(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210152537.4 (22)申请日 2022.02.18 (71)申请人 中国人民解 放军军事科学院军事医 学研究院 地址 100850 北京市海淀区太平路27号院 申请人 中国人民解 放军总医院第五医学中 心 (72)发明人 葛常辉　丁勇　刘娜　郑晓飞　 陈方旎　付汉江　朱捷　 (74)专利代理 机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司 11245 专利代理师 张立娜 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/11(2006.01)C12Q 1/6851(2018.01) G16B 30/00(2019.01) G16H 50/20(2018.01) (54)发明名称 一组用于甲状 腺肿瘤诊断和131碘治疗及预 后的血清miRNA组合 (57)摘要 本发明公开了一组用于甲状腺肿瘤诊断和 131碘治疗及预后的血清miRNA组合。 用于检测 miRNA的物质在制备具有如下任一功能的产品中 的应用： 诊断甲状腺癌、 筛查甲状腺癌、 区分甲状 腺癌和甲状腺 良性病变、 区分甲状腺癌和健康 者、 评估甲状腺癌患者经131碘治疗预后情况、 预 测甲状腺癌患者经131碘治疗后存活情况； 所述 miRNA为： Has ‑miR‑378d、 Has ‑miR‑130b‑5p和/或 Has‑miR‑548j‑3p。 通过本发明发掘的血清miRNA 标志物可以实现甲状腺癌的快速早期诊断， 以 及131I治疗效果和生存预后情况的预判， 从而指 导临床医生给病人提供 预防和治 疗方案。 权利要求书3页 说明书8页 序列表2页 附图2页 CN 114438212 A 2022.05.06 CN 114438212 A 1.用于检测miRNA的物质在 如下任一中的应用； A1、 制备用于诊断或辅助诊断甲状腺癌的产品； A2、 制备用于 筛查或辅助筛查甲状腺癌的产品； A3、 制备用于区分或辅助区分甲状腺癌和甲状腺良性病变的产品； A4、 制备用于区分或辅助区分甲状腺癌和健康者的产品； 所述miRNA为： Has ‑miR‑378d、 Has ‑miR‑130b‑5p和/或Has ‑miR‑548j‑3p。 2.用于检测miRNA的物质在 如下任一中的应用； B1、 制备用于 评估或辅助评估甲状腺癌 患者经131碘治疗效果和/或预后情况的产品； B2、 制备用于预测或辅助预测甲状腺癌 患者经131碘治疗后存活情况的产品； 所述miRNA为： Has ‑miR‑378d、 Has ‑miR‑130b‑5p和/或Has ‑miR‑548j‑3p。 3.根据权利要求1或2所述的应用， 其特 征在于： 所述物质为引物对。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于： 用于检测所述Has ‑miR‑378d的引物对由 SEQ ID No.1和SEQ  ID No.4所示两 条单链DNA组成； 用于检测所述Has ‑miR‑130b‑5p的引物 对由SEQ ID No.2和SEQ  ID No.4所示两 条单链DNA组成； 用于检测所述Has ‑miR‑548j‑3p的 引物对由SEQ  ID No.3和SEQ ID No.4所示两条 单链DNA组成； 进一步地， 所述物质中还 含有用于检测内参的引物对； 所述内参 为U6基因； 更进一步地， 所述用于检测内参的引物对由SEQ  ID No.5和SEQ  ID No.6所示两条单链 DNA组成。 5.一种产品， 含有如下(a1)、 (a2)和/或(a3)： (a1)由SEQ  ID No.1和SEQ  ID No.4所示两条单链DNA组成的用于检测Has ‑miR‑378d的 引物对； (a2)由SEQ  ID No.2和SEQ  ID No.4所示两条单链DNA组成的用于检测Has ‑miR‑130b‑ 5p的引物对； (a3)由SEQ  ID No.3和SEQ  ID No.4所示两条单链DNA组成的用于检测Has ‑miR‑548j‑ 3p的引物对； 所述产品具有如下任一功能： (b1)诊断或辅助诊断甲状腺癌； (b2)筛查或辅助筛查甲状腺癌； (b3)区分或辅助区分甲状腺癌和甲状腺良性病变； (b4)区分或辅助区分甲状腺癌和健康者； (b5)评估或辅助评估甲状腺癌 患者经131碘治疗效果和/或预后情况； (b6)预测或辅助预测甲状腺癌 患者经131碘治疗后存活情况。 