(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211421591.0 (22)申请日 2022.11.15 (71)申请人 南京大学 地址 210023 江苏省南京市栖霞区仙林大 道163号 申请人 秦皇岛中地建筑工程有限公司 　 河北省地矿局第八地质大队 （河北 省海洋地质资源调查中心） (72)发明人 刘亮　张云　郭思羽　赵志勇　 郭颖　刘萍　王涵　王立新　 张亚丽　李天丽　郑凌凌　田冬霞　 刘会欣　吕超　郎坤　 (74)专利代理 机构 南京华讯知识产权代理事务 所(普通合伙) 32413 专利代理师 仝东凤(51)Int.Cl. E02D 3/00(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12R 1/07(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 利用藻类与产脲酶细菌保护夯土长城表面 雨水侵蚀的方法 (57)摘要 本发明涉及土遗址文物保护领域， 尤其是一 种利用藻类与产脲酶细菌保护夯土长城表面雨 水侵蚀的方法， 通过藻类与土壤中的产脲酶细菌 共同保护夯土长城表面免于雨水侵蚀， 首先选取 丝状藻P在无菌环境下进行培养， 得到扩培后的 藻液R， 将藻液R喷洒在夯土长城表面并进行养 护； 提取土壤中产脲酶细菌A并进行扩培成菌液 B， 之后利用尿素溶液C和氯化钙溶液D混合成胶 结液E， 在养护后的夯土长城表面喷洒菌液B与胶 结液E； 利用丝状藻锁住大颗 粒土体， 同时藻类分 泌的多糖以及产脲酶菌液与胶结液产生的钙化 沉淀可共同胶结固化土体颗粒， 显著提高夯土长 城的抗冲刷侵蚀能力； 本发明藻类、 菌种均来源 于土壤， 绿色环保， 成本低， 可广泛应用于夯土长 城的保护。 权利要求书2页 说明书9页 附图1页 CN 115492077 A 2022.12.20 CN 115492077 A 1.一种利用藻类与产脲酶细菌保护夯土长城表面雨水侵蚀的方法， 其特征在于， 包括 以下步骤： 步骤S1： 分离提取土壤表面的丝状藻P， 在无菌环境下进行培养， 得到扩培后的藻液R； 将藻液R喷洒在夯土长城表面， 用塑料薄膜进行覆盖， 每隔一段时间洒水养护一次， 使其表 面湿润， 养护期满藻类接种成功并确定生长后撤掉塑料薄膜,自然风干； 步骤S2： 提取土壤中的产脲酶细菌A； 步骤S3： 将产脲酶细菌A接种至 培养基F进行扩培， 形成菌液B； 步骤S4： 配制尿素溶液C和氯化钙溶液D， 将尿素溶液C与氯化钙溶液D按比例 混合在一 起， 形成胶结 液E； 步骤S5： 分别将菌液B与胶结液E先后喷洒在经过所述步骤S1处理后的夯土长城表面， 自然风干 。 2.根据权利要求1所述的一种利用藻类与产脲酶细菌保护夯土长城表面雨水侵蚀的方 法， 其特征在于， 所述 步骤S1中丝状藻P包括席藻、 伪枝藻、 具鞘微鞘藻和/或其 他丝状藻类。 3.根据权利要求1所述的一种利用藻类与产脲酶细菌保护夯土长城表面雨水侵蚀的方 法， 其特征在于， 所述步骤S1中， 将处于对数生长期纯化后的丝状藻种， 用无菌刀切碎后接 种于灭菌后的BG11培养基溶液三角瓶内进行培养， 在瓶口处利用通气泵通入空气， 在温度 20～30℃、 光照2000～5000lux、 光暗周期为12 h/12h 的条件下进行培养， 培养10～2 0天， 得 到扩培后的藻液R。 4.根据权利要求1所述的一种利用藻类与产脲酶细菌保护夯土长城表面雨水侵蚀的方 法， 其特征在于， 所述步骤S1中， 将藻液R按照7～10g ·dw/㎡用量均匀喷洒夯土长城表面， 喷洒后用塑料薄膜覆盖并每隔30cm扎透气孔， 每1～2天洒水养护一次， 水中掺入BG11培养 基0.1～0.3g/L， 保持表面湿润， 养护20～30天藻类接种成功并确定生长后撤掉塑料薄膜， 自然风干 5‑7天使其表面形成藻类结皮。 5.根据权利要求1所述的一种利用藻类与产脲酶细菌保护夯土长城表面雨水侵蚀的方 法， 其特征在于， 所述步骤S2中， 产脲酶细菌A包含巴氏芽孢杆菌或迟缓芽孢杆菌或其他任 何能够从土壤中提取的产脲酶细菌 。 6.根据权利要求1所述的一种利用藻类与产脲酶细菌保护夯土长城表面雨水侵蚀的方 法， 其特征在于， 所述步骤S3中， 培养基F为浓度25g/L的  LB肉汤和浓度20g/L的尿素溶液的 混合液， 混合比例为9:1。 7.根据权利要求1所述的一种利用藻类与产脲酶细菌保护夯土长城表面雨水侵蚀的方 法， 其特征在于， 所述步骤S3中， 将产脲酶细菌A在无菌条件下接种至培养基F， 将接种好的 培养液放在摇床进行培养， 摇床转速120～150r/min,培养温度25～35℃,培养时间： 1～3 天， 获得的菌液B浓度OD6 00值为1.0～2.0。 8.根据权利要求1所述的一种利用藻类与产脲酶细菌保护夯土长城表面雨水侵蚀的方 法， 其特征在于， 所述步骤S5中， 在经过所述步骤S1处理后的夯土长城表面 喷洒菌液B总用 量为2～3L/㎡， 喷洒胶结 液E总用量 为4～6L/㎡。 9.根据权利要求8所述的一种利用藻类与产脲酶细菌保护夯土长城表面雨水侵蚀的方 法， 其特征在于， 所述步骤S5中， 采用喷洒装置一将菌液B分次缓慢均匀喷洒在夯土长城墙 体表面， 喷洒装置一停止工作5～20  min； 采用喷洒装置二将胶结液E分次缓慢均匀喷洒在权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115492077 A 2夯土长城墙体表 面， 喷洒装置二停止工作5～20  min； 再次启动喷洒装置一喷洒菌液B， 如此 循序循环数次直至 完全喷洒。 10.根据权利要求1所述的一种利用藻类与产脲酶细菌保护夯土长城表面雨水侵蚀的 方法， 其特征在于， 所述步骤S5中， 喷洒胶结液E的室外温度在20～ 40℃， 无风 或微风环 境下 进行。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115492077 A 3