(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210141059.7 (22)申请日 2022.02.16 (71)申请人 赵俊 地址 310057 浙江省杭州市滨江区水晶城 水晶澜轩2幢1单 元1702室 (72)发明人 赵俊　 (74)专利代理 机构 浙江麦维律师事务所 3 3413 专利代理师 梁炼 (51)Int.Cl. C12Q 1/689(2018.01) C12Q 1/686(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种牙周致病菌核酸检测试剂盒及应用 (57)摘要 本发明公开了一种牙周致病菌核酸检测试 剂盒及应用， 本发明的牙周致病菌核酸检测试剂 盒能够对样品中放线放线杆菌、 牙龈卟啉单胞 菌、 福赛斯坦纳菌、 中间普氏菌和齿垢密螺旋体 进行检测， 有助于牙周炎的诊断与治疗。 采用本 发明的牙周致病菌核酸检测试剂盒， 一次可以鉴 别多种与牙周炎相关的细菌， 大大减少了工作 量， 提高了 检测效率。 权利要求书2页 说明书7页 附图3页 CN 114480688 A 2022.05.13 CN 114480688 A 1.一种检测伴放线放线杆菌、 牙龈卟啉单胞菌、 福赛斯坦纳菌、 中间普氏菌和齿垢密螺 旋体的引物及探针， 其特 征是， 所述引物和探针包括： 检测伴放线放线杆菌DNA引物及探针： 第一上游引物： 5 ’ ‑GCTAGGTAACATCGGTAA‑3’ 第一下游引物： 5 ’ ‑GCACGATCA AATTGTTTC‑3’ 第一探针： 5 ’ ‑FAM‑CTGATTGCCAAGCTGACCACA‑BHQ1‑3’ 检测牙龈卟啉单 胞菌DNA引物及探针： 第二上游引物： 5 ’ ‑ATGCCTAAGACCAATACTTA‑3’ 第二下游引物： 5 ’ ‑GCCTGAATGCTATA AGAAG‑3’ 第二探针： 5 ’ ‑VIC‑ACGCTTCCTGCTTCTCTGCC‑BHQ1‑3’ 检测福赛 斯坦纳菌DNA引物及探针： 第三上游引物： 5 ’ ‑CCTGTAGTAGA ACGATATCTC ‑3’ 第三下游引物： 5 ’ ‑CGAGAGTACGCT TAATCC‑3’ 第三探针： 5 ’ ‑ROX‑TTCGTCCGTCTCCATCAACTGC‑BHQ2‑3’ 检测中间普氏菌DNA引物及探针： 第四上游引物： 5 ’ ‑CACACGCTG GCGAAACCTAC‑3’ 第四下游引物： 5 ’ ‑CACGTGGCGTTGCTTCTTTC‑3’ 第四探针： 5 ’ ‑FAM‑CCGAAGATGCGC CGTTGAAC‑BHQ1‑3’ 检测齿垢密螺旋体DNA引物及探针： 第五上游引物： 5 ’ ‑AGAAAGGCTTTGGGCGACAG‑3’ 第五下游引物： 5 ’ ‑GCTGGAGCCGTAGCTTCCAT‑3’ 第五探针： 5 ’ ‑VIC‑CGGGTCCTCACCCGCTCTTC‑BHQ1‑3’。 2.根据权利要求1所述的一种检测伴放线放线杆菌、 牙龈卟啉单胞菌、 福赛斯坦纳菌、 中间普氏菌和齿垢密螺旋体的引物及探针， 其特征是， 所述引物和探针还包括内参引物及 探针， 内参引物及探针： 第六上游引物： 5 ’ ‑TGGAGCATGTG GTTTAATTCGA‑3 第六下游引物： 5 ’ ‑ACGAGCTGACGACA ACCATG‑3’ 第六探针： 5 ’ ‑Cy5‑TGG+TAAGG+TTCTTCGCGT‑BHQ2‑3’ 碱基前含“+”， 表示该碱基为 LNA修饰。 3.一种牙周致病菌核酸检测试剂盒， 其特征是， 包括权利要求1 ‑2任一项所述的引物及 探针。 4.根据权利要求3所述的一种牙周致病菌核酸检测试剂盒， 其特征是， 还包括PCR检测 混合液。 5.根据权利要求4所述的一种牙周致病菌核酸检测试剂盒， 其特征是， 所述PCR检测混 合液包括Tris ‑HCl， KCl， MgCl2， NH4Cl， CA‑63， 甘油， DMSO， dNTP， UDG酶， Taq  DNA聚合酶。 6.根据权利要求3所述的一种牙周致病菌核酸检测试剂 盒， 其特征是， 试剂 盒还包括阳 性对照品和/或阴性对照品。 7.权利要求1 ‑2任一项所述的检测伴放线放线杆菌、 牙龈卟啉单胞菌、 福赛斯坦纳菌、权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114480688 A 2中间普氏菌和齿 垢密螺旋体的引物及探针在制备牙周致病菌检测试剂中的应用。 8.权利要求3 ‑6任一项所述的牙周致病菌核酸检测试剂 盒在制备牙周致病菌检测试剂 中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114480688 A 3