(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211473425.5 (22)申请日 2022.11.23 (71)申请人 南京捷诺生物制品有限公司 地址 211100 江苏省南京市江宁区金兰路7 号绿地城际空间站E1栋 302-304 申请人 杭州衡美食品科技有限公司 (72)发明人 冯魏　郑雅丹　杨鹏　 (74)专利代理 机构 北京精金石知识产权代理有 限公司 1 1470 专利代理师 张天琦 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A23L 33/135(2016.01) A23L 2/38(2021.01) A23L 2/84(2006.01)A23L 33/10(2016.01) A23L 33/21(2016.01) A23C 9/13(2006.01) A23G 3/36(2006.01) A23G 3/48(2006.01) A23G 3/42(2006.01) C12R 1/25(2006.01) C12R 1/225(2006.01) C12R 1/245(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 调节人体微生态的复合菌及其制备方法和 应用 (57)摘要 本发明提供了调节人体微生态的复合菌及 其制备方法和应用， 涉及益生菌领域， 该复合菌 的制备方法包括以下步骤： （1） 将植物乳杆菌接 入培养基后， 好氧发酵， 得到发酵液A； （2） 将鼠李 糖乳杆菌、 干酪乳杆菌、 双歧杆菌接入培养基后， 厌氧发酵， 得到发酵液B； （3） 将发酵液A和发酵液 B混合后， 离心浓缩， 得到活性菌泥， 干燥， 即得复 合菌； 其中， 培养基包括： 蛋白胨、 甘蔗糖蜜、 酵母 膏、 磷酸氢二钾、 柠檬酸钠、 玉米低聚肽粉、 棉籽 低聚糖、 五水合硫 酸镁、 吐温 ‑80、 烟酰胺、 D ‑异抗 坏血酸钠、 花生四烯酸油脂、 维生素B1。 制得的复 合菌可调节肠道微生态， 从而降低感染性疾病、 肥胖、 糖尿病等代谢疾病的得病风险。 权利要求书1页 说明书8页 CN 115537362 A 2022.12.30 CN 115537362 A 1.一种复合菌的制备 方法， 其特 征在于： 包括以下步骤： （1） 将植物乳杆菌 接入培养基后， 好氧发酵， 得到发酵 液A； （2） 将鼠李糖乳杆菌、 干酪乳杆菌、 双歧杆菌 接入培养基后， 厌氧发酵， 得到发酵 液B； （3） 将发酵 液A和发酵 液B混合后， 离心浓 缩， 得到活性菌泥， 干燥， 即得复合菌； 所述培养基包括： 蛋白胨、 甘蔗糖蜜、 酵母膏、 磷酸氢二钾、 柠檬酸钠、 玉米低聚肽粉、 棉 籽低聚糖、 五水合硫酸镁、 吐温 ‑80、 烟酰胺、 D ‑异抗坏血酸钠、 花 生四烯酸油脂、 维生素B1。 2.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于： 所述培养基包括： 4 ‑6g/L蛋白胨、 2 ‑ 4g/L甘蔗糖蜜、 3 ‑6g/L酵母膏、 3 ‑6g/L磷酸氢二钾、 0.5 ‑3g/L柠檬酸钠、 8 ‑16g/L玉米低聚肽 粉、 0.5‑4.5g/L棉籽低聚糖、 0.5 ‑2g/L五水合硫酸镁、 0.5 ‑5mL/L吐温 ‑80、 1‑6g/L烟酰胺、 D ‑ 异抗坏血酸钠3 5‑40mg/L、 花 生四烯酸油脂20 ‑40mg/L、 维生素B1 2‑10mg/L。 3.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于： 所述培养基包括： 5g/L 蛋白胨、 3g/L甘 蔗糖蜜、 5g/L酵母膏、 5g/L磷酸氢二钾、 2g/L柠檬酸钠、 10g/L玉米低聚肽粉、 1g/L棉籽低聚 糖、 1g/L五水合硫酸镁、 1.5mL/L吐温 ‑80、 2g/L烟酰胺、 D ‑异抗坏血酸钠36mg/L、 花生四烯酸 油脂28mg/L、 维生素B1 3mg/L。 4.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于： 所述双歧杆菌包括婴儿双歧杆菌、 动 物双歧杆菌、 青春双歧杆菌、 两歧双歧杆菌、 长双歧杆菌中的一种或多种。 5.