(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210051038.6 (22)申请日 2022.01.17 (71)申请人 中国水产科 学研究院南海水产研究 所 地址 510000 广东省广州市新港西路231号 (72)发明人 程长洪　郭志勋　马红玲　刘广鑫　 冯娟　邓益琴　 (74)专利代理 机构 广州科粤专利商标代理有限 公司 44001 专利代理师 刘明星　朱聪聪 (51)Int.Cl. C07K 14/435(2006.01) C12N 15/12(2006.01) C12Q 1/6888(2018.01) C12Q 1/6851(2018.01)C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 拟穴青蟹生物标记物CYP2基因及其在制备 病理检测试剂中的应用 (57)摘要 本发明公开了拟穴青蟹生物标记物CYP2基 因及其在制备病理检测试剂中的应用。 本发明从 拟穴青蟹中克隆到拟穴青蟹生物标记物CYP2基 因(其核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示)， 该基因 在肝胰腺、 鳃、 肠、 血细胞、 心 脏、 肌肉和胃组织中 都有表达， 其中在心脏中表达量最高， 其次是在 肝胰腺中， 而在肠道中表达量最低， 病原菌副溶 血弧菌刺激拟穴青蟹后， SpCYP2 基因表达量显著 上调， 在重金属镉胁迫下， SpCYP2基因表达量显 著上调。 CYP2 基因在毒理学应用上可作为独特的 生物标志物， 在评价水产动物 健康状态具有重要 的应用价 值。 权利要求书1页 说明书4页 序列表3页 附图4页 CN 114539376 A 2022.05.27 CN 114539376 A 1.CYP2蛋白， 其特 征在于， 氨基酸序列如SEQ  ID NO.2所示。 2.一种编码权利要求1所述的C YP2蛋白的拟穴青蟹生物标记 物CYP2基因。 3.根据权利 要求2所述的CYP2基因， 其特征在于， 所述的拟穴青蟹生物标记物CYP2基因 的核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示。 4.权利要求2或3所述的拟穴青蟹生物标记物CYP2基因作为生物标志物在制备评价水 产动物健康状态的病理检测试剂中的应用。 5.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 是检测拟穴青蟹生物标记物CYP2基因表达 量的试剂在制备评价水产动物健康状态的病理检测试剂中的应用。 6.根据权利要求5所述的应用， 其特征在于， 所述的检测拟穴青蟹生物标记物CYP2基因 表达量的试剂是定量PCR试剂。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特 征在于， 所述的定量PCR试剂， 其定量引物是： SpCYP2‑F:5’ ‑TGGTGGCAAGCAGACAGT TCG‑3’, SpCYP2‑R:5’ ‑GCCTTGTGCTTCTCGGTCTCAT‑3’。 8.一种评价水产动物健康状态的病理检测试剂， 其特征在于， 含有检测权利要求2或3 所述的拟穴青蟹生物标记 物CYP2基因表达量的试剂。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114539376 A 2拟穴青蟹生物标记物CYP2基因及其在制备病理检测试剂中的 应用 技术领域： [0001]本发明属于病害防治领域， 具体涉及拟穴青蟹生物标记物CYP2基因及其在制备病 理检测试剂中的应用。 背景技术： [0002]拟穴青蟹俗称青蟹， 具有 肉质鲜美营、 养价值高等特点， 深受消费者喜爱。 拟穴青 蟹主要分布在我国东南沿海以及东南亚一些国家。 拟穴青蟹是我国重要的养殖海水蟹类之 一， 养殖产量超过16.8万吨。 我国拟穴青蟹养殖模式主要以池塘养殖为主， 养殖模式相对粗 放。 近年来， 由于青蟹细菌性疾病和水环境中重金属胁迫等因素， 导致青蟹病害爆发严重， 青蟹亩产量不高， 严重阻碍了青蟹产业健康发展。 因此， 急需发展青蟹病害监测技术， 及时 防控病害爆发与传播， 为 提高青蟹产量 提高有效手段。 发明内容 [0003]本发明的第一个目的是提供一种独特的生物标志物， 在评价水产动物健康状态具 有重要的应用价 值的拟穴青蟹生物标记 物CYP2基因及其编码蛋白 ‑CYP2蛋白。 [0004]所述的CYP2蛋白， 其氨基酸序列如SEQ  ID NO.2所示。 [0005]编码上述C YP2蛋白的拟穴青蟹生物标记 物CYP2基因。 [0006]优选， 所述的拟穴青蟹生物标记 物CYP2基因的核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示。 [0007]本发明的第二个目的是提供上述拟穴青蟹生物标记物CYP2基因作为生物标志物 在制备评价水产动物健康状态的病理检测试剂中的应用。 [0008]优选， 是检测拟穴青蟹生物标记物CYP2基因表达量的试剂在制备评价水产动 物健 康状态的病理检测试剂中的应用。 [0009]优选， 所述的检测拟穴青蟹生物标记 物CYP2基因表达量的试剂是定量PCR试剂。 [0010]进一步优选， 所述的定量PCR试剂， 其定量引物是： [0011]SpCYP2‑F:5’ ‑TGGTGGCAAGCAGACAGT TCG‑3’, [0012]SpCYP2‑R:5’ ‑GCCTTGTGCTTCTCGGTCTCAT‑3’。 [0013]本发明的第三个目的是提供一种评价水产动物健康状态的病理检测试剂， 含有检 测拟穴青蟹生物标记 物CYP2基因表达量的试剂。 [0014]本发明从拟穴青蟹中克隆到拟穴青蟹生物标记物CYP2基因， 该基因在肝胰腺、 鳃、 肠、 血细胞、 心脏、 肌肉和胃组织中都有表达， 其中在心脏中表达量最高， 其次是在肝胰腺 中， 而在肠道中表达量最低， 病原菌副溶血弧菌刺激拟穴青蟹后， SpCYP2基因表达量显著上 调， 在重金属镉胁 迫下， SpCYP2基因表达量显著上调。 CYP2基因在 毒理学应用上可作为独特 的生物标志 物， 在评价水产动物健康状态具有重要的应用价 值。说　明　书 1/4 页 3 CN 114539376 A 3