(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210149771.1 (22)申请日 2022.02.18 (66)本国优先权数据 202110797547.9 2021.07.14 CN (71)申请人 呈诺再生医学 科技 （珠海横琴新区） 有限公司 地址 519000 广东省珠海市横琴新区粤澳 合作中医药科技产业园飞蓬路30号3 栋201、 301室 (72)发明人 尹乐　顾雨春　 (74)专利代理 机构 北京预立 生科知识产权代理 有限公司 1 1736 专利代理师 朱萍 (51)Int.Cl. C07K 7/08(2006.01)C12N 15/11(2006.01) C07K 19/00(2006.01) A61K 39/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) G01N 33/574(2006.01) (54)发明名称 PD-L1抑制剂和肿瘤抗原结合肽-工程化免 疫细胞联合在前列腺癌治 疗中的应用 (57)摘要 本发明公开了PD ‑L1抑制剂和肿瘤抗原结合 肽‑工程化免疫细胞联合在前列腺癌治疗中的应 用， 本发明首次将PD ‑L1抑制剂和肿瘤抗原结合 肽‑工程化免疫细胞两者联合应用于前列腺癌的 治疗中， 且表现出较好的治疗效果， 本发明可适 用于靶向抗前列腺癌药物的制备以及辅助前列 腺癌的靶向治疗中， 具有非常好的临床应用前 景。 权利要求书3页 说明书15页 序列表5页 附图18页 CN 114560910 A 2022.05.31 CN 114560910 A 1.PD‑L1抑制剂和肿瘤抗原结合肽 ‑工程化免疫细胞联合在制备癌症靶向治疗药物中 的应用； 优选地， 所述癌症为前列腺癌。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述肿瘤抗原结合肽 ‑工程化免疫细胞中 肿瘤抗原结合肽的构成为WTN多肽区 ‑铰链区‑跨膜结构域 ‑共刺激结构域 ‑初级信号传导结 构域或WTN多肽区 ‑铰链区‑跨膜结构域 ‑初级信号传导结构域； 优选地， 所述肿瘤抗原结合肽的构成为WTN多肽区 ‑铰链区‑跨膜结构域 ‑共刺激结构 域‑初级信号传导结构域； 优选地， 所述 WTN多肽区包括多个WTN多肽的重复和多个WTN多肽的重复之间的l inker； 更优选地， 所述 WTN多肽为 一种与PSMA特异性结合的多肽； 最优选地， 所述 WTN多肽选自以下组中的任意 一种： (1)如SEQ ID NO:1所示的多肽； (2)在如SEQ  ID NO:1所示的多肽的第1位、 第2位、 第3位、 第4位、 第5位、 第6位、 第7位、 第8位、 第9位、 第10位、 第11位和第12位中的一个或多个位置发生取代、 缺失或添加后形成 的产物； (3)在如SEQ  ID NO:1所示的多肽主链 或侧链末端的氨基、 羧基、 巯基、 酚羟基、 咪唑基、 胍基、 吲哚基、 甲硫基中的一个或多个位 点进行化学修饰后形成的产物； 最优选地， 所述 WTN多肽为如SEQ  ID NO:1所示的多肽； 最优选地， 所述 WTN多肽的核苷酸序列如SEQ  ID NO:2所示。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于， 所述肿瘤抗原结合肽的铰链区为CD8α 铰链 区； 优选地， 所述CD 8α 铰链区的氨基酸序列如SEQ  ID NO:3所示； 更优选地， 所述CD 8α 铰链区的核苷酸序列如SEQ  ID NO:4所示； 优选地， 所述 跨膜结构域 为2B4跨膜结构域； 更优选地， 所述2B4 跨膜结构域的氨基酸序列如SEQ  ID NO:5所示； 最优选地， 所述2B4 跨膜结构域的核苷酸序列如SEQ  ID NO:6所示； 优选地， 所述共刺激结构域 为2B4共刺激结构域； 更优选地， 所述2B4共刺激结构域的氨基酸序列如SEQ  ID NO:7所示； 最优选地， 所述2B4共刺激结构域的核苷酸序列如SEQ  ID NO:8所示； 优选地， 所述初级信号传导结构域 为NKG2D初级信号传导结构域； 更优选地， 所述 NKG2D初级信号传导结构域的氨基酸序列如SEQ  ID NO:9所示； 最优选地， 所述 NKG2D初级信号传导结构域的核苷酸序列如SEQ  ID NO:10所示； 最优选地， 所述肿瘤抗原结合肽的组成为WTN多肽区 ‑CD8α 铰链区 ‑2B4跨膜结构域 ‑2B4 共刺激结构域 ‑NKG2D初级信号传导结构域； 最优选地， 所述肿瘤抗原结合肽的氨基酸序列如SEQ  ID NO:11所示； 最优选地， 所述肿瘤抗原结合肽的核苷酸序列如SEQ  ID NO:12所示。 