(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210090937.7 (22)申请日 2022.01.25 (71)申请人 广州盛安医学检验 有限公司 地址 510663 广东省广州市黄埔区天丰路8 号J4栋230房,J4栋231房,J4栋2 32房, J4栋233房,J4栋234房 (72)发明人 韩凯斌　陈佳　朱丽叶　 (74)专利代理 机构 广州三环 专利商标代理有限 公司 44202 代理人 薛梦 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 基于一代测序平台检测新生儿遗传病基因 的引物库组合、 试剂盒和方法 (57)摘要 本发明涉及基因检测技术领域， 具体公开了 一种基于一代测序平台检测新生儿遗传病基因 的引物库组合、 试剂盒和方法。 本发明采用第一 代测序技术， 其中涉及120个基因及近千个不同 位点的致病性突变， 本发明可以根据需求， 随机 进行不同的基因检测验证， 选择所需基因位点的 引物组而无需进行相关引物设计， 以及后续筛 选， 可以两步PCR， 纯化后直接进行测序， 可以一 次性进行96个样本检测， 很 大程度上简化了检测 过程， 降低了 检测成本， 准确率较高。 权利要求书6页 说明书14页 序列表38页 附图4页 CN 114410771 A 2022.04.29 CN 114410771 A 1.一种基于一代测序平台检测新生儿遗传病基因的引物库组合， 其特征在于， 包括以 下引物： 1)针对UGT1A1基因(c.211G>A)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:1所示的正向引 物和SEQ ID NO:2所示的反向引物； 2)针对GJB2基因(c.109G>A)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:3所示的正向引物 和SEQ ID NO:4所示的反向引物； 3)针对GUSB基因(c.104C>A)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:225所示的正向引 物和SEQ ID NO:226所示的反向引物； 4)针对SLC26A4基因(c.919 ‑2A>G)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:13所示的正 向引物和SEQ  ID NO:14所示的反向引物； 5)针对ABCG5基因(c.904+1G>A)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:51所示的正向 引物和SEQ  ID NO:52所示的反向引物； 6)针对LDLR基因(c.1747C>T)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:37所示的正向引 物和SEQ ID NO:38所示的反向引物； 7)针对SLC26A4基 因(c.1692dupA)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:131所示的正 向引物和SEQ  ID NO:132所示的反向引物； 8)针对GALT基 因(c.821 ‑7A>G)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:93所示的正向引 物和SEQ ID NO:94所示的反向引物。 2.如权利 要求1所述的引物库组合， 其特征在于， 所述新生儿遗传病基因还包括ABCD4、 ABCG8、 ACAD8、 ACADM、 ACADS、 ACADSB、 ACADVL、 ACAT1、 ACSF3、 ADA、 AGL、 AHCY、 ALDH7A1、 ALDOB、 APOB、 ARG1、 ARSA、 ARSB、 ASL、 ASS1、 ATP7A、 ATP7B、 AUH、 BCKDHA、 BCKDHB、 BTD、 CBS、 CPS1、 CPT1A、 CPT2、 CYP11B1、 DBT、 DDC、 DLD、 ETFA、 ETFB、 ETFDH、 MUT、 ETHE1、 F9、 FAH、 G6PC、 G6PD、 GAA、 GALC、 GALE、 GALK1、 GALNS、 GAMT、 GBA、 GCDH、 GCH1、 GJB3、 GLA、 GLB1、 GLDC、 GNMT、 GNPTAB、 HADHA、 HADHB、 HBB、 HEXA、 HLCS、 HMGCL、 HPD、 HSD17B10、 IDS、 IDUA、 IVD、 L2HGDH、 LDLR、 LMBRD1、 MAT1A、 MCCC1、 MCCC2、 MMAA、 MMAB、 MMACHC、 MMADHC、 MTHFR、 MT R、 MT‑RNR1、 MTRR、 NAGLU、 NAGS、 NPC1、 NPC2、 OTC、 PAH、 PC、 PCCA、 PCCB、 PCSK9、 PHGDH、 PHKA2、 PNPO、 PRODH、 PTS、 PYGL、 QDPR、 SGSH、 SLC10A1、 SLC12A3、 SLC22A5、 SLC25A13、 SLC25A15、 SLC25A20、 SLC37A4、 SLC6A8、 SMPD1、 SPR、 SUCLG1、 TAT、 TH中的至少一种。 