(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210010619.5 (22)申请日 2022.01.05 (71)申请人 集美大学 地址 361000 福建省厦门市集美区银 江路 185号 (72)发明人 蔡明夷　翁晓霞　徐杨如　 (74)专利代理 机构 厦门市精诚新创知识产权代 理有限公司 3 5218 代理人 秦华 (51)Int.Cl. C12Q 1/6879(2018.01) C12Q 1/6888(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种鉴别杂色鲍遗传性别的分子标记及其 应用 (57)摘要 本发明公开了一种鉴别杂色鲍遗传性别的 分子标记及其应用。 所述分子标记表现为分子标 记表现为SEQ  ID NO:1所示核苷酸序列的插入/ 缺失长度多态 性。 杂色鲍个体的一对同源染色体 的其中一条缺失SEQ  ID NO:1核苷酸序列， 遗传 性别为雄性； 杂色鲍个体的一对同源染色体均没 有缺失SEQ  ID NO:1核苷酸序列， 遗传性别为雌 性。 检测时， 采用SEQ  ID NO:2和3为引物进行PCR 扩增， 当所述扩增产物为2个片段， 长度分别 266bp和243bp， 所述待测 杂色鲍的遗传性别为雄 性； 当所述扩增产物只有1个片段， 长度为2 66bp， 所述待测杂色鲍的遗传性别为雌性。 杂色鲍性腺 分化前后均适用于该方法。 权利要求书1页 说明书6页 序列表1页 附图1页 CN 114231608 A 2022.03.25 CN 114231608 A 1.一种杂色鲍遗传性别相关的分子标记， 其特征在于， 所述分子标记表现为核苷酸序 列SEQ ID NO:1所示核苷 酸序列的插入/缺失长度多态 性； 杂色鲍个体的一对同源染色体的 其中之一缺 失了SEQ ID NO:1所示核苷 酸序列的， 遗传性别为雄性； 杂色鲍个体的一对同源 染色体均没有缺失SEQ  ID NO:1所示核苷酸序列， 遗传性别为雌性。 2.一种用于检测权利要求1所述遗传性别分子标记的引物对， 其特征在于： 所述引物具 有SEQ ID NO:2‑3所示的核苷酸序列。 3.一种用于检测权利要求1所述分子标记的试剂盒， 其特征在于， 含有权利要求2所述 引物对。 4.权利要求1所述分子标记或权利要求2所述引物对或权利要求3所述试剂 盒在杂色鲍 育种和育苗中的用途。 5.一种鉴别杂色鲍遗传性别的方法， 其特征在于， 对待测杂色鲍进行权利要求1所述分 子标记的检测， 以确定所述待测杂色鲍的遗传性别。 6.如权利要求5所述的方法， 其特 征在于， 所述的方法包括： 利用权利要求2所述引物对或权利要求3所述试剂盒， 对待测杂色鲍DNA进行PCR扩增； 检测扩增片段的数目及长度， 以及 基于所述扩增片段的数目和长度， 确定杂色鲍的遗传性别， 其中， 当扩增产物具有两条带， 长度分别为266bp和243bp， 则所述待测杂色鲍一对同源 染色体的其中之一缺失了SEQ  ID NO:1所示核苷 酸序列， 所测杂色鲍的遗传性别为雄性； 当 扩增结果只有一条带， 长度为266bp， 所述待测杂色鲍一对同源染色体均没有缺失SEQ  ID  NO:1所示核苷酸序， 所测杂色鲍的遗传性别为雌性。 7.如权利要求6所述的方法， 其特征在于， 利用凝胶电泳， 优选琼脂糖凝胶或聚丙烯酰 胺凝胶电泳， 检测所述扩增片段的数目和长度。 8.一种杂色鲍辅助育种方法， 其特 征在于， 所述方法包括： 通过权利要求5 ‑7任一项所述方法， 检测权利要求1所述分子标记， 以便确定待测杂色 鲍的遗传性别。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114231608 A 2一种鉴别杂色鲍 遗传性别的分子标记及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及水产生物技术领域中的贝类遗传性别鉴定和性别控制技术， 尤其涉及 一种鉴定杂色鲍遗传性别的分子标记及其应用。 背景技术 [0002]水产生物的性别可以由遗传决定也可以由环境因素决定。 即使遗传决定性别的物 种， 也易发生性逆转。 因此， 遗传决定性别水产生物的性别包括遗传性别和生理性别两个层 面。 遗传性别即决定性别方向的遗传组成， 生理性别即性腺等实际表现的性别。 在水产养殖 和性别控制 育种中， 常常存在研究对 象遗传性别与生理性别不一致的情况， 需要鉴定研究 对象的遗传性别。 [0003]水产生物的经济性状常常具有性别二态性。 因此， 通过性别控制技术生产单性或 不育苗种在水产养殖中具有良好的应用前景。 水产生物性别控制 育种过程中， 需要通过人 工诱导培育性反转个体(生理性别与遗传性别相反)、 超雄个体(雄性异配， YY)或超雌个体 (雌性异配， WW)。 鉴定这些个体的遗传性别是性别控制育种的一个必 要的环节。 在没有性别 分子标记的情况下， 一般用后裔测定法进行鉴定。 但后裔测定法存在周期长、 成本高的缺 点。 性别分子标记是指与性别紧密连锁的DNA标记。 性别分子标记可以通过P CR进行检测， 进 而根据PCR检测结果确定生物体的遗传性别。 与后裔测定法相比较， 基于性别分子标记的 PCR检测鉴定水产动物的遗传性别 具有简便、 快速和经济等优势。 目前， 性别分子标记已在 多种水产动物中开 发成功， 并应用于性别控制育种， 极大地提高了性别控制育种效率， 缩短 了育种周期。 但由于性别标记在物种间通常不能通用， 特定物种的性别分子标记需要专门 开发。 [0004]杂色鲍(Haliotis  diversicolor)属原始腹足目、 鲍科、 鲍属， 是一种重要海水养 殖对象。 由于雄性的成活率和品质较高， 因此杂色鲍性别控制相关技术具有潜在的商业应 用价值。 性别分子标记是性别控制育种的重要工具。 然而， 迄今， 杂色鲍的性别分子标记在 国内外均未 见报道。 发明内容 [0005]本发明的目的在于提供一种鉴别 杂色鲍遗传性别的分子标记。 [0006]为实现上述目的， 本 发明提供一种杂色鲍遗传性别相关的分子标记， 其特征在于， 所述分子标记表现为核苷 酸序列SEQ  ID NO:1所示核苷 酸序列的插入/缺失长度多态 性； 杂 色鲍个体的一对同源染色体的其中之一缺失了SEQ  ID NO:1所示核苷酸序列的， 遗传性别 为雄性； 杂色鲍个体的一对同源染色体均没有缺 失SEQ ID NO:1所示核苷 酸序列， 遗传性别 为雌性。 [0007]本发明还提供一种用于检测所述遗传性别分子标记的引 物对， 其特征在于： 所述 引物具有SEQ  ID NO:2‑3所示的核苷酸序列。 [0008]本发明还提供一种用于检测所述分子标记的试剂盒， 其特征在于， 含有所述引 物说　明　书 1/6 页 3 CN 114231608 A 3