(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210031782.X (22)申请日 2022.01.12 (71)申请人 中山大学附属第一医院 地址 510080 广东省广州市中山 二路58号 (72)发明人 谢云　邓春华　杨其运　姚嘉慧　 孙祥宙　王竹　涂响安　 (74)专利代理 机构 广州三环 专利商标代理有限 公司 44202 专利代理师 费雯 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12Q 1/6851(2018.01) G01N 33/573(2006.01) G01N 33/58(2006.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种用于预测男性生殖功能衰退的标志物 及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种用于预测男性生殖功能 衰退的标志物及其应用， 涉及生物技术领域。 本 发明的一种用于预测男性生殖功能衰退的标志 物， 包括PLA2G2D基因。 本发明通过检测精浆中的 PLA2G2D预测男性生殖功能衰退， 精浆相对于其 他组织较易获取， 与睾丸活检和穿刺相比， 属于 无创性检查， 减轻了受测者的痛苦； 精浆中的 PLA2G2D在生殖功能衰老早期表达升高并及时预 警， 可及早防治生殖功能下降， 避免了睾丸精子 发生与附睾精子成熟的滞后性。 权利要求书1页 说明书4页 序列表1页 附图3页 CN 114480618 A 2022.05.13 CN 114480618 A 1.一种用于预测男性 生殖功能衰退的标志 物， 其特征在于， 包括PLA 2G2D基因。 2.PLA2G2D在制备用于预测男性 生殖功能衰退的检测试剂中的应用。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于， 所述试剂包括检测体液中PLA2G2D的mRNA 表达情况的试剂。 4.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于， 所述试剂包括检测体液中PLA2G2D蛋白的 表达情况的试剂。 5.根据权利要求3～4任一项所述的应用， 其特 征在于， 所述体液为精浆。 6.ELISA法检测精浆PLA2G2D蛋白的试剂在制备用于预测男性生殖功能衰退的产品中 的应用。 7.一种用于预测男性生殖功能衰退的试剂盒， 其特征在于， 包括ELISA法检测精浆 PLA2G2D蛋白的试剂。 8.qRT‑PCR法检测PLA2G2D的引 物的试剂在制 备用于预测男性生殖功能衰退的产品中 的应用。 9.一种用于预测男性生殖功能衰退的试剂盒， 其特征在于， 包括采用qRT ‑PCR法检测 PLA2G2D的引物和检测β ‑Actin的引物。 10.根据权利要求9所述的试剂盒， 其特征在于， 所述检测PLA2G2D的引物的序列如SEQ   ID NO.1和SEQ  ID NO.2所示； 所述检测β ‑Actin的引物的序列如SEQ  ID NO.3和SEQ  ID  NO.4所示。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114480618 A 2一种用于预测男性生殖功能衰退的标志物及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及 生物技术领域， 具体涉及一种用于预测男性生殖功能衰退的标志物及 其应用。 背景技术 [0002]随着我国男性生育年龄逐渐推迟， ， 大龄男性生育力下降问题亟需高度重视。 增 龄、 疾病等因素导致的生殖腺体(睾丸、 附睾等)衰老是大龄男性生育力下降的核心发病机 制， 早期识别生殖腺体衰老并防止其生精功 能退行性变， 对于防治大龄男性生育力下降至 关重要。 然而， 目前缺乏可靠的大龄男性生育力下降早期预警评价指标， 即预测男性生殖功 能衰退的方法。 目前， 临床上用于评估男性生精功能的标志物主要来源于血液与精液， 包括 精液常规、 精子顶体酶、 精子DNA  碎片率、 血清激素等。 [0003]血清激素类指标包括卵泡刺激素(FSH)、 黄体生成素(LH)、 睾酮以及抑制素B等。 这 些指标在临床实际运用中， 特别在早期预测男性生殖功能衰退效果较为有限。 究其原因， 主 要由于血液中激素检测只能间接反 映睾丸功 能， 且无法反映附睾功能； 睾丸精子发生与附 睾精子成熟具有滞后性， 精液常规等系列检查结果仅能反映过去某一生精周期生精质量的 好坏， 无法实现早期预警； 睾丸和附睾组织样 本可通过穿刺活检术 获取， 但其作为一种有创 的检查手段， 难以实现广泛的临床 应用。 因此， 研究一种预测男性生殖功能衰退的新方法是 目前亟需解决的临床问题， 也是防治大龄男性 生育力下降亟需解决的问题。 发明内容 [0004]本发明的目的在于克服现有技术的不足， 提供一种用于预测男性生殖功能衰退的 标志物及其应用。 多项研究表明， 随着男性年龄的增 长， 其生殖功能也逐渐衰退， 特别是40 岁以后精子浓度开始出现缓慢下降和55岁后出现急剧下降。 大龄男性生殖功能衰退早期， 其精液常规检查等各项临床指标往往处在正常范围。 早期识别男性生殖腺体衰退并防止其 生精功能退行性变， 对于防治 大龄男性生育力下降至 关重要。 本发明通过大量的实验发现， 精浆PLA2G2D可在男性生殖功能衰老早期表达升高并及时预警， 具有充分的科学性和实用 性， 能够填补目前缺乏可靠的大龄男性 生育力下降早期预警评价指标这 一空白。 [0005]为实现上述目的， 本发明采取的技术方案为： 一种用于预测男性生殖功能衰退的 标志物， 包括PLA2G2D基因。 研究表明， PLA2G2D编码磷脂酶A2家族的分泌成员， 磷脂酶A2家 族成员水解甘油磷脂的sn ‑2脂肪酸酯键， 产生溶血磷脂和游离脂肪酸。 该基因可能参与炎 症和免疫反应， 以及与慢性阻塞性肺疾病相关的体重减轻。 本申请发明人经过大量的研究 发现， 精浆PLA2G2D随男性年龄的增长及生殖功能的减退而逐渐表达升高， PLA2G2D可作为 用于预测男性 生殖功能衰退的标志 物。 [0006]本发明还提供PLA 2G2D在制备用于预测男性 生殖功能衰退的检测试剂中的应用。 [0007]作为本发明所述应用的优选实施方式， 所述试剂包括检测体液中P LA2G2D 的mRNA 表达情况的试剂。说　明　书 1/4 页 3 CN 114480618 A 3