(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210024306.5 (22)申请日 2022.01.07 (71)申请人 新疆畜牧科 学院畜牧 研究所 地址 830000 新疆维吾尔自治区乌鲁 木齐 市经济技 术开发区阿里山 街468号 (72)发明人 付雪峰　吴翠玲　秦崇凯　石刚　 薛多雄　何军敏　刘静　毛静艺　 (74)专利代理 机构 乌鲁木齐合纵专利商标事务 所 65105 代理人 周星莹　谭南 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12Q 1/6806(2018.01) (54)发明名称 与疆南绒山羊羊绒纤维直径及其变异系数 相关的分子标记及特异性引物对和应用 (57)摘要 本发明涉及动物分子标记 技术领域， 是一种 与疆南绒山羊羊绒纤维直径及其变异系数相关 的分子标记及特异性引物对和应用， 该与疆南绒 山羊羊绒纤维直径及纤维直径变异系数相关的 分子标记位于疆南绒山羊1号染色体的K RTAP27‑ 1基因上， KRTAP27 ‑1基因位于1号染色体核苷酸 序列的第3968645bp ‑3969193bp处， 所述分子标 记位于1号染色体核苷酸序列的39 68799bp处， 突 变碱基为A或G。 本发明所述分子标记能够实现羊 绒纤维直径及纤维直径变异系数性状优良品种 种羊的早期选种， 出生后即可进行选留， 从而降 低选育成本， 加速高品质超细型绒山羊的育种进 程， 为疆南绒山羊的遗传改良提供理论基础和指 导。 权利要求书2页 说明书10页 序列表1页 附图1页 CN 114350816 A 2022.04.15 CN 114350816 A 1.一种与疆南绒山羊羊绒纤维直径及纤维直径变异系数性状相关的分子标记， 其特征 在于其位于疆南绒山羊1号染色体的KRTAP27 ‑1基因上， KRTAP27 ‑1基因位于1号染色体核苷 酸序列的第3968645bp ‑3969193bp处， 所述分子标记位于1号染色体核苷酸序列的 3968799bp处， 突变碱基为A或G。 2.一种用于扩增权利要求1所述的与疆南绒山羊羊绒纤维直径及纤维直径变异系数性 状相关的分子标记的特异性引物对， 其特 征在于包括上游引物和下游引物； 上游引物： 5 ’ ‑agtggcgtatcctacagaactcact‑3’； 下游引物： 5 ’ ‑cgctactca ggctcctcctg‑3’。 3.一种权利要求2所述的特异性引物对在制备体外检测与疆南绒山羊羊绒纤维直径及 纤维直径变异系数性状相关的分子标记的试剂或试剂盒的应用。 4.一种权利要求1所述的分子标记在疆南绒山羊羊绒纤维直径及纤维直径变异系数性 状选择中的应用。 5.根据权利要求4所述的分子标记在疆南绒山羊羊绒纤维直径及纤维直径变异系数性 状选择中的应用， 其特征在于包括下述步骤： 第一步， 取待测疆南绒山 羊的基因组DNA； 第二 步， 以基因组DNA为模板， 利用特异 性引物对进行第一轮扩增， 第一轮P CR体系为25 μl的反应 体系， 第一轮PCR体系由下列成分组成： 第一轮PCR扩增条件为： 98度预变性3分钟， 然后执行8个循环， 循环条件是94度变性30 秒， 50度退火30秒， 72度延伸30秒； 紧接着执行25个循环， 循环条件是98度变性30秒， 66度退 火30秒， 72度延伸3 0秒； 最后72度延伸5分钟， PCR反应完成后， 4度保温； 上游引物池： 5 ’ ‑agtggcgtat cctacagaac tcact‑3’； 下游引物池： 5 ’ ‑cgctactca g gctcctcctg‑3’； 第三步， 以第一轮PCR产物为模板执行第二轮PCR反应， 第二轮PCR体系为30 μl的反应体 系， 第二轮PCR体系由下列成分组成： 第二轮PCR扩增条件为： 98度预变性5分钟， 然后执行5个循环， 循环条件是变性94度30 秒， 55度退火20秒， 72度延伸30秒， 最终72度延伸5分钟， PCR反应完成后， 4度 保温， 各个PCR 产物等量混合后， 进行测序， 根据测序结果进行基因分型；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114350816 A 2对于羊绒纤维直径性状， 所述分子标记对应的基因型中， 含有G基因的GG或GA基因型的 疆南绒山羊属于羊绒纤维直径性状较细的优势个体； 对于羊绒纤维直径变异系数性状， 所 述分子标记对应的基因型中， AA基因型疆南绒山羊属于羊绒纤维直径变异系数性状较小的 优势个体。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114350816 A 3