(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210018948.4 (22)申请日 2022.01.05 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114350785 A (43)申请公布日 2022.04.15 (73)专利权人 安徽中医药大学第一附属医院 （安徽省中 医院） 地址 230031 安徽省合肥市梅 山路117号 (72)发明人 刘健　孙艳秋　文建庭　忻凌　 姜辉　万磊　 (74)专利代理 机构 合肥辉达知识产权代理事务 所(普通合伙) 3416 5 专利代理师 汪守勇 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01)C12N 15/11(2006.01) C12N 15/113(2010.01) C12N 15/85(2006.01) 审查员 刘慧 (54)发明名称 环状RNA hsa_ circ_0000734基因的应用 (57)摘要 本发明涉及一种环状RNA  hsa_circ_ 0000734基因的应用， 根据提取的总 RNA序列， 设 计并合成特异性PCR引物， 利用RT ‑qPCR技术， 发 现hsa_circ_0000734在类风湿关节炎(RA)患者 外周血单个核细胞中的表达显著上升， 并且与RA 患者的病程、 疾病活动性指标呈正相关关系， 故 hsa_circ_0000734基因可应用于制备类风湿关 节炎的辅助诊断、 治疗或者预后评估的试剂； 本 发明同时设计并合成特异性过表达和干扰序列， 能够通过调控NF ‑κB信号通路抑制TNF ‑α诱导 的RA患者滑膜成 纤维细胞(FLS)的炎症、 增殖、 迁 移， 促进细胞的凋亡， 该基因可成为RA的分子靶 向治疗的工具。 权利要求书1页 说明书9页 序列表1页 附图6页 CN 114350785 B 2022.09.13 CN 114350785 B 1.一种抑制环状RNA  hsa_circ_0000734基 因表达的siRNA在制备类风湿关节炎RA靶向 治疗试剂中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114350785 B 2环状RNA hsa_circ_0 000734基因的应用 技术领域 [0001]本发明属于风湿病分子生物学领域， 具体涉及一种环状RNA  hsa_circ_0000734基 因的应用。 具体而言， 本发 明涉及环状RNA  hsa_circ_0000734基因在制备RA辅助诊断试剂、 分子靶向治疗试剂或者预后评估试剂中的应用。 背景技术 [0002]类风湿关节炎(rheumat oid arthritis,RA)以对称性、 周围性、 多关节炎为主要表 现， 具有慢 性、 进行性、 侵袭性的特点， 可导致全身多系统损害的一种自身免疫性、 炎症 性疾 病， 最终可能导致 关节畸形和功能丧失(Fraenkel  Liana,Bat hon Joan M,England  Bryant  R,et al.2021American  College of Rheumatology  Guideline  for the Treatment  of  Rheumatoid  Arthritis.[J].Arthritis  Rheumatol,2021,73:1108 ‑1123； Zhao  Jianan, Guo Shicheng,Schrodi  Steven J,et al.Molecular  and Cellular  Heterogeneity  in  Rheumatoid  Arthritis:Mechanisms  and Clinical  Implications.[J].Front  Immunol, 2021,12:790122.)。 RA发病机制复杂， 它的发生、 发展可能与遗传、 周围环境、 免疫功能的紊 乱、 血小板活化等密切相关。 RA的男女患病比率为1:3， 30～50岁为发病高峰， 中国RA患病率 为0.2％～0.4％， 全球患病率为0.5％～1％， 年发病率为20/100万～50/100万人(Zeng  Q  Y,Ren C,Darmawan  J,et al.Rheumatic  Diseases  in China[J].Arthritis  Research& Therapy,2008,10(1)； Pan  L,Wang T.Features  of cardiac remodeling  in Patients   with Acute Coronary  Syndrome  Complicated  with Rheumatoid  Arthritis[J].Sci   Rep,2017,7(1))。 RA确切的病因和发病机制目前尚不清楚。 环境因素、 遗传背景、 环境 ‑遗传 交互作用以及表观遗传学修饰作用共同决定了RA的发病(McInnes  IB,Schett  G.The  pathogenesis  of rheumatoid  arthritis.NEngl  J Med.2011； 365(23):2205 ‑2219)。 非甾 体类抗炎药、 糖皮质激素、 生物制剂的发展等对RA的治疗产生很大的影响， 但是目前为止， RA还是不能被治愈。 所以， 因此， 寻找RA早期诊断、 靶向治疗和预后评估的生物标记物， 对RA 的治疗及预后具有重大的意 义。 [0003]近年来， 随着测序技术及生物信息学的发展和广泛应用， 越来越多的非编码RNA (non‑coding RNA)， 如环 状RNA(cir cular RNA,circRNA)、 长链非编码RNA(long  noncoding   RNA,lncRNA)、 微小RNA(micro  RNA,miRNA)等在RA发病中发挥重要作用。 circRNA是一类不 含5’末端和3’末端的共价闭合环状结构的新型非编码RNA， 具有物种间序列保守和结构稳 定， 以及细胞或组织特异性表达等特征(Wen  Jianting,Liu  Jian,Wang  Xin,et  al.Expression  and clinical  significance  of circular  RNAs related to immunity  and inflammation  in patients  with rheumatoid  arthritis .[J] .Int   Immunopharmacol,2021,92:10 7366)。 其在作为 miRNA分子海绵， 调节基因表 达， 与蛋白质相 互作用等方面发挥重要作用(Zhang  Juan,Zhang  Yue,Ma Yeye,et al.Therapeutic   Potential  of Exosomal  circRNA Derived from Synovial  Mesenchymal  Cells via  Targeting  circEDIL3/miR ‑485‑3p/PIAS3/STAT3/VEGF  Functional  Module in 说　明　书 1/9 页 3 CN 114350785 B 3