6.根据权利要求5所述产品， 其特 征在于： 所述产品中还 含有如下(a4)： (a4)用于检测内参的引物对； 所述内参 为U6基因； 进一步地， 所述用于检测 内参的引物对由SEQ  ID No.5和SEQ  ID No.6所示两条单链 DNA组成。 7.一种用于 筛查或辅助筛查甲状腺癌的系统， 包括： (C1)通过荧 光定量PCR法检测血清中miRNA水平的试剂和/或仪器； 所述miRNA为： Has ‑miR‑378d、 Has ‑miR‑130b‑5p和/或Has ‑miR‑548j‑3p；权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 114438212 A 2(C2)装置； 所述装置中设有数据输入模块、 参考值存储模块、 数据比较模块和结论输出 模块； 所述数据输入模块被配置为输入(C1)通过荧光定量PCR法检测得到的代表待测者的血 清中所述miRNA水平的Ct值， 记为Ct待测值； 所述参考值存储模块被配置为存储参考值； 所述参考值为(C1)通过荧光定量PCR法检 测得到的代 表健康者的血清中所述miRNA水平的Ct值， 记为Ct参 考值； 所述数据比较模块被配置为接收由所述数据输入模块发送的数据， 并调用所述参考值 存储模块中存 储的所述 参考值， 然后将所述Ct待测值与所述Ct参 考值进行比较； 所述结论输出模块被配置为接收由所述数据比较模块发送的比较结果， 然后按照如下 任一输出 结论： 针对Has‑miR‑378d， 若所述Ct待测值为所述Ct参考值的0.485倍以下， 则 认为所述待测者为 或候选为甲状腺癌 患者； 反之， 则认为所述待测者 为或候选为非甲状腺癌 患者； 针对Has‑miR‑130b‑5p， 若所述Ct待测值为所述Ct参考值的3.96倍以上， 则认为所述待测者 为或候选为甲状腺癌 患者； 反之， 则认为所述待测者 为或候选为非甲状腺癌 患者； 针对Has‑miR‑548j‑3p， 若所述Ct待测值为所述Ct参考值的3.87倍以上， 则认为所述待测者 为或候选为甲状腺癌 患者； 反之， 则认为所述待测者 为或候选为非甲状腺癌 患者。 8.一种用于评估或辅助评估甲状腺癌患 者经131碘治疗 效果和/或预后情况的系统， 包 括： (D1)用于检测血清中miRNA水平的试剂和/或仪器； 所述miRNA为： Has ‑miR‑378d、 Has ‑miR‑130b‑5p和/或Has ‑miR‑548j‑3p； (D2)装置； 所述装置中设有数据输入 模块、 数据处 理模块和结论输出模块； 所述数据输入模块被配置为输入(D1)检测得到的由若干名经131碘治疗的甲状腺癌患 者组成的待测群 体中每个样本的血清中所述miRNA水平的检测值； 所述数据处理模块被配置为接收由所述数据输入模块发送的数据， 按照所述miRNA水 平由低到高的顺序将所述待测 群体进行排列并二等分， 将表达量相对较高的1/2所述待测 群体作为所述miRNA高表达组， 表达量相对较低的1/2所述待测群体作为所述miRNA低表达 组； 所述结论输出模块被配置为接收由所述数据处理模块发送的数据， 然后按照如下任一 输出结论： 针对Has‑miR‑378d， 高表达组中的甲状腺癌患者经131碘治疗效果良好和/或预后良 好； 低表达组中的 甲状腺癌 患者经131碘治疗效果 不好和/或预后不良； 针对Has‑miR‑130b‑5p， 低表达组中的甲状腺癌患者经131碘治疗效果良好和/或预后 良好； 高表达组中的 甲状腺癌 患者经131碘治疗效果 不好和/或预后不良； 针对Has‑miR‑548j‑3p， 低表达组中的甲状腺癌患者经131碘治疗效果良好和/或预后 良好； 高表达组中的 甲状腺癌 患者经131碘治疗效果 不好和/或预后不良。 9.根据权利要求7或8所述的系统， 其特征在于： 在 所述(C1)和所述(D1)中， 所述试剂含 有如下(a1)、 (a2)和/或(a3)： (a1)由SEQ  ID No.1和SEQ  ID No.4所示两条单链DNA组成的用于检测Has ‑miR‑378d的 引物对；权　利　要　求　书 2/3 页 3 CN 114438212 A 3