(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210149742.5 (22)申请日 2022.02.18 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114835781 A (43)申请公布日 2022.08.02 (66)本国优先权数据 202110797547.9 2021.07.14 CN (73)专利权人 呈诺再生医学 科技 （珠海横琴新 区） 有限公司 地址 519000 广东省珠海市横琴新区粤澳 合作中医药科技产业园飞蓬路30号3 栋201、 301室 (72)发明人 尹乐　顾雨春　 (74)专利代理 机构 北京预立 生科知识产权代理 有限公司 1 1736 专利代理师 高倩倩 (51)Int.Cl. C07K 7/08(2006.01)C12N 15/11(2006.01) C07K 19/00(2006.01) A61K 39/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) G01N 33/574(2006.01) (56)对比文件 CN 113527434 A,2021.10.2 2 马建宏等.前列腺癌细胞转移相关基因的筛 选_马建宏20151 128前列腺癌细胞转移相关基因 的筛选. 《热带医学杂志》 .2015,第15卷(第1 1 期),第145 5-1459页. 赖盛伟等.前列腺特异性膜抗原( P SMA) 与 程序性死亡蛋白1 配 体1( PD-L1) 在原发性前 列腺癌组织的表达及临床意 义. 《细胞与分子免 疫学杂志》 .2020,第3 6卷(第8期),第72 9-733页. 审查员 陈盛峰 (54)发明名称 WTN多肽及其在检测、 治 疗癌症中的用途 (57)摘要 本发明提供了WTN多肽及其在检测、 治疗癌 症中的用途， 同时提供了包括WTN多肽的多肽复 合物、 其编码DNA分子、 其所在的载体、 宿主细胞 和药物组合物、 检测PSMA 的试剂盒， 其用途包括 检测和治疗前列腺癌。 权利要求书3页 说明书16页 序列表5页 附图18页 CN 114835781 B 2022.11.18 CN 114835781 B 1.一种与PSMA特异性结合的WTN多肽， 其特征在于， 所述WTN多肽是SEQ  ID NO:1所示的 多肽。 2.如权利要求1所述的WTN多肽， 所述WTN多肽还包括在SEQ  ID NO:1所示的多肽主链 或 侧链末端的氨基、 羧基、 咪唑基、 胍基、 吲哚基中的一个或多个位 点进行化学修饰后的产物。 3.一种多肽复合物， 其特征在于， 所述多肽复合物是在权利要求1  所述的WTN多肽的氨 基端和/或羧基端以肽键连接结构域所构成的。 4.如权利要求3所述的多肽复合物， 所述结构域是由氨基酸组成的。 5.如权利要求4所述的多肽复合物， 所述结构域包括铰链区、 跨膜结构域和信号转导结 构域。 6.如权利要求5所述的多肽复合物， 所述信号转导结构域包括共刺激结构域和/或初级 信号传导结构域。 7.如权利要求3所述的多肽复合物， 所述多肽复合物是肿瘤抗原结合肽。 8.如权利要求7所述的多肽复合物， 所述肿瘤抗原结合肽的组成是WTN多肽区 ‑铰链区‑ 跨膜结构域 ‑共刺激结构域 ‑初级信号传导结构域或WTN多肽区 ‑铰链区‑跨膜结构域 ‑初级 信号传导结构域。 9.如权利 要求8所述的多肽复合物， 所述WTN多肽区包括多个WTN多肽的重 复和多个WTN 多肽的重复之间的l inker。 10.如权利 要求5或8所述的多肽复合物， 所述铰链区包括CD8α 铰链区、 CD28铰链区、 CD4 铰链区、 CD5铰链区、 CD134铰链区、 CD137铰链区或ICOS铰链区。 11.如权利要求5或8所述的多肽复合物， 所述跨膜结构域包括蛋白质的跨膜结构域， 所 述蛋白质包括： 2B4基因表达的蛋白、 T细胞受体的α、 β 或ζ链， CD28， CD3ε， CD45， CD4， CD5， CD8， CD9， CD16， CD2 2， CD33， CD37， CD64， CD 80， CD86， CD123， CD134， CD137或CD154。 12.如权利要求6或8所述的多肽复合物， 所述共刺激结构域包括2B4、 CD3ζ、 OX40、 CD2、 CD27、 CD28、 CD S、 ICAM‑1、 LFA‑1、 ICOS或4 ‑1BB的功能性信号传导结构域。 