(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210084110.5 (22)申请日 2022.01.25 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114107555 A (43)申请公布日 2022.03.01 (73)专利权人 华智生物技 术有限公司 地址 410000 湖南省长 沙市芙蓉区合平路 618号 (72)发明人 李乐　田冰川　彭佩　唐顺学　 (74)专利代理 机构 广州嘉权专利商标事务所有 限公司 4 4205 代理人 肖云 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12N 15/11(2006.01)A01H 1/04(2006.01) 审查员 艾超仁 (54)发明名称 一种检测小麦品种纯度的SNP分子标记组合 及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种检测小麦品种纯度的SNP 分子标记组合及其应用。 本发明通过筛选出一套 共21个高质量和高多态性的SNP标记， 可用于来 源不同的小麦品种纯度的精准检测， 具有广泛的 应用普适性； 标记为共显性标记， 特异性、 灵敏度 和分辨力高； 标记不受环境条件影响， 能够使用 种子或任何类型的植物组织， 检测结果准确、 重 复性和稳定性 好。 权利要求书3页 说明书23页 序列表1页 附图2页 CN 114107555 B 2022.04.29 CN 114107555 B 1.一种检测小麦品种纯度的SNP分子标记 组合在鉴定或辅助鉴定小麦品种纯度中的应 用， 其特征在于， 所述SNP分子标记组合由以下SNP分子标记组成： 第一SNP分子标记， 所述第一SNP分子标记位于小麦参考基因组第1A染色体第 534265581位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为G或A； 第二SNP分子标记， 所述第二SNP分子标记位于小麦参考基因组第1B染色体第 643102010位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为A或C； 第三SNP分子标记， 所述第三SNP分子标记位于小麦参考基因组第1D染色体第3958512 位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为G或A； 第四SNP分子标记， 所述第四SNP分子标记位于小麦参考基因组第2A染色体第16865489 位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为C或T； 第五SNP分子标记， 所述第五SNP分子标记位于小麦参考基因组第2B染色体第12076633 位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为T或G； 第六SNP分子标记， 所述第六SNP分子标记位于小麦参考基因组第2D染色体第69251621 位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为A或G； 第七SNP分子标记， 所述第七SNP分子标记位于小麦参考基因组第 3A染色体第61219689 位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为A或C； 第八SNP分子标记， 所述第八SNP分子标记位于小麦参考基因组第3B染色体第 749024987位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为G或A； 第九SNP分子标记， 所述第九SNP分子标记位于小麦参考基因组第3D染色体第 578414376位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为T或C； 第十SNP分子标记， 所述第十SNP分子标记位于小麦参考基因组第4A染色体第 715512695位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为T或C； 第十一SNP分子标记， 所述第十一SNP分子标记位于小麦参考基因组第4B染色体第 159349087位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为G或A； 第十二SNP分子标记， 所述第十二SNP分子标记位于小麦参考基因组第4D染色体第 456087457位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为C或T； 第十三SNP分子标记， 所述第十三SNP分子标记位于小麦参考基因组第5A染色体第 533072137位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为G或A； 第十四SNP分子标记， 所述第十四SNP分子标记位于小麦参考基因组第5B染色体第 601419406位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为T或C； 第十五SNP分子标记， 所述十五SNP分子标记位于小麦参考基因组第5D染色体第 562098034位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为A或G； 