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于： 按体积百分比计， 所述鼠李糖乳杆菌、 干酪乳杆菌和双歧杆菌在培养基中的接种量为2 ‑5%； 所述植物乳杆菌在培养基中的接种量 为1‑2%。 6.根据权利 要求1所述的制备方法， 其特征在于： 所述好氧发酵的温度为35 ‑37℃， 时间 为24h， 转速为150 ‑200r/min； 所述厌氧发酵的温度为35 ‑37℃， 时间为48h， 转速为110 ‑ 150r/min。 7.如权利要求1 ‑6任一项所述的制备 方法得到的复合菌 。 8.如权利要求1 ‑6任一项所述的制备方法得到的复合菌在制备调节人体微生态产品中 的应用。 9.根据权利要求8所述应用， 其特征在于： 所述调节人体微生态产品的剂型包括菌粉、 含片、 发酵乳、 软糖或饮料。 10.根据权利要求8所述应用， 其特征在于： 所述调节人体微生态产品的原料还包括抗 性糊精、 低聚异麦 芽糖、 低聚半乳糖、 全脂 乳粉、 海藻粉。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115537362 A 2调节人体微生态的 复合菌及其制备方 法和应用 技术领域 [0001]本发明涉及益生菌领域， 具体涉及调节人体微生态的复合菌及其制备方法和应 用。 背景技术 [0002]人体微生态系统包括口腔、 皮肤、 泌尿道、 呼吸道、 阴道和肠道6个微生态系统， 其 中， 肠道微生态系统最重要也最复杂， 根据文 献： 蒋建文, 李兰娟. 人体微生态与疾病的研 究现状和展望[J].  传染病信息,  2016(5):7.的记载可知， 肠道 微生态与感染性疾病、 肥胖 和糖尿病等代谢性疾病 、 肝病以及 肠道疾病等均密切相关。 [0003]人体微生态失调指正常的微生物群之间和正常微生物群与宿主之间的微生态平 衡， 在外环 境影响下， 由生理性组合转变为病理性组合状态。 微生态失调包括： ①菌群失调， 即有益菌数量和密度下降， 菌膜屏障作用削弱； ②菌群易立， 即微生物种群间斗争， 以及 ③ 外籍菌入群等。 当人体微生态失调时， 将会造成相关疾病的发生， 而根据研究发现人体微生 态的平衡则有助于疾病的防治。 [0004]相关研究表明益生菌与人体微生态之间存在密切的联系， 如文献： 申兵兵,  许梅 花. 乳酸菌与人体微环 境之间相互关系的研究[J].  家庭医药.就医选药,  2017(12).研究 发现， 乳酸菌作为益生菌在人体肠道 微生态平衡、 疾病防治和保健中起着至 关重要的作用。 文献： 金苏,  蔡东联. 评估丹尼斯克乳双歧杆菌Bi07及嗜酸乳杆菌NCFM对 人体肠道消化系 统微生态环 境改善功效的研究[J].  中华疾病控制 杂志, 2010(2):3.研究了丹尼斯克乳双 歧杆菌Bi07及嗜酸乳杆菌NCFM对肠道消化系统微生态环境改善效果， 结果发现， 上述两种 菌可以有效改善人体肠道消 化系统微生态环境,志愿者体内双歧杆菌、 乳杆菌活菌数显著 增加,产气荚膜杆菌活菌数显著减少。 文 献： 田洪涛,  张柏林, 贾英民等.  双歧杆菌与人体 胃肠道微生态[J].河北农业大学学报,  2000.则研究了肠道双歧杆菌与微生态平衡间的相 关关系。 [0005]基于以上研究， 相关菌剂被用以调节人体微生态平衡， 如专利CN107308190A公开 了调节人体微生态平衡的益生菌组合物及其培养物、 制剂、 用途， 该益生菌组合物由副干酪 乳杆菌、 保加利亚乳杆菌、 发酵乳杆菌、 格氏乳杆菌、 植物乳杆菌植物亚种和瑞士乳杆菌制 备而成， 进 而可以用于预防和治疗婴湿疹等免疫系统疾病以及多种类型肠炎 。 [0006]再如专利CN10 1406489B公开了微生态复合菌剂的制备方法， 该微生态复合菌剂主 要由纳豆芽孢杆菌、 乳酸克鲁维酵母菌、 嗜酸乳杆菌和大豆低聚糖组成。 制备方法： 培养； 扩 大培养； 转入高菌浓度培养液继续培养、 离心； 加入辅料， 预冻、 真空冷冻干燥， 之后加入大 豆低聚糖， 即得到微 生态复合菌剂， 该微 生态复合菌剂具有较多的有益活菌总数和存活率。 [0007]但目前， 单一益生菌调节微生态的能力有限， 而复合菌虽能够通过竞争等调节微 生态， 但也通常存在着的多菌种活性低以及培养基安全性差等问题。 因此， 针对以上问题， 寻找一种能够有效调节肠道微 生态的复合菌 十分必要。说　明　书 1/8 页 3 CN 115537362 A 3