13.如权利要求6或8所述的多肽复合物， 所述初级信号传导结构域包括NKG2D初级信 号、 CD3‑ζ、 Fc εRIγ、 FcRγ、 FcRβ 、 CD3γ、 CD3δ、 CD3 ε、 CD5、 CD22、 CD79a、 CD79b和CD66d的一种 蛋白或多种蛋白的任意组合的信号传导区。 14.如权利要求10所述的多肽复合物， 所述铰链区是CD 8α 铰链区。 15.如权利要求14所述的多肽复合物， 所述CD8α 铰链区的氨基酸序列如SEQ  ID NO:3所 示。 16.如权利要求14所述的多肽复合物， 所述CD8α 铰链区的编码核酸序列如SEQ  ID NO:4 所示。 17.如权利要求1 1所述的多肽复合物， 所述 跨膜结构域是2B4的跨膜结构域。 18.如权利要求17所述的多肽复合物， 所述2B4的跨膜结构域的氨基酸序列如SEQ  ID  NO:5所示。 19.如权利 要求17所述的多肽复合物， 所述2B4的跨膜结构域的编码核酸序列如SEQ  ID  NO:6所示。 20.如权利要求12所述的多肽复合物， 所述共刺激结构域是2B4的功能性信号传导结构 域。权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 114835781 B 221.如权利要求20所述的多肽复合物， 所述2B4的功能性信号传导结构域的氨基酸序列 如SEQ ID NO:7所示。 22.如权利要求20所述的多肽复合物， 所述2B4的功能性信号传导结构域的编码核酸序 列如SEQ ID NO:8所示。 23.如权利要求13所述的多肽复合物， 所述初级信号传导结构域是NKG2D的信号传导 区。 24.如权利 要求23所述的多肽复合物， 所述NKG2D的信号传导区的氨基酸序列如SEQ  ID  NO:9所示。 25.如权利要求23所述的多肽复合物， 所述NKG2D的信号传导区的编码核酸序列如SEQ   ID NO:10所示。 26.如权利要求8所述的多肽复合物， 所述肿瘤抗原结合肽的组成是WTN多肽区 ‑铰链 区‑跨膜结构域 ‑共刺激结构域 ‑初级信号传导结构域。 27.如权利要求26所述的多肽复合物， 所述肿瘤抗原结合肽的组成是WTN多肽区 ‑CD8α 铰链区‑2B4的跨膜结构域 ‑2B4的功能性信号传导结构域 ‑NKG2D的信号传导区。 28.如权利要求27所述的多肽复合物， 所述肿瘤抗原结合肽的氨基酸序列如SEQ  ID  NO:11所示。 29.如权利要求27所述的多肽复合物， 所述肿瘤抗原结合肽的编码核酸序列如SEQ  ID  NO:12所示。 30.编码权利要求1所述的WTN多肽或权利要求3所述的多肽复合物的DNA分子 。 31.如权利要求30所述的DNA分子， 所述编码WTN多肽的DNA分子序列如SEQ  ID NO:2所 示。 32.如权利要求30所述的DNA分子， 所述编码多肽复合物的DNA分子序列如SEQ  ID NO: 12所示。 33.包含权利要求3 0所述的DNA分子的载体。 34.如权利要求3 3所述的载体， 所述载体是表达载体。 35.如权利要求34所述的载体， 所述表达载体是质粒表达载体或病毒表达载体。 36.一种宿主细胞， 其特征在于， 所述宿主细胞包含权利要求1所述的多肽、 权利要求3 所述的多肽复合物、 权利要求3 0所述的DNA分子和权利要求3 3所述的载体中的一种或多种。 37.如权利要求3 6所述的宿主细胞， 所述宿主细胞包括原核细胞和真核细胞。 38.如权利要求37 所述的宿主细胞， 所述原核细胞 是细菌细胞。 39.如权利要求37所述的宿主细胞， 所述真核细胞是哺乳动物细胞、 昆虫细胞、 植物细 胞、 真菌细胞或藻类细胞。 40.如权利要求39所述的宿主细胞， 所述哺乳动物细胞包括人源细胞或非人源的细胞。 41.如权利要求 40所述的宿主细胞， 所述人源细胞 是免疫细胞。 42.如权利要求 41所述的宿主细胞， 所述免疫细胞 是NK细胞或T细胞。 43.如权利要求 42所述的宿主细胞， 所述免疫细胞 是NK细胞。 44.如权利要求 43所述的宿主细胞， 所述 NK细胞是外周血 单核细胞来源的NK细胞。 45.一种药物组合物， 其特征在于， 所述药物 组合物包括权利要求1所述的多肽、 权利要 求3所述的多肽复合物、 权利要求30所述的DNA分子、 权利要求33所述的载体和 权利要求36权　利　要　求　书 2/3 页 3 CN 114835781 B 3