第十六SNP分子标记， 所述第十六SNP分子标记位于小麦参考基因组第6A染色体第 595564056位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为T或C； 第十七SNP分子标记， 所述第十七SNP分子标记位于小麦参考基因组第6B染色体第 704974282位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为C或T； 第十八SNP分子标记， 所述第十八SNP分子标记位于小麦参考基因组第6D染色体第 454587758位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为C或T； 第十九SNP分子标记， 所述第十九SNP分子标记位于小麦参考基因组第7A染色体第权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 114107555 B 254723172位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为G或A； 第二十SNP分子标记， 所述第二十SNP分子标记位于小麦参考基因组第7B染色体第 706809043位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为C或T； 第二十一SNP 分子标记， 所述第二十一SNP 分子标记位于小麦参考基因组第7D染色体第 629330949位核苷酸， 该位 点的核苷酸碱基为G或A； 其中， 所述小麦参考基因组为小麦Triticum  aestivum  IWGSC RefSeq v1.0版本参考 基因组。 2.用于扩增如权利要求1中所述的检测小麦品种纯度的SNP分子标记组合的引物组。 3.根据权利要求2所述的引物 组， 其特征在于， 所述引物 组均独立地包括两条特异性引 物和1条通用引物， 所述两条 特异性引物连接有不同的荧 光基团标签序列。 4.根据权利要求2所述的引物组， 其特征在于， 所述引物组包括： 第一SNP引物组， 用于 扩增所述第一SNP分子标记， 包括核苷酸序列如SEQ  ID NO.1和SEQ  ID NO.2所示的特异性 引物， 还包括核苷酸序列如SEQ  ID NO.3所示的通用引物； 第二SNP引物组， 用于扩增所述第二SNP分子标记， 包括如SEQ  ID NO.4和SEQ  ID NO.5 所示的特异性引物核苷酸序列， 还 包括如SEQ  ID NO.6所示的通用引物核苷酸序列； 第三SNP引物组， 用于扩增所述第三SNP分子标记， 包括如SEQ  ID NO.7和SEQ  ID NO.8 所示的特异性引物核苷酸序列， 还 包括如SEQ  ID NO.9所示的通用引物核苷酸序列； 第四SNP引物组， 用于扩增所述第四SNP分子标记， 包括如SEQ  ID NO.10和SEQ  ID  NO.11所示的特异性引物核苷酸序列， 还 包括如SEQ  ID NO.12所示的通用引物核苷酸序列； 第五SNP引物组， 用于扩增所述第五SNP分子标记， 包括如SEQ  ID NO.13和SEQ  ID  NO.14所示的特异性引物核苷酸序列， 还 包括如SEQ  ID NO.15所示的通用引物核苷酸序列； 第六SNP引物组， 用于扩增所述第六SNP分子标记， 包括如SEQ  ID NO.16和SEQ  ID  NO.17所示的特异性引物核苷酸序列， 还 包括如SEQ  ID NO.18所示的通用引物核苷酸序列； 第七SNP引物组， 用于扩增所述第七SNP分子标记， 包括如SEQ  ID NO.19和SEQ  ID  NO.20所示的特异性引物核苷酸序列， 还 包括如SEQ  ID NO.21所示的通用引物核苷酸序列； 第八SNP引物组， 用于扩增所述第八SNP分子标记， 包括如SEQ  ID NO.22和SEQ  ID  NO.23所示的特异性引物核苷酸序列， 还 包括如SEQ  ID NO.24所示的通用引物核苷酸序列； 第九SNP引物组， 用于扩增所述第九SNP分子标记， 包括如SEQ  ID NO.25和SEQ  ID  NO.26所示的特异性引物核苷酸序列， 还 包括如SEQ  ID NO.27所示的通用引物核苷酸序列； 第十SNP引物组， 用于扩增所述第十SNP分子标记， 包括如SEQ  ID NO.28和SEQ  ID  NO.29所示的特异性引物核苷酸序列， 还 包括如SEQ  ID NO.30所示的通用引物核苷酸序列； 第十一SNP引物组， 用于扩增所述第十一SNP分子标记， 包括如SEQ  ID NO.31和SEQ  ID  NO.32所示的特异性引物核苷酸序列， 还 包括如SEQ  ID NO.33所示的通用引物核苷酸序列； 第十二SNP引物组， 用于扩增所述第十二SNP分子标记， 包括如SEQ  ID NO.34和SEQ  ID  NO.35所示的特异性引物核苷酸序列， 还 包括如SEQ  ID NO.36所示的通用引物核苷酸序列； 第十三SNP引物组， 用于扩增所述第十三SNP分子标记， 包括如SEQ  ID NO.37和SEQ  ID  NO.38所示的特异性引物核苷酸序列， 还 包括如SEQ  ID NO.39所示的通用引物核苷酸序列； 第十四SNP引物组， 用于扩增所述第十四SNP分子标记， 包括如SEQ  ID NO.40和SEQ  ID  NO.41所示的特异性引物核苷酸序列， 还 包括如SEQ  ID NO.42所示的通用引物核苷酸序列；权　利　要　求　书 2/3 页 3 CN 114107555 B 3