(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210134182.6 (22)申请日 2022.02.14 (71)申请人 江苏科技大学 地址 212008 江苏省镇江市京口区梦溪路2 号 (72)发明人 李刚　梁帅　徐安英　钱荷英　 刘明珠　 (74)专利代理 机构 南京苏高专利商标事务所 (普通合伙) 32204 专利代理师 丁静静 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 蓖麻蚕SSR分子标记及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种蓖麻蚕SSR分子标记及其 应用， 属于分子生物学和蚕品种鉴别技术领域。 本发明通过分析蓖麻蚕基因组序列获得了基因 组SSR分子标记位点信息， 并设计合成了15对扩 增效率高、 多态性丰富的SSR引物 。 以20份蓖麻蚕 种质为材料构建了蓖麻蚕SSR指纹图谱。 根据本 发明建立的方法， 利用PCR扩增和电泳检测技术 即可完成SSR标记的检测， 可用于蓖麻蚕种质资 源的鉴定， 在DNA水平揭示各品系的遗传变异， 亦 可进行特异性标记的开发和应用。 权利要求书1页 说明书6页 序列表10页 附图3页 CN 114525345 A 2022.05.24 CN 114525345 A 1.蓖麻蚕SSR分子标记， 其特征在于， 所述SSR分子标记的核苷酸序列如SEQ  ID NO:1～ 15所示。 2.根据权利 要求1所述的蓖麻蚕SSR分子标记， 其特征在于， 所述SSR分子标记的引物如 SEQ ID NO:16～45所示。 3.权利要求1或2所述蓖麻蚕SSR分子标记在蓖麻蚕的品种鉴定、 种质资源多样性分析、 核心种质建立和分子标记辅助育种中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114525345 A 2蓖麻蚕SSR分子标记及其应用 技术领域 [0001]本发明属于分子生物学和蚕品种鉴别技术领域， 具体涉及蓖麻蚕SSR分子标记及 其应用， 适用于蓖麻蚕的遗传多样性研究、 种质鉴定及亲缘关系分析。 背景技术 [0002]SSR分子标记标记技术应用至今， 凭借其多态性高、 标记数量丰富以及低成本已经 成为最为普及且成熟 的分子标记技术。 如今它被广泛应用于生物遗传多样性、 遗传图谱构 建、 遗传分析以及分子标记辅助育种等许多研究领域中。 传统的以构建基因组文库建立SSR 标记的方法 由于费时耗力且效率不高， 局限了SSR标记的应用。 目前， 利用微卫星搜索工具 从基因测序得到大量DNA序列中查找SSR位点已成为开发微卫星标记最为便捷、 有效的方 式。 [0003]蓖麻蚕(Philosamia  cynthia ricini)又称木薯蚕、 印度蚕， 是一种具有多化性， 在适宜的环境条件下无滞育期的吐丝类经济昆虫。 16世纪就已经被印度人驯化饲养， 20世 纪前后被引进到20多个 国家与地区进行饲养繁殖， 40年代被引进到我国东北、 华东和华南 等地。 蓖麻蚕是广食性昆虫， 除了摄食蓖麻叶外， 还可食用木薯、 臭椿和马桑等叶片 。 蓖麻蚕 具有发育较快、 易饲养、 抗病性 强、 蚕体健壮、 背光群集等优点， 已经成为我国仅次于家蚕和 柞蚕的第三大经济昆虫， 亦可作为良好的遗传研究素材。 针对蓖麻蚕开展的研究还相对比 较少， 仅有报道采用ISSR方法在几个品种中检测 遗传多样性的分析， 但ISSR标记存在重复 性差等缺点， 目前未见有利用蓖麻蚕DNA序列开发SSR标记的报道。 针对蓖麻蚕开展标记选 择， 用于品种分子甄别， 尤其是在生产优良品种的应用显得 尤为迫切需要。 发明内容 [0004]发明目的： 本发明要解决的技术问题是基于蓖麻蚕基因组全序列信息， 在基因组 水平上筛选SSR分子标记， 为种质资源保存和分子标记辅助育种提供技术支撑。 本发 明首先 利用生物信息学方法， 检测蓖麻蚕SSR位点， 开 发出扩增良好、 多态 性丰富的蓖麻蚕SSR分子 标记， 建立蓖麻蚕SSR扩增技术体系， 并将其应用于蓖麻蚕种质资源的遗传多样性研究及 DNA指纹图谱构建。 [0005]技术方案： 为 解决上述 技术问题， 本发明提供如下技 术方案： [0006]蓖麻蚕SSR分子标记， 所述S SR分子标记的核苷酸序列如SEQ  ID NO:1～15所示。 [0007]进一步地， 所述S SR分子标记的引物如SEQ  ID NO:16～45所示。 [0008]上述蓖麻蚕SSR分子标记在蓖麻蚕的品种鉴定、 种质资源多样性分析、 核心种质建 立和分子标记辅助育种中的应用。 [0009]上述蓖麻蚕S SR分子标记在应用时的PCR反应 体系和PCR反应程序如下： [0010]PCR反应总体系25 μL： 2.5 μL的10 ×PCR buffer， 2 μL的dNTP(2.5mmol/L)， 各自1μL 的上、 下游引物(10mmol/L)， 0.3 μL  DNA聚合酶， 1 μL  DNA模板(500ng/ μL)， 加入ddH2O定容到 反应终体积25 μL。说　明　书 1/6 页 3 CN 114525345 A 3