(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210146313.2 (22)申请日 2022.02.17 (71)申请人 深圳市华晨阳 科技有限公司 地址 518000 广东省深圳市宝安区新 桥街 道黄埔社区上南东路128号4号厂房八 层、 十一层 (72)发明人 张金银　巩赞博　巩赞斌　巩赞华　 黄咏华　彭劼　 (74)专利代理 机构 深圳宏创有为知识产权代理 事务所(普通 合伙) 44837 专利代理师 张海基 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12Q 1/6876(2018.01) C12Q 1/686(2018.01)C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种快速基因检测试剂盒及其基因检测方 法 (57)摘要 本发明公开了一种快速基因检测试剂盒及 其基因检测方法， 涉及生物技术领域， 试剂盒包 括以下组分： TE缓冲液， 引物对1， 引物对2， 限制 性内切酶或其同裂酶， 该试剂盒在制备PCR扩增 模板的步骤中， 无需提取样本中的DNA， 且采用特 殊的引物体系， 从整体上提升了多种目标基因检 测的速度和准确率， 对当前社会中的一些疫情防 控工作具有重大意 义。 权利要求书1页 说明书4页 CN 114891872 A 2022.08.12 CN 114891872 A 1.一种快速基因检测试剂盒， 其特 征在于： 包括以下组分： TE缓冲液， 引物对1， 引物对2， 限制性内切酶 或其同裂酶。 2.根据权利要求1所述的快速基因检测试剂盒， 其特征在于： 所述引物对1为针对目标 基因的普通PCR引物对； 所述引物对2为针对目标基因的巢式PCR引物对。 3.根据权利要求1所述的快速基因检测试剂 盒， 其特征在于： 所述限制性内切酶为限制 性核酸内切酶Hi nfI。 4.根据权利要求1所述的快速基因检测试剂盒， 其特征在于： 所述引物对1、 引物对2， 分 别为针对同一目标基因的普通PCR引物对和巢式PCR引物对。 5.根据权利要求1所述的快速基因检测试剂 盒， 其特征在于： 所述引物对1包括N组引物 对， 为针对N组目标基因的普通PCR引物对； 所述引物对2同样包括N组引物对， 为针对N组目 标基因的巢式PCR引物对， 二 者相互对应； N 为正整数。 6.根据权利要求1所述的快速基因检测试剂盒， 其特征在于： 所述试剂盒中还包括dd   H2O， 2×EasyTaq PCR SuperMix(+dye)。 7.一种采用权利要求1 ‑6任一项所述快速基因检测试剂盒的基因检测方法， 其特征在 于： 包括以下步骤： S1、 制备PCR扩增模板； S2、 制备PCR扩增体系； S3、 设定PCR程序进行PCR扩增； S4、 PCR产物的酶切； S5、 酶切产物的回收和鉴定； 上述步骤采用的试剂， 均来自快速基因检测试剂盒； S1所述制备PCR扩增模板， 无需提 取样本中的DNA。 8.根据权利要求7所述的基因检测方法， 其特征在于： S1所述制备PCR扩增模板， 包括： 将采集得到的样本分散 于TE中， 离心干燥后， 冻干， 恢复到室温， 用TE 重悬。 9.根据权利要求8所述的基因检测方法， 其特征在于： 所述离心干燥， 包括4  000r/min 离心5min， 弃上清。 10.根据权利要求9所述的基因检测方法， 其特征在于： 所述用TE重悬， TE用量为50μL/ 样本。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114891872 A 2一种快速 基因检测试剂盒及其基因检测方 法 技术领域 [0001]本发明涉及生物技术领域， 具体涉及一种快速基因检测试剂盒及其基因检测方 法。 背景技术 [0002]在基因检测(诊断)和基因治疗的初始应用阶段， 主要用于遗传病(宿主自带遗传 物所决定的疾病)的诊断和治疗， 基因是宿主体内携带有遗传信息的遗传物质(DNA\RNA)， 基因检测是对宿 主身上提取出的样本中的遗传物质序列进 行检测的技术。 遗传物质之所以 能够决定这些疾病， 通常是由于遗传物质改变所引起的， 可能来自双亲的遗传， 也可能不 是， 但这类疾病都会在宿 主的遗传物质序列中有 所体现， 检测原理是： 目前人类基因组基本 已经破译， 决定某些形状的基因片段序列(各种基因型)基本确定， 当这些基因型中的碱基 序列发生突变时， 有一定概率导致该基因的表达出现问题， 也就表现为遗传病， 我们对一定 的序列片段进行克隆(复制)后， 通过对其进行检测， 通常可以得知这一段序列是否发生突 变， 也就能够判断该宿主是否可能患有该基因片段决定的遗传病。 [0003]但近年来， 随着基因检测技术的进步， 以及多种传染病的广泛传播， 基因检测， 尤 其是快速基因检测， 对病毒感染类疾病(等由携带特殊遗传物质的病原体引发的疾病种类) 的诊断渐渐被广泛应用， 目前已经能够实现短时间大批量基因检测， 但是目前 的大部分基 因检测在时效上还是不能达到应对短时间大规模检测的要求， 主要原因有： 样品采集和处 理时间长、 P CR扩增前需要复杂的裂解和DNA 提取过程、 PCR扩增程序受到多处限制而速度较 慢。 发明内容 [0004]为解决上述问题， 本发明提供一种无需进行复杂样品前处理的、 无需提取样品基 因组的、 PCR扩增程序时间短的快速基因检测试剂盒及其基因检测方法， 具体方案如下； [0005]首先， 本发明提供一种快速基因检测试剂盒， 包括以下组分： [0006]TE缓冲液， 引物对1， 引物对2， 限制性内切酶 或其同裂酶。 [0007]优选地， 所述引物对1为针对目标基因的普通PCR引物对。 [0008]优选地， 所述引物对2为针对目标基因的巢式PCR引物对。 [0009]优选地， 所述限制性内切酶为限制性核酸内切酶Hi nfI。 [0010]优选地， 所述同裂酶指与所述限制性内切酶识别相同核苷酸靶序列的内切酶。 [0011]进一步优选地， 所述同裂酶指与所述限制性内切酶剪切位 点相同。 [0012]优选地， 所述引物对1、 引物对2， 分别为针对同一目标基因的普通PC R 引物对和巢 式PCR引物对。 [0013]进一步优选地， 所述引物对1包括N组引物对， 为针对N组目标基因的普通PCR引物 对； 所述引物对2 同样包括N组引物对， 为针对N组目标基因的巢式PCR引物对， 二者相互对 应； N为正整数。说　明　书 1/4 页 3 CN 114891872 A 3