ ‑3.5％、 玉米粉3％ ‑4％、 麦芽糊精1.8％ ‑3.2％、 尿素0.1％ ‑0.16％、 碳酸钙 0.1％‑0.3％、 磷酸氢二甲0.2％ ‑0.3％、 硫酸镁0.05％ ‑0.15％、 硫酸锰0.01％ ‑0.02％、 聚 醚消泡剂0.1％， 余 量为水； 所述乙酸钙不动杆菌发酵的培养基包括： 麦芽糊精0.3％ ‑0.55％、 玉米粉0.35％ ‑ 0.55％、 酵母粉1％ ‑2％、 玉米浆干粉1％ ‑3％、 硫酸二氢钾0.1％ ‑0.2％、 硫酸镁0.2％ ‑ 0.4％， 聚醚消泡剂0.1％， 余 量为水。 8.权利要求1或2所述的复合菌种、 权利要求3或4所述的微生物菌剂或权利要求5～7任 一项所述的制备 方法制得的微 生物菌剂， 在处 理高盐高脂皮革废水中的应用。 9.一种高盐高脂皮革废水的处理方法， 其特征在于， 将权利要求1或2所述的复合菌种、 权利要求3或4所述的微生物菌剂或权利要求5～7任一项所述的制备方法制得的微生物菌 剂添加到高盐高脂皮革废水中。 10.根据权利要求9所述的处理方法， 其特征在于， 按照废水中有效活菌菌量≥105cfu/ mL的量添加所述复合菌种或所述 微生物菌剂。 11.根据权利要求9所述的处理方法， 其特征在在于， 所述高盐高脂皮革废水的处理条 件为： 溶解氧1 ‑6mg/L， 温度20 ‑35℃， pH6‑8。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115491336 A 2复合菌种及其在高盐高脂皮革废水 处理中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及废水治理技术领域， 特别涉及复合菌种及其在高盐 高脂皮革废 水处理 中的应用。 背景技术 [0002]制革废水是指制革生产在准备和鞣制阶段产生的废水， 制革厂废水排放量大、 污 染物种类繁多， 成分复杂。 皮革厂排出 的油脂废水中含有较高浓度的动物油脂及大量悬浮 物， 具有盐分含量高、 营养成分高、 易腐发臭等特点， 若 未经处理直接排放至自然 水体中， 形 成油膜后会阻碍大气溶氧， 阻隔水体中氧的来源， 从而降低水体的溶氧量， 影响水体自然 净 化过程， 危害水体生态系统， 严重 污染周围环境。 [0003]皮革废水中含有的主要油类物质为动物油脂， 总油含量达到 10000mg/L以上， 全盐 含量超过100000mg/L， 动物油脂属 于难生物降解的有机物， 若不进行预处理直接排入废水 处理系统会对生化系统造成冲击， 破坏正常的水处理工艺， 皮革厂对油脂废水常用的处理 方法为化学絮凝， 通过添加硫酸亚铁去除废水中的部分油脂， 含油脂的废渣将作为危废进 行处理， 不仅加重 了环境负担， 而且提高了废水处 理成本。 [0004]针对皮革废水高盐高脂 的特点， 急需提供一种高效的耐盐脱脂菌剂， 使其对废水 中的动物油脂实现高效降解。 发明内容 [0005]有鉴于此， 本发明提供了复合菌种及其在高盐高脂皮革废水处理中的应用， 该复 合菌种对废水中的动物油脂具有高效降解作用。 [0006]本发明复合菌种包括保藏编号为CGMCC  NO .24322的乙酸钙不动杆菌 (Acinetobacter  calcoaceticus)和枯 草芽孢杆菌 。 [0007]本发明中， 所述枯草芽孢杆菌优选为保藏编号为CGMCC  No.16167 的菌株。 实验表 明， 菌株PG5和PG8等比例复配后对猪油的降解效果显著， 24h降解率达到97.88％， 所述菌株 PG5保藏编号为CGMCC  No.16167的枯草芽孢杆菌， PG8(YJY22 ‑13)即保藏号为CGMCC   No.24322的乙酸钙不动杆菌 。 [0008]所述枯草芽孢杆菌已于20 18年7月保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微 生物中心， 保藏号为CGMCC  No.16167， 乙酸钙不动杆菌于2022年1月中国微生物菌种保藏管 理委员会 普通微生物中心， 保藏 号为CGMCCNo.24322。 [0009]所述枯草芽孢杆菌属革兰氏阳性菌， 无荚膜， 短杆状， 在显微镜下观察呈快速游动 状态， 在普通营养琼脂上形成不规则突起的菌落， 菌落表面光滑不透明， 有褶皱； 所述乙酸 钙不动杆菌属革兰氏阴性菌， 球杆菌， 常见成对排列， 也可单个存在， 有时形成丝状和链状， 有荚膜， 无鞭毛， 不产芽孢， 在 普通营养琼脂上形成近圆形中等的乳白色菌落， 菌落扁平， 湿 润。 [0010]一些实施方案中， 所述乙酸钙不动杆菌和枯草芽孢杆菌的有效菌数量之比为1:说　明　书 1/6 页 3 CN 115491336 A 3