(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210157007.9 (22)申请日 2022.02.21 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114457182 A (43)申请公布日 2022.05.10 (73)专利权人 广东省农业科 学院蔬菜研究所 地址 510000 广东省广州市天河区金颖路 66号 (72)发明人 赵钢军　吴海滨　罗剑宁　李俊星　 龚浩　郑晓明　刘小茜　 (74)专利代理 机构 广州广典知识产权代理事务 所(普通合伙) 44365 专利代理师 万志香　曾银凤 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01)C12N 15/11(2006.01) 审查员 张艳青 (54)发明名称 与丝瓜果皮颜色相关的SNP分子标记及其应 用 (57)摘要 本发明公开了一种与丝瓜果皮颜色相关的 SNP分子标记， 所述SNP分子 标记位于丝瓜第13号 染色体第3016574bp碱基， 该处碱基为T或C。 本发 明的SNP分子标记具有 通用性和准确性， 根据SNP 分子标记和KASP引物， 可以直接用于丝瓜果 皮颜 色和相对应的基因型的鉴定， 从而在苗期就可以 实现从基因型上快速、 准确的判断丝瓜果皮颜色 性状， 提高了工作效率， 为丝瓜分子育种提供有 效的技术支持， 具有重要的应用价 值。 权利要求书1页 说明书5页 序列表1页 附图2页 CN 114457182 B 2022.08.12 CN 114457182 B 1.一种检测丝瓜果皮颜色的引物， 其特征在于， 所述引 物包括： 序列如SEQ  ID No： 1所 示的正向引物、 以及序列如SEQ  ID No： 2和SEQ ID No： 3所示的反向引物。 2.根据权利要求1所述的检测丝瓜果皮颜色的引物， 其特征在于， 所述反向引物的5 ′端 连接有荧 光分子FAM或H EX。 3.根据权利要求2所述的检测丝瓜果皮颜色的引物， 其特征在于， 所述序列如SEQ  ID  No： 2所示的反向引物的5 ′端连接有荧光分子FAM， 所述序列如SEQ  ID No： 3所示的反向引物 的5′端连接有荧 光分子HEX。 4.一种用于丝瓜果皮颜色早期筛选的试剂 盒， 其特征在于， 所述试剂 盒包括： 权利要求 1～3任一项所述的检测丝瓜果皮颜色的引物。 5.权利要求1～3任一项所述的引物、 或权利要求4所述的试剂盒在丝瓜果皮颜色早期 筛选中的应用。 6.权利要求1～3任一项所述的引物、 或权利要求4所述的试剂盒在丝瓜分子标记辅助 育种中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114457182 B 2与丝瓜果皮颜色相关的SNP分子标记及其应用 技术领域 [0001]本发明属于分子生物学及作物育种技术领域， 更具体地说， 本发明涉及一种与丝 瓜果皮颜色相关的SNP分子标记、 检测丝瓜果皮颜色的引物、 试剂盒以及SNP分子标记、 引物 和试剂盒在丝瓜分子 育种中的应用。 背景技术 [0002]丝瓜是一种重要的药食兼用的多功能蔬菜。 丝瓜果皮富含维生素、 氨基酸、 微量元 素和抗氧化物质， 具有清热消暑、 止血消炎的功效。 近年来， 随着人们对 营养健康的重视， 丝 瓜的播种面积逐年增大， 特别对于华南地区而言， 丝瓜已成为广东、 广西、 海南、 及港澳地区 重要的日常消费蔬菜。 [0003]丝瓜的果皮颜色是其重要的农艺性状， 皮色对其市场销售有着直接影响。 由于不 同消费地区对丝瓜皮色的要求不尽相同， 因而需要以当地的消费习惯为育种目标进行新品 种选育。 目前丝瓜果皮颜色的选育， 只能等丝瓜果实长出来之后才知道果皮颜色， 劳动成 本、 人工成本高， 费时费力。 [0004]竞争性等位基因特异PC R(KASP)技术是针对等位基因SNP 位点设计的两端引物， 利 用实时荧光PCR技术， 对底物进行扩增， 相应的荧光探针可以与对应引物结合位点相结合， 根据检测出的荧 光颜色确定扩增产物的基因型， 是一种无需电泳新型 快速简便方法。 [0005]因此， 开发与果皮颜色紧密连锁的SNP分子标记， 对丝瓜分子育种具有重要的意 义。 发明内容 [0006]基于此， 本 发明的目的之一是提供一种与丝瓜果皮颜色相关的SNP分子标记， 所述 SNP分子标记能够用来预测、 鉴定和筛 选丝瓜果皮颜色性状。 [0007]实现上述发明目的 的具体技 术方案包括如下： [0008]一种与丝瓜果皮颜色相关的SNP分子标记， 所述S NP分子标记位于丝瓜第13号染色 体第3016574bp碱基， 该处碱基为T或C 。 [0009]在其中一些实施例中， 所述S NP分子标记的TT基因型对应的丝瓜果皮为白色， 所述 SNP分子标记的TC或C C基因型对应的丝瓜果皮为绿色。 [0010]本发明的另一目的是提供一种检测丝瓜果皮颜色的引物， 所述引物可以扩增上述 SNP分子标记。 [0011]实现上述发明目的 的具体技 术方案包括如下： [0012]一种检测丝瓜果皮颜 色的引物， 所述引物包括： 序列如SEQ  ID No:1所示的正向引 物、 以及序列如SEQ  ID No:2和SEQ ID No:3所示的反向引物。 [0013]在其中一些实施例中， 所述反向引物的5'端连接有荧 光分子FAM或H EX。 [0014]在其中一些实施例中， 所述序列如SEQ  ID No:2所示的反向引物的5'端连接有荧 光分子FAM， 所述序列如SEQ  ID No:3所示的反向引物的5'端连接有荧 光分子HEX。说　明　书 1/5 页 3 CN 114457182 B 3