(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210086568.4 (22)申请日 2022.01.25 (71)申请人 中山大学附属第一医院 地址 510080 广东省广州市越秀区中山 二 路58号 (72)发明人 谢显彪　吕东明　邹雨桐　廖衍　 陈韦东　 (74)专利代理 机构 广州嘉权专利商标事务所有 限公司 4 4205 专利代理师 蒋斌 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/11(2006.01) G01N 33/574(2006.01) G01N 33/573(2006.01)A61K 45/00(2006.01) A61K 31/277(2006.01) A61K 31/7088(2006.01) A61K 31/713(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) C12N 15/113(2010.01) (54)发明名称 FTO在诊治骨肉瘤中的应用 (57)摘要 本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及 FTO在诊治骨 肉瘤中的应用。 本发明首次公开了 FTO和/或DA CT1在骨肉瘤诊断或预后评估中的应 用， 通过FTO和/或DA CT1与总生存率、 无肺转移生 存曲线图以及FTO和/或DA CT1的5年生存率ROC曲 线图可知： DACT1和/或FTO可作为骨肉瘤诊断或 预后评估的标志物； 首次公开了FTO抑制剂在防 治骨肉瘤中的应用， 通过FTO抑制剂靶向下调 FTO、 降解FTO、 抑制 FTO活性， 可以抑制影响骨肉 瘤细胞的增殖、 转移和侵袭能力， 并且促进其凋 亡， 最终改善或治 疗骨肉瘤。 权利要求书2页 说明书18页 序列表15页 附图11页 CN 114561466 A 2022.05.31 CN 114561466 A 1.(1)～(3)中任一种在制备骨肉瘤诊断或预后评估的产品中的应用； (1)检测FTO的物质； (2)检测DACT1的物质； (3)检测FTO的物质和检测DACT1的物质。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特 征在于： 所述检测FTO的物质为在基因水平和/或蛋白质水平上检测FTO的物质； 所述检测DACT1的物质为在基因水平和/或蛋白质水平上检测DACT1的物质； 优选地， 所述物质是用于选自下组的一种或多种检测技术或方法中的物质： 免疫组织 化学法、 Western印迹法、 N orthern印迹法、 PCR、 生物芯片法； 优选地， 所述检测FTO的物质选自： FTO抗体； 和/或 FTO特异性的PCR引物， 所述引物的序列如SEQ  ID NO.57、 SEQ  ID NO.58所示； 优选地， 所述检测DACT1的物质选自： DACT1抗体； 和/或 DACT1特异性的PCR引物， 所述引物的序列如SEQ  ID NO.59、 SEQ  ID NO.60所示。 3.FTO抑制剂在(4)～(8)中任一种中的应用； (4)制备防治骨肉瘤的药物； (5)制备抑制骨肉瘤 细胞增殖的试剂； (6)制备抑制骨肉瘤 细胞迁移的试剂； (7)制备抑制骨肉瘤 细胞侵袭的试剂； (8)制备促进骨肉瘤 细胞凋亡的试剂。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特 征在于： 所述FTO抑制剂为抑制FTO活性的物质、 降解FTO的物质和降低FTO表达水平的物质中的 至少一种； 优选地， 所述抑制FTO活性的物质为恩他 卡朋或其药 学上可接受的盐； 优选地， 所述降低FTO表达水平的物质为(9)～(1 1)中至少一种： (9)靶向FTO的siRNA、 dsRNA、 miRNA、 核酶 或shRNA； (10)编码(9)的核酸分子； (11)包含(10)的表达盒、 载体或转基因细胞系。 5.根据权利要求 4所述的应用， 其特 征在于： 所述FTO抑制剂为(12)～(18)中至少一种： (12)恩他 卡朋或其药 学上可接受的盐； (13)靶向FTO的siRNA； (14)编码(13)的核酸分子； (15)包含(14)的表达盒、 载体或转基因细胞系； (16)靶向FTO的shRNA； (17)编码(16)的核酸分子； (18)包含(17)的表达盒、 载体或转基因细胞系； 优选地， 所述siRNA为反向互补的双链RNA， 其中 的一条链的序列如SEQ  ID NO.21或SEQ   ID NO.22所示； 优选地， 所述shRNA的序列为a1)或a2)：权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114561466 A 2a1)所述shRNA的正义链的序列如SEQ  ID NO.67所示， 所述shRNA的反义链的序列如SEQ   ID NO.68所示； a2)所述shRNA的正义链的序列如SEQ  ID NO.69所示， 所述shRNA的反义链的序列如SEQ   ID NO.70所示。 6.一种RNA， 为siRNA和/或shRNA； 所述siRNA为反向互补的双链RNA， 其中的一条链的序列如SEQ  ID NO.1或SEQ  IDNO.2 所示； 所述shRNA为a1)或a2)： a1)所述shRNA的正义链的序列如SEQ  ID NO.67所示， 所述shRNA的反义链的序列如SEQ   ID NO.68所示； a2)所述shRNA的正义链的序列如SEQ  ID NO.69所示， 所述shRNA的反义链的序列如SEQ   ID NO.70所示。 7.与权利要求6所述的RNA相关的生物材 料， 其特征在于， 所述生物材料为： (I)编码权利要求6所述的RNA的核酸分子； 或 (II)包含(I)的表达盒、 载体或转基因细胞系。 8.一种诊断产品， 包括： (1)～(3)中任一种： (1)检测FTO的物质； (2)检测DACT1的物质； (3)检测FTO的物质和检测DACT1的物质； 所述检测FTO的物质选自： FTO抗体； 和/或 FTO特异性的PCR引物， 所述引物的序列如SEQ  ID NO.57、 SEQ  ID NO.58所示； 所述检测DACT1的物质选自： DACT1抗体； 和/或 DACT1特异性的PCR引物， 所述引物的序列如SEQ  ID NO.59、 SEQ  ID NO.60所示。 9.一种产品， 包括： (19)～(20)中的至少一种； 或 (21)以及(19)～(20)中的至少一种： (19)权利要求6所述的RNA； (20)权利要求7 所述的生物材 料； (21)恩他 卡朋或其药 学上可接受的盐。 10.FTO和/或DACT1作为靶点在开发防治骨肉瘤的药物中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114561466 A 3