(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210075708.8 (22)申请日 2022.01.22 (71)申请人 中国科学院武汉植物园 地址 430000 湖北省武汉市东湖高新 技术 开发区九峰一路201号 (72)发明人 张燕君　王晶　梁琼　杨路路　 (74)专利代理 机构 武汉宇晨专利事务所(普通 合伙) 42001 代理人 龚莹莹 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 鉴定罂粟的SNP分子标记及应用 (57)摘要 本发明属于分子鉴定技术领域， 公开了鉴定 罂粟的SNP分子标记及应用。 申请人提供了两个 可单独进行鉴定的SNP位点， 根据特异性SNP位点 碱基类型来判断待测材料是否为罂粟， 若待测物 种在位点SNP1为 G/G纯和位点则为罂粟， 若 为A/A 纯和位点或C/C纯和位点则为罂粟属其他物种； 若待测物种在位点SNP2为C/C纯和位点则为罂 粟， 若为A/A纯和位点或A /C杂合位点则为罂粟属 其他物种。 与现有技术相比， 本发明不仅操作简 单， 而且在降低鉴定成本的基础上， 还有效提高 了鉴别的准确性和效率。 权利要求书1页 说明书5页 序列表2页 附图3页 CN 114292952 A 2022.04.08 CN 114292952 A 1.检测罂粟基因组NC_029434.1_19785碱基 的试剂在罂粟鉴别中的应用， 所述的罂粟 的基因组版本是Papaver  somniferum (assembly ASM357369v1)。 2.根据权利要求1所述的应用， 所述的试剂为引物。 3.根据权利要求2所述的应用， 所述的引物为SNP2F： CAGTACCGCCTGTGAAGACT和SNP2R： AATGGGATGATGACAGA ACG。 4.根据权利要求1所述的应用， 所述的试剂包括检测罂粟基因组NC_039359.1_ 95133221碱基的试剂。 5.根据权利要求4所述的应用， 所述的试剂为引物： SNP1F： GTACGATACCCTAGGCAGACATTC 和SNP1R： CAGTTCCAGCTATTTTAGATCG。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114292952 A 2鉴定罂粟的SNP分子标记及应用 技术领域 [0001]本发明涉及分子鉴定技 术领域， 具体涉及鉴定 罂粟的SNP分子标记及应用。 背景技术 [0002]罂粟(Papav er somniferum  L.)为罂粟科(Papav eraceae)罂粟属(Papaver  L.)一 年生草本植物， 与大麻、 古柯一同被联合国禁毒公约列为世界三大毒品原植物。 罂粟属约 100种,我国有7种， 分别为罂粟(P.somniferumL.)、 鬼罂粟(PapaverorientaleL.)、 虞美人 (PapaverrhoeasL.)、 黑环罂粟(PapaverpavoninumFisch.et  Mey.)、 野罂粟(Papaver   nudic auleL .) 、 灰毛罂粟 (PapavercanescensA .Tolm .) 、 长白山罂粟 (PapaverradicatumRottb.)。 罂粟属植物花型丰富， 花色艳丽， 常被用作观赏植物栽培。 由 于罂粟与同属植物虞美人、 鬼罂粟等在花型、 颜色及果 实上极为相似， 为毒品原 植物罂粟的 鉴定及相关案件的侦破带来困难。 在法庭科学中， 虽可通过化学分析法来鉴定罂粟， 但它受 到植物生长期的限制， 且化学检测周期长， 操作复杂， 对仪器设备要求较高等， 增加了公安 机关对罂粟案件定性与侦破的难度。 [0003]近些年， EST ‑SSR标记得到开发并应用于罂 粟的鉴定。 2018 年徐小玉等应用自行设 计的1对罂粟种属特异 性EST‑SSR引物对案件中疑似罂粟籽的检材进行鉴定， 为案件的定性 提供了物证依据。 2011年， Lee等开发了1对 能够较好的应用于本土罂粟与其近缘种的鉴的 EST‑SSR标记引物。 2016年， 裴黎等人公开了一种罂粟种属特异性遗传标记检测体系， 其包 含4对鉴定罂粟的引物对组， 可同时扩增罂粟4个STR基因座。 2018年， 杨志云通过4对 特异性 引物实现了罂粟SSR分子标记鉴定。 2019年， 本研 究团队开发了一组包含有3对特异性引物 的引物组， 可对罂粟及其近缘物种进行有效鉴定。 然而， 关于单核苷酸多态性(single   nucleotide  polymorphis ms,SNP)分子标记在罂粟鉴定方面的报道少之又少。 [0004]SNP主要是指由于单个核苷酸的变异而引起基因组水平上的D NA序列多态性。 与其 它分子标记相比， SNP具有数目多、 分布广、 遗传稳定、 具有代表性等优点， 是目前使用较为 广泛的分子标记之一。 随着测序技术的迅猛发展， 罂粟基因组序列得到公布， 扩大了SNP分 子标记的检测范围， 为SNP标记在罂粟属的研究中应用奠定了基础。 由于罂粟在种内存在丰 富的遗传变异， 因此罂粟的鉴定既要表现其种间的差异 性又要兼顾 其种内的保守性。 SNP则 可以精确到单个核苷 酸的识别， 通过DNA序列间的细微差异区分不同个体， 除此之外它还具 有分析速度快、 易建立标准化操作， 非常适合物种的鉴定， 目前已被广泛应用到法庭科学实 践中进行个 体识别和亲子鉴定 。 发明内容 [0005]本发明的目的是提供鉴定 罂粟的SNP分子标记。 [0006]本发明的另一个目的是提供S NP分子标记在鉴定罂 粟中的应用。 该方法在简 易性、 高效性的基础上， 提高了毒品原植物罂粟鉴定的准确性。 [0007]为了达到上述目的， 本发明提供了如下的技 术方案：说　明　书 1/5 页 3 CN 114292952 A 3