(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210078676.7 (22)申请日 2022.01.24 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114107554 A (43)申请公布日 2022.03.01 (73)专利权人 华智生物技 术有限公司 地址 410125 湖南省长 沙市芙蓉区合平路 618号 (72)发明人 李乐　贾佩陇　聂超南　田冰川　 唐宜　唐顺学　 (74)专利代理 机构 长沙智路知识产权代理事务 所(普通合伙) 4324 4 代理人 陈建国 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01)C12N 15/11(2006.01) (56)对比文件 CN 112626257 A,2021.04.09 WO 9931964 A1,19 99.07.01 CN 112813186 A,2021.0 5.18 G. Ramakrishna.Gen ome-wide identificati on and characterizati on of InDels and SNPs i n Glycine max and Glycine soja for co ntrasting seed permeabi lity traits. 《BM C Plant Bi ology 》 .2018,第1-15页. 佚名.GenBan k assembly ac cession: GCA_ 000004515.3. 《NCBI》 .2015,第1- 3页. 审查员 熊壮壮 (54)发明名称 用于检测大豆品种纯度的引物组及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种用于检测大豆品种纯度 的引物组及其应用， 所述引物组基于20个用于检 测大豆品种纯度的SNP标记进行设计和合成， 可 用于检测大豆品种和遗传材料的纯度， 具有广泛 的应用普适性， 具有共显性标记， 特异性、 灵敏度 和分辨力高。 该引物组的使用不受环境条件影 响， 能够使用种子或任何类型的植物组织， 检测 结果准确、 重复性和稳定性良好， 而且技术简单、 易于自动化， 检测通量高， 速度快； 单位数据点检 测成本低， 不同检测实验室的数据结果可以相互 比较验证， 数据具有 普适的可比性。 权利要求书3页 说明书9页 序列表10页 附图1页 CN 114107554 B 2022.04.15 CN 114107554 B 1.用于检测大豆品种纯度的一套引物组， 其特征在于， 所述一套引物组用于检测大豆 DNA中的SNP标记， 所述SNP标记为SY01、 SY02、 SY03、 SY04、 SY05、 SY06、 SY07、 SY08、 SY09、 SY10、 SY11、 SY12、 SY13、 SY14、 SY15、 SY16、 SY17、 SY18、 SY19和 SY20； 所述引物组由如下引物 组所组成： 用于检测SY01的第一引物组、 用于检测SY02的第二引物组、 用于检测SY  03的第 三引物组、 用于检测SY  04的第四引物组、 用于检测SY  05的第五引物组、 用于检测SY  06的 第六引物组、 用于检测SY  07的第七引物组、 用于检测SY  08的第八引物组、 用于检测SY  09 的第九引物组、 用于检测S Y 10的第十引物组、 用于检测SY  11的第十一引物组、 用于检测SY   12的第十二引物组、 用于检测SY  13的第十三引物组、 用于检测S Y 14的第十四引物组、 用于 检测SY 15的第十五引物组、 用于检测SY  16的第十六引物组、 用于检测SY  17的第十七引物 组、 用于检测SY  18的第十八引物组、 用于检测SY  19的第十九引物组和用于检测SY  20的第 二十引物组； 每个引物组独立地包括不同的等位基因特异性引物X和Y， 以及通用引物C， 其 中： 所述第一引物组的两条等位基因特异性引物分别包括如SEQ  ID NO.1和SEQ  ID NO.2 所示的核苷酸序列， 通用引物包括如SEQ  ID NO.3所示的核苷酸序列； 所述SY01为碱基T或 者G， 位于大豆1号染色体， 位置为大豆参 考基因组Glycine_max_v2.0的第101 1674位； 所述第二引物组的两条等位基因特异性引物分别包括如SEQ  ID NO.4和SEQ  ID NO.5 所示的核苷酸序列， 通用引物包括如SEQ  ID NO.6所示的核苷酸序列； 所述SY02为碱基T或 者G， 位于大豆2号染色体， 位置为大豆参 