(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210148718.X (22)申请日 2022.02.18 (71)申请人 江苏省人民医院 （南京医科 大学第 一附属医院） 地址 210029 江苏省南京市 鼓楼区广州路 300号 (72)发明人 吴仔峰　杨春　王娣　黄朝理　 王远远　 (74)专利代理 机构 北京中济纬天专利代理有限 公司 11429 代理人 丁燕华 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种外泌体miRNA在制备慢性疼痛-抑郁共 病诊断产品中的应用 (57)摘要 本发明公开了一种外泌体miRNA在制备慢性 疼痛‑抑郁共病诊断产品中的应用， 所述外泌体 miRNA为血浆外泌体miR ‑351‑5p。 本发明还公开 一种慢性疼痛 ‑抑郁共病诊断试剂盒， 试剂盒中 包括检测外泌体miR ‑351‑5p的试剂， 试剂包括 miR‑351‑5p逆转录引物、 PCR检测上下游引物， 逆 转录引物序列、 PCR检测上游引物序列、 PCR检测 下游引物序列。 本发明的标志物区别于传统生物 标志物， 血液中的外泌体miR ‑351‑5p稳定， 微创， 易于检测， 且定量精准， 可以大大提高慢性疼痛 ‑ 抑郁共病诊断的敏感性及特异性， 可为临床医生 更快掌握患者病情， 及早采取更具个性化的镇痛 方案提供治 疗依据。 权利要求书1页 说明书5页 序列表1页 附图5页 CN 114350793 A 2022.04.15 CN 114350793 A 1.一种外泌体miRNA在制备慢性疼痛 ‑抑郁共病诊断产品中的应用， 所述外泌体miRNA 为血浆外泌体miR ‑351‑5p。 2.如权利要求1所述 的应用， 其特征在于所述miR ‑351‑5p序列为， 人源： SEQ  ID No.1； 鼠源： SEQ  ID No.2。 3.如权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述应用包括慢性疼痛 ‑抑郁共病诊断或者 辅助诊断试剂盒中的应用。 4.一种慢性疼痛 ‑抑郁共病诊断试剂盒， 其特征在于所述试剂盒中包括检测外泌体 miR‑351‑5p的试剂， 试剂包括miR ‑351‑5p逆转录引物、 PCR检测上下游引物， 逆转录引物序 列如SEQ ID No.3， PCR检测上游引物序列如SEQ  ID No.4， PCR检测下游引物序列如SEQ  ID  No.5。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114350793 A 2一种外泌体miRNA在制备慢性疼痛 ‑抑郁共病诊断产品中的 应用 技术领域 [0001]本发明公开了一种外泌体miRNA在制备慢性疼痛 ‑抑郁共病诊断产品中的应用， 属 于生物医药 领域。 背景技术 [0002]疼痛是实际或潜在组织损伤带来的不愉快的感觉和情感体验， 或者是与此类似的 经历。 慢性疼痛是指持续或者反 复发作超过三个月的疼痛。 根据流行病学调查显示， 我国慢 性疼痛的发生率平均约为36％； 此外， 随着年龄的增加， 慢性疼痛的发生率也会随之增长。 由此看来， 慢性疼痛已然成为现代社会中普遍存在的健康问题之一。 生物及社会等多种因 素都会影响着慢性疼痛， 心理因素在其发生、 发展及转归中具有关键性的作用。 疼痛的临床 表现不仅会导致患者生活质量下降， 健康不佳等， 还会明显导致患者情绪低落， 焦虑及抑郁 等负性情绪更加剧了痛觉感受。 导致慢性疼痛治疗失败的六个因素主要都是心理社会因 素， 包括： 疼痛导致功能残疾和应激， 而这些又会加重疼痛， 形成恶性循环； 其次不健康的生 活方式、 缺 乏社会支持、 抑郁性精神病以及药物滥用史等均可促使急性疼痛想慢性疼痛的 转变。 调查结果显示， 20％～50％的慢性疼痛患者同时伴有抑郁表现。 抑郁症作为一种精神 障碍性疾病， 临床上主要表现为情绪低落、 快感缺失、 兴趣的丧失以及回避社交活动等； 其 中值得注意的是， 慢性疼痛是排在睡眠障碍与食欲下降之后， 抑郁障碍中最常见伴发的躯 体不适症状。 抑郁症状与慢性疼痛的发生及其严重程度密切相关， 而目前诱发抑郁的机制 尚不明确。 近年来， 关于慢性疼痛的发病机制研究已经取得了一些成果， 但是想要针对性的 显著提高临床镇痛效果尚且任重道远， 抑郁症更是如此。 慢性疼痛患者伴发抑郁症不仅加 重了临床症状， 更大大增加了有效缓解疼痛的难度。 由此可见， 及早对慢性疼痛合并抑郁症 状的患者进行干预将有效提高治疗效果， 因此寻找该共病新的诊断靶点 意义重大。 [0003]慢性疼痛和 抑郁症的发生受到诸多因素的影响， 生活环境、 免疫炎症、 遗传因素等 均会导致个体对两种疾病相对易感性的差异。 慢性疼痛与抑郁在许多风险因素方面具有重 叠的部分， 其中遗传因素显得尤为重要。 一项3266名女性双胞胎调查研究中显示， 抑郁和慢 性疼痛有着8 6％的遗传相关性。 组蛋白、 DNA 等遗传物质的修饰参与慢 性疼痛和抑郁的发生 发展。 微小RNA(miRNA)是一种长度为18 ‑22个核苷酸的微小非编码RNA， 作为基因表达的转 录后调节因子发挥作用。 通过与靶基因3 ’端非编码区靶向结合， 抑制基因翻译或诱导转录 后mRNA的降解， 以此来调控基因的表达水平。 近来年， 外泌体 miRNA研究较为广泛， 人外周血 液中miRNA的主要信 号来源就是外泌体。 外泌体(exosomes)是一种直径为40 ‑100nm的脂质 双分子层囊泡， 可携带包括DNA， mRNA， miRNA和蛋白质等多种生物分子在细胞之间发挥着生 物调节作用。 已有研究证明， 外泌体表面标志物CD9、 CD63和 TSG101在抑郁患者血浆中均有 表达。 最新研究也表明外泌体miRNA参与抑郁症的HPA轴的调节以及脑源性神经营养因子 (brain‑derived neuropathic  factor， BDNF)、 Wnt/β ‑catenin等信号通路的调节， 调控着 抑郁症的发生发展， 是抑郁症诊断和治疗的潜在生物标志物。 分离慢性疼痛患者外周血中说　明　书 1/5 页 3 CN 114350793 A 3