(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210023091.5 (22)申请日 2022.01.10 (71)申请人 深圳市仙湖植物园 （深圳市园林研 究中心） 地址 518000 广东省深圳市罗湖区莲塘街 道仙湖路16 0号 申请人 深圳华大生命科 学研究院 (72)发明人 龚奕青　张寿洲　魏桐　刘欢　 杨蕾蕾　 (74)专利代理 机构 深圳青年人专利商标代理有 限公司 4 4350 专利代理师 吴桂华 (51)Int.Cl. C12Q 1/6879(2018.01) C12Q 1/6895(2018.01)C12Q 1/686(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 分子标记、 引物对及其应用和苏铁科植物 性 别的鉴定方法 (57)摘要 本发明为分子标记、 引物对及其应用和苏铁 科植物性别的鉴定方法， 涉及植物 性别鉴定技术 领域， 具体提供一种分子标记、 引物对及苏铁科 植物性别的鉴定方法。 其中， 所述分子标记可与 苏铁科植物Y染色体连锁； 所述分子标记含有编 码核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示的序列。 本发 明的分子标记可与苏铁科植物Y染色体紧密连 锁， 从而达到快速检测苏铁科植物性别的目的， 有效地提高了园林研究和管理的效率。 权利要求书1页 说明书4页 序列表1页 附图1页 CN 114561457 A 2022.05.31 CN 114561457 A 1.一种分子标记， 其特 征在于， 所述分子标记可与苏铁科植物Y染色体连锁； 所述分子标记含有编码核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示的序列。 2.如权利要求2所述的分子标记， 其特征在于， 所述分子标记的编码核苷酸序列如SEQ   ID NO.1所示。 3.如权利要求1至2任一项所述的分子标记， 所述分子标记在引物对的作用下， 以苏铁 科植物雄 性植株基因组的DNA为模板进行PCR扩增获得； 或者 通过DNA化学合成方法得到 。 4.一种引物对， 其特征在于， 包括引物1和引物2， 用于以苏铁科植物雄株基因组的DNA 为模板进行扩增， 以获得权利要求1至 3任一项所述的分子标记； 其中， 所述引物1含有编码核苷酸序列如SEQ  ID NO.2所示的序列； 所述引物 2含有编码核苷酸序列如SEQ  ID NO.3所示的序列。 5.如权利要求4所述的引物对， 其特征在于， 所述引物1的编码核苷酸序列如SEQ  ID  NO.2所示； 所述引物 2的编码核苷酸序列如SEQ  ID NO.3所示。 6.如权利要求1至 3任一项所述的分子标记在鉴定苏铁科植物性别中的应用。 7.一种苏铁科植物性别的鉴定方法， 其特征在于， 包括检测待测苏铁科植物的性染色 体是否与权利要求1至 3任一项所述的分子标记连锁的步骤， 或者， 以权利要求4至5任一项所述的引物对待测苏铁科植物进行PCR扩增， 并判断所述 PCR扩增产物中是否含有权利要求1至 3任一项所述的分子标记的步骤。 8.如权利要求7所述的苏铁科植物性别的鉴定方法， 其特征在于， 所述待测苏铁科植物 包括任一株龄的苏铁科植物。 9.如权利要求7至8任一项所述的苏铁科植物性别的鉴定方法， 其特征在于， 所述待测 苏铁科植物包括德保苏铁、 攀枝花苏铁、 石山苏铁、 叉孢苏铁以及仙湖苏铁中的任一种。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114561457 A 2分子标记、 引物对及其应用和苏铁科植物性别的鉴定方 法 技术领域 [0001]本发明属于植物性别鉴定技术领域， 尤其涉及一种分子标记、 引 物对及苏铁科植 物性别的鉴定方法。 背景技术 [0002]苏铁科植物(Cycadaceae  Pers.)， 属于裸子植物门、 苏铁纲、 苏铁目， 俗称 “铁树”， 主要分布在我国、 南 亚、 东南亚、 太平洋岛屿、 澳大利亚和非洲等， 全世界有1个属10 0余种。 [0003]苏铁科植物为雌雄异株植物， 其具有生长缓慢、 雌雄植株难以分辨的特点， 以往只 能在植物开花时才能判断性别， 而成株树龄多在十年以上以及在适宜的环境才会开花。 由 于缺少简单有效的苏铁类植物性别鉴定方法， 目前国际上尚无对不同苏铁野外居群性别比 和分布格局的报道， 野外回归实践也缺少性别配比的依据， 苏铁植物性别鉴定对于苏铁类 植物的科 学保护和园林培 育实践中一直存在技 术难点。 发明内容 [0004]本发明实施例的第一个目的在于提供一种分子标记， 该分子标记可与苏铁科植物 Y染色体连锁以快速对苏铁科植物的性别进行鉴定 。 [0005]本发明实施例采用的技 术方案如下： [0006]一种分子标记， 所述分子标记可与苏铁科植物Y染色体连锁； [0007]所述分子标记含有编码核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示的序列。 [0008]相对于现有技术而 言， 本发明实施例提供的分子标记， 可与苏铁科植物Y染色体紧 密连锁， 从而达 到快速检测苏铁科植物性别的目的。 [0009]本发明实施例的第二个目的在于提供一引物对， 其具体的技 术方案如下： [0010]一种引物对， 包括引物1和引物2， 用于以苏铁科植物雄株基因组的D NA为模板进行 扩增， 以获得 上述所述的分子标记； [0011]其中， 所述引物1含有编码核苷酸序列如SEQ  ID NO.2所示的序列； [0012]所述引物 2含有编码核苷酸序列如SEQ  ID NO.3所示的序列。 [0013]本发明实施例的第二个目的提供的引物对， 能以苏铁科植物雄性基因组的DNA为 模板进行扩增， 并获得上述的分子标记， 由此可以快速对苏铁科植物的性别进 行鉴定， 有效 地提高对苏铁科植物性别的认定， 有利于园林研究和管理的快速开展。 [0014]本发明实施例的第三个目的是提供上述分子标记在鉴定苏铁科植物性别中的应 用。 [0015]本发明实施例的第四个目的是提供一种苏铁科植物性别的鉴定方法， 其具体的技 术方案如下： [0016]包括检测待测苏铁科植物的性染色体是否与上述所述的分子标记连锁的步骤， [0017]或者， 以上述所述的引物对待测苏铁科植物进行PCR扩增， 并判断所述PCR扩增产 物中是否含有上述所述的分子标记的步骤。说　明　书 1/4 页 3 CN 114561457 A 3