考基因组Glycine_max_v2.0的第475 33197位； 所述第三引物组的两条等位基因特异性引物分别包括如SEQ  ID NO.7和SEQ  ID NO.8 所示的核苷酸序列， 通用引物包括如SEQ  ID NO.9所示的核苷酸序列； 所述SY03为碱基T或 者C， 位于大豆 3号染色体， 位置为大豆参 考基因组Glycine_max_v2.0的第3712 9435位； 所述第四引物组的两条等位基因特异性引物分别包括如SEQ  ID NO.10和SEQ  ID  NO.11所示的核苷酸序列， 通用引物包括如SEQ  ID NO.12所示的核苷 酸序列； 所述SY04为碱 基T或者C， 位于大豆4号染色体， 位置为大豆参考基因组Glycine_max_v2.0的第42280188 位； 所述第五引物组的两条等位基因特异性引物分别包括如SEQ  ID NO.13和SEQ  ID  NO.14所示的核苷酸序列， 通用引物包括如SEQ  ID NO.15所示的核苷 酸序列； 所述SY05为碱 基T或者C， 位于大豆5号染色体， 位置为大豆参考基因组Glycine_max_v2.0的第38950372 位； 所述第六引物组的两条等位基因特异性引物分别包括如SEQ  ID NO.16和SEQ  ID  NO.17所示的核苷酸序列， 通用引物包括如SEQ  ID NO.18所示的核苷 酸序列； 所述SY06为碱 基G或者A， 位于大豆6号染色体， 位置为大豆参考基因组Glycine_max_v2.0的第46905460 位； 所述第七引物组的两条等位基因特异性引物分别包括如SEQ  ID NO.19和SEQ  ID  NO.20所示的核苷酸序列， 通用引物包括如SEQ  ID NO.21所示的核苷 酸序列； 所述SY07为碱 基G或者A， 位于大豆7号染色体， 位置为大豆参考基因组Glycine_max_v2.0的第15654480 位； 所述第八引物组的两条等位基因特异性引物分别包括如SEQ  ID NO.22和SEQ  ID  NO.23所示的核苷酸序列， 通用引物包括如SEQ  ID NO.24所示的核苷 酸序列； 所述SY08为碱权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 114107554 B 2基T或者G， 位于大豆8号染色体， 位置为大豆参 考基因组Glycine_max_v2.0的第217 7033位； 所述第九引物组的两条等位基因特异性引物分别包括如SEQ  ID NO.25和SEQ  ID  NO.26所示的核苷酸序列， 通用引物包括如SEQ  ID NO.27所示的核苷 酸序列； 所述SY09为碱 基C或者A， 位于大豆9号染色体， 位置为大豆参 考基因组Glycine_max_v2.0的第272 9925位； 所述第十引物组的两条等位基因特异性引物分别包括如SEQ  ID NO.28和SEQ  ID  NO.29所示的核苷酸序列， 通用引物包括如SEQ  ID NO.30所示的核苷酸序列； 所述SY010为 碱基C或者T， 位于大豆10号染色体， 位置为大豆参考基因组Glycine_max_v2.0的第 44161160位； 所述第十一引物组的两条等位基因特异性引物分别包括如SEQ  ID NO.31和SEQ  ID  NO.32所示的核苷酸序列， 通用引物包括如SEQ  ID NO.33所示的核苷 酸序列； 所述SY11为碱 基T或者C， 位于大豆11号染色体， 位置为大豆参考基因组Glycine_max_v2.0的第4147983 位； 所述第十二引物组的两条等位基因特异性引物分别包括如SEQ  ID NO.34和SEQ  ID  NO.35所示的核苷酸序列， 通用引物包括如SEQ  ID NO.36所示的核苷 酸序列； 所述SY12标记 为碱基A或者G， 位于大豆12号染色体， 位置为大豆参考基因组Glycine_max_v2.0的第 34908863位； 所述第十三引物组的两条等位基因特异性引物分别包括如SEQ  ID NO.37和SEQ  ID  NO.38所示的核苷酸序列， 通用引物包括如SEQ  ID NO.39所示的核苷 酸序列； 所述SY13标记 为碱基C或者T， 位于大豆13号染色体， 位置为大豆参考基因组Glycine_max_v2.0的第 6652918位； 所述第十四引物组的两条等位基因特异性引物分别包括如SEQ  ID NO.40和SEQ  ID  NO.41所示的核苷酸序列， 通用引物包括如SEQ  ID NO.42所示的核苷 酸序列； 所述SY14标记 为碱基A或者G， 位于大豆14号染色体， 位置为大豆参考基因组Glycine_max_v2.0的第 1033407位； 所述第十五引物组的两条等位基因特异性