3.如权利要求2所述的引物库组合， 其特 征在于， 所述引物库组合还 包括以下引物： 针对SLC10A1基 因(c.800C>T)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:5所示的正向引物 和SEQ ID NO:6所示的反向引物； 针对GALC基因(c.1901T>C)多态性位点的检测引物： 如SEQ   ID NO:7所示的正向引物和SEQ  ID NO:8所示的反向引物； 针对SLC25A13基因(c.852_ 855delTATG)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:9所示的正向引物和SEQ  ID NO:10所示 的反向引物； 针对PRODH基因(c.1322T>C)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:11所示的 正向引物和SEQ  ID NO:12所示的反向引物； 针对SLC22A5基因(c.1400C>G)多态性位点的检 测引物： 如SEQ  ID NO:15所示的正向引物和SEQ  ID NO:16所示的反 向引物； 针对SLC25A20 基因(c.199 ‑10T>G)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:17所示的正向引物和SEQ  ID  NO:18所示的反向引物； 针对ACADSB基因(c.1165A>G)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID  NO:19所示的正向引物和SEQ  ID NO:20所示的反向引物； 针对ATP7B基因(c.2755C>G)多态权　利　要　求　书 1/6 页 2 CN 114410771 A 2性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:21所示的正向引物和SEQ  ID NO:22所示的反向引物； 针 对G6PD基因(c.1478G>A)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:23所示的正向引物和SEQ   ID NO:24所示的反向引物； 针对PAH基因(c.1174T>A)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID  NO:25所示的正向引物和SEQ  ID NO:26所示的反向引物； 针对GAA 基因(c.752C >T)多态性位 点的检测引物： 如SEQ  ID NO:27所示的正向引物和SEQ  ID NO:28所示的反向引物； 针对 ACADS基因(c.1031A>G)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:29所示的正向引物和SEQ  ID  NO:30所示的反 向引物； 针对PTS基因(c.259C>T)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:31 所示的正向引物和SEQ  ID NO:32所示的反向引物； 针对MMACHC基因(c.609G>A)多态性位点 的检测引物： 如SEQ  ID NO:33所示的正向引物和SEQ  ID NO:34所示的反向引物； 针对MT ‑ RNR1基因(m.1555A>G)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:35所示的正向引物和SEQ  ID  NO:36所示的反向引物； 针对APOB基因(c.10579 C>T)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO: 39所示的正向引物和SEQ  ID NO:40所示的反 向引物； 针对HLCS基因(c.1522C>T)多态性位 点的检测引物： 如SEQ  ID NO:41所示的正向引物和SEQ  ID NO:42所示的反向引物； 针对 GJB3基因(c.538C>T)多态性位点的检测引 物： 如SEQ  ID NO:43所示的正向引物和SEQ  ID  NO:44所示的反向引物； 针对MUT基因(c.1663G>A)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:45 所示的正向引物和SEQ  ID NO:46所示的反 向引物； 针对ETFDH基因(c.250G>A)多态性位点 的检测引物： 如SEQ  ID NO:47所示的正向引物和SEQ  ID NO:48所示的反向引物； 针对ALDOB 基因(c.1013C>T)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:49所示的正向引物和SEQ  ID NO: 50所示的反向引物； 针对GCDH基因(c.1244 ‑2A>C)多态性位点的检测引物： 如SEQ  ID NO:53 所示的正向引物和SEQ  ID NO:54所示的反向引物； 针对GBA基因(c.1448T>C)多态性位点的 检测引物： 如SEQ  ID NO:55所示的正向引物和SEQ  ID