(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210058335.3 (22)申请日 2022.01.19 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114085928 A (43)申请公布日 2022.02.25 (73)专利权人 广东和信健康科技有限公司 地址 510700 广东省广州市黄埔区瑞发路1 号1栋401房 (72)发明人 李小锋　李晨阳　高小龙　 (74)专利代理 机构 广州嘉权专利商标事务所有 限公司 4 4205 代理人 林德强 (51)Int.Cl. C12Q 1/70(2006.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12R 1/93(2006.01) (56)对比文件 CN 113943838 A,202 2.01.18 CN 113308574 A,2021.08.27 CN 113073150 A,2021.07.0 6CN 113846191 A,2021.12.28 CN 113774168 A,2021.12.10 CN 111304368 A,2020.0 6.19 CN 113913561 A,202 2.01.11 WO 2021204642 A1,2021.10.14 Metzger C MJA et al. .PCR performance in the SARS- CoV-2 Omicron variant of concern?. 《Swiss Medical We ekly》 .2021,(第 151期),表1， 图1-2. Ren SY et al. .Omicron variant (B.1.1.52 9) of SARS- CoV-2: Mutati on, infectivity, trans mission, and vac cine resistance. 《W orld J Cl in Cases》 .202 2,第10 卷(第1期),第1-1 1页. (续) 审查员 王胜佳 (54)发明名称 一种用于新型冠状病毒Omicron突变株分型 的快速检测体系 (57)摘要 本发明公开了一种用于新型冠状病毒 Omicron突变株分型的快速检测体系， 所述体系 中的引物 探针是基于双向ARMS  PCR技术设计， 靶 向Omicron突变株的6个突变位点进行检测， 对 Omicron突变株的检测准确度提高到近100%， 最 低检测限可低至2 00copies/mL。 具有很好的灵敏 性和特异性； 可在30分钟内完成整个流程， 操作 简单、 快速、 灵敏， 对硬件要 求低， 成本较低， 有利 于技术制备成试剂盒用于广泛推广。 并且将这种 检测体系做成冻干形态， 进一步提高检测灵敏 度。 为新型冠状病毒Omicron突变株的快速检测筛查提供有效的技 术手段， 具有重要意 义。 [转续页] 权利要求书2页 说明书20页 序列表3页 附图1页 CN 114085928 B 2022.04.26 CN 114085928 B (56)对比文件 Mills MG et al. .Rapid and Ac curate Identificati on of SARS- CoV-2 1 O micron Variants Usi ng Droplet Digital PCR (RT- ddPCR). 《ht tps://www.medrxiv.org/》 .202 2,第 1-25页.Gomes L et al. .Surveillance of SARS- CoV-2 variants of co ncern by identificati on of single nucleotide polymorphis ms in the spi ke protei n by a multiplex real-time PCR. 《J Viro l Methods》 .2021,(第3 00期),第1-4页.2/2 页 2[接上页] CN 114085928 B1.用于新型冠状病毒Omicron突变株分型检测的引物探针组合， 包括引物探针组A、 引 物探针组B和引物探针组C和新型 冠状病毒通用引物探针； 所述引物探针组A的序列如下 所示： F1： 5'‑acaaacttgtgcccttttCa‑3'； R1： 5'‑acacttaaaagtggaaaatTg‑3'； P1： 5'‑cgccaccagatttgcatctgt ttatg‑3'； 所述引物探针组B的序列如下 所示： F2： 5'‑ctgaaatctatca ggccggtGa‑3'； R2： 5'‑accaacaccattagtgggAc‑3'； P2： 5'‑gtaatggtgttgaaggttttaattgt‑3'； 所述引物探针组C的序列如下 所示： F3： 5'‑ctgtttaataggggctgaGt‑3'； R3： 5'‑tacgtgcccgccgaggagTc‑3'； P3： 5'‑atgagtgtgacatacccattggtgca‑3'； 所述新型冠状病毒通用引物探针的序列为： 引物F4： 5' ‑GGGGAACTTCTCCTGCTAGA AT‑3'； 引物R4： 5' ‑CAGACATTTTGCTCTCA AGCTG‑3'； 探针P4： 5' ‑TTGCTGCTGCT TGACAGAT T‑3'。 2.权利要求1所述引物探针组合在制备新冠病毒新型冠状病毒Omicron突变株检测产 品中的应用。 3.一种试剂盒， 其特 征在于， 包 含权利要求1所述的引物探针组合。 4.根据权利要求3所述的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒包括扩增反应液、 阳性对照 和稀释液； 所述扩增反应液包括Mg2+、 DNA聚合酶， MMLV反转录酶、 dNTP s、 新型冠状病毒通用 引物探针、 引物探针组A、 引物探针组B和引物探针组C 。 5.根据权利要求4所述的试剂盒， 其特征在于， 所述扩增反应液为冻干粉， 还包含冻干 保护液。 6.一种新型 冠状病毒O micron突变株分型的检测方法， 包 含以下步骤： （1） 提取待检样本的DNA； （2） 采用权利要求3～5任一项所述的试剂盒， 然后进行实时荧 光定量PCR扩增； （3） 收集 荧光信号， 通过荧 光信号判断是否存在突变； 该方法不用于疾病的诊断； 判断标准如下：权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114085928 B 3