(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210069991.3 (22)申请日 2022.01.21 (71)申请人 中国农业科 学院特产研究所 地址 130112 吉林省长 春市净月经济开发 区聚业大街 4899号 (72)发明人 王桂武　杨福合　周雅　郑军军　 刘琳玲　张禾垟　李浩东　 (74)专利代理 机构 北京超凡宏宇专利代理事务 所(特殊普通 合伙) 11463 代理人 王焕 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12Q 1/6869(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种与梅花鹿茸重性状相关的SNP分子标记 及其检测引物、 试剂盒和应用 (57)摘要 本发明提供了一种与梅花鹿茸重性状相关 的SNP分子标记及其检测引物、 试剂盒和应用， 涉 及分子遗传学技术领域。 所述SNP分子标记位于 MSRB3基因上， 在g.44455582位存在T/C碱基突 变， 该位点多态性与梅花鹿茸重性状具有显著相 关性。 本发明可利用对所述SNP位点的检测实现 对梅花鹿的早期预测和筛选， 可将高茸重与低茸 重梅花鹿区分开来， 可实现帮助选育高鹿茸产量 的梅花鹿。 权利要求书1页 说明书9页 序列表5页 附图9页 CN 114231644 A 2022.03.25 CN 114231644 A 1.一种与梅花鹿茸重性状相关的SNP分子标记， 其特征在于， 所述SNP分子标记位于 MSRB3基因上， 在g.4 4455582位存在T/ C碱基突变。 2.一种用于检测梅花鹿 茸重性状的引物， 其特征在于， 所述引物为用于扩增权利要求1 所述SNP分子标记的引物组合； 优选地， 所述引物组合包括PCR扩增引物和延伸引物， 所述PCR扩增引物的核苷酸序列 如SEQ ID No.22和SEQ ID No.23所示； 所述延伸引物的核苷酸序列如SEQ  ID No.24所示。 3.含有权利要求2所述引物的试剂盒。 4.根据权利 要求3所述的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒还包括DNA聚合酶和PCR反应 缓冲液。 5.一种SNP分型芯片， 其特 征在于， 所述SNP分型芯片包 含权利要求1所述SNP分子标记。 6.权利要求1所述的SNP分子标记在选 育或辅助选 育高茸重或低茸重梅 花鹿中的应用。 7.权利要求2所述的引物或权利要求3或4所述的试剂 盒在检测梅花鹿 茸重性状相关的 SNP分子标记中的应用， 其特征在于， 所述SNP分子标记位于MSRB3基因上， 在g.44455582位 存在T/C碱基突变。 8.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 所述应用包括： 使用权利要求2所述的引物 或权利要求3或4所述的试剂盒检测梅花鹿在所述SNP位点的基因型， 选择具有优势等位基 因型的梅 花鹿进行繁殖或选 育。 9.一种选 育或辅助选 育具有高鹿茸产量的梅 花鹿的方法， 其特 征在于， 所述方法包括： (a)提取待测梅 花鹿的基因 组DNA； (b)以所述基因组DNA为模板， 利用扩增所述SNP分子标记的特异性引 物进行PCR扩增， 获得含所述SNP位 点的PCR扩增片段； (c)通过所述PCR扩增片段进行测序， 确定所述PCR扩增产物的SNP位 点的基因型； (d)选择基因型为T T型的梅花鹿进行留种或配种。 10.根据权利要求9所述的方法， 其特征在于， 所述高鹿茸产量为产出的鹿茸重量具有 显著更高水平， 所述鹿茸产量优选为 二杠茸产量。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114231644 A 2一种与梅花鹿茸重性状相关的SNP分子标记及其检测引物、 试 剂盒和应用 技术领域 [0001]本发明涉及分子遗传学技术领域， 尤其是涉及一种与梅花鹿茸重性状相关的SNP 分子标记及其检测引物、 试剂盒和应用。 背景技术 [0002]甲硫氨酸亚砜还原酶B3(methionine  sulfoxide  reductase  B3,MSRB3)基因是 MSRB基因家族成员， 是一种氧化还原酶， 可特异性催化R ‑甲硫氨酸亚砜还原为甲硫氨酸 (Kwak GH等， 2017)。 MSRB3是一种多效基因， 在人体中可编码MSRB3A和MSRB3B两种类型的蛋 白， 前者位于内质网， 后者位于线粒体(Kim  HY等， 2004)。 MSRB3在衰老和应激耐受中起着关 键作用， 过表达人MSRB3基因的果蝇家系表现出更长的寿命， 也提高了其对氧化、 冷和热应 激的抵抗力(D.H.Lim等， 2012以及G.H.Kwak等2012)。 MSRB3基因通过p53 ‑p21和p27途径调 节细胞生长， 敲除该基因抑制小鼠胚胎成纤维细胞和人真皮成纤维细胞的增殖(Lee  E等， 2014)。 [0003]此外， MSRB 3基因还可影响耳朵的形状和大小、 听觉系统、 海马体的大小。 在关于畜 禽的研究中， 主要集中于MSRB3基因影响耳型性状。 GWAS结果表明MSRB3基因参与牛骨化和 脂肪组织发育过程的调节。 WU等发现MSRB3基因存在3个插入缺失(insertions  and  deletions,in dels)标记与我国黄牛生长性状显著相关。 目前该基因与梅花鹿相关性状研 究较少。 [0004]梅花鹿是最有价值的药用动 物之一， 其全身是宝， 而以鹿茸最具盛名。 鹿茸具有增 强免疫力、 改善性功能、 抵抗衰老等作用， 在中医临床方面起重要作用(杨洁等， 2021； Sui  Z 等， 2014)。 因其较高的药用价值和经济价值， 鹿茸产量受到了极大的关注。 随着分子生物 技 术的发展， 相关性状的分子标记已广泛应用于畜禽的遗传改良中， 极大提高了育种效率， 缩 短育种周期。 因此， 有必要继续研究和开发与鹿茸产量 性状相关的分子标记。 [0005]鉴于此， 特提出本发明。 发明内容 [0006]本发明的目的在于提供一种与梅花鹿茸重性状相关的SNP分子标记及其检测引 物、 试剂盒和应用。 本发明发现MSRB3基因上的一个SNP位点基因多态性与梅花鹿茸重性状 具有显著相关性。 本发明可利用对所述SNP位点的检测实现对梅花鹿的早期预测和筛选， 可 将高茸重与低茸重梅 花鹿区分开 来， 可实现帮助选 育高鹿茸产量的梅 花鹿。 [0007]为了实现本发明的上述目的， 特采用以下技 术方案： [0008]在第一方面， 本发明提供了一种与梅花鹿茸重性状相关的SNP分子标记， 所述SNP 分子标记位于 MSRB3基因上， 在g.4 4455582位存在T/ C碱基突变。 [0009]本发明以梅花鹿为研究对象， 应用直接测序法检测MSRB3基因的多态性， 通过 SNP分型技术分析基因型， 并与鲜茸重性状进行关联分析。 在 g.44455582说　明　书 1/9 页 3 CN 114231644 A 3