4.根据权利要求1 ‑3任一项所述的应用， 其特征在于， 所述肿瘤抗原结合肽 ‑工程化免 疫细胞包括肿瘤抗原结合肽 ‑工程化NK细胞、 肿瘤抗原结合肽 ‑工程化T细胞、 肿瘤抗原结合 肽‑工程化B细胞、 肿瘤抗原结合肽 ‑工程化巨噬细胞；权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 114560910 A 2优选地， 所述肿瘤抗原结合肽 ‑工程化免疫细胞为肿瘤抗原结合肽 ‑工程化NK细胞。 5.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述PD ‑L1抑制剂包括atezolizumab、 avelumab、 durvalumab； 优选地， 所述P D‑L1抑制剂为atezo lizumab。 6.一种用于治疗癌症的药物组合物， 其特征在于， 所述药物 组合物包含PD ‑L1抑制剂和 肿瘤抗原结合肽 ‑工程化免疫细胞； 优选地， 所述癌症为前列腺癌。 7.根据权利要求6所述的药物组合物， 其特征在于， 所述肿瘤抗原结合肽 ‑工程化免疫 细胞中肿瘤抗原结合肽的构成为WTN多肽区 ‑铰链区‑跨膜结构域 ‑共刺激结构域 ‑初级信号 传导结构域； 优选地， 所述 WTN多肽区包括多个WTN多肽的重复和多个WTN多肽的重复之间的l inker； 更优选地， 所述 WTN多肽为 一种与PSMA特异性结合的多肽； 最优选地， 所述 WTN多肽为如SEQ  ID NO:1所示的多肽； 最优选地， 所述 WTN多肽的核苷酸序列如SEQ  ID NO:2所示； 优选地， 所述铰链区为CD 8α 铰链区； 更优选地， 所述CD 8α 铰链区的氨基酸序列如SEQ  ID NO:3所示； 最优选地， 所述CD 8α 铰链区的核苷酸序列如SEQ  ID NO:4所示； 优选地， 所述 跨膜结构域 为2B4跨膜结构域； 更优选地， 所述2B4 跨膜结构域的氨基酸序列如SEQ  ID NO:5所示； 最优选地， 所述2B4 跨膜结构域的核苷酸序列如SEQ  ID NO:6所示； 优选地， 所述共刺激结构域 为2B4共刺激结构域； 更优选地， 所述2B4共刺激结构域的氨基酸序列如SEQ  ID NO:7所示； 最优选地， 所述2B4共刺激结构域的核苷酸序列如SEQ  ID NO:8所示； 优选地， 所述初级信号传导结构域 为NKG2D初级信号传导结构域； 更优选地， 所述 NKG2D初级信号传导结构域的氨基酸序列如SEQ  ID NO:9所示； 最优选地， 所述 NKG2D初级信号传导结构域的核苷酸序列如SEQ  ID NO:10所示； 最优选地， 所述肿瘤抗原结合肽的组成为WTN多肽区 ‑CD8α 铰链区 ‑2B4跨膜结构域 ‑2B4 共刺激结构域 ‑NKG2D初级信号传导结构域； 最优选地， 所述肿瘤抗原结合肽的氨基酸序列如SEQ  ID NO:11所示； 最优选地， 所述肿瘤抗原结合肽的核苷酸序列如SEQ  ID NO:12所示； 最优选地， 所述肿瘤抗原结合肽 ‑工程化免疫细胞为肿瘤抗原结合肽 ‑工程化NK细胞。 8.根据权利要求6所述的药物组合物， 其特征在于， 所述PD ‑L1抑制剂包括 atezolizumab、 avelumab、 durvalumab； 优选地， 所述P D‑L1抑制剂为atezo lizumab。 9.一种筛 选用于治疗癌症的潜在物质的方法， 其特 征在于， 所述方法包括如下步骤： (1)提供候选物质和阳性对照物质， 所述阳性对照物质为PD ‑L1抑制剂和肿瘤抗原结合 肽‑工程化免疫细胞 联合； (2)在测试组中， 检测所述候选物质对癌症细胞增殖、 迁移、 和/或侵袭的影响， 并与阳 性对照组以及阴性对照组的实验结果进行比较；权　利　要　求　书 2/3 页 3 CN 114560910 A 3