(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210161697.5 (22)申请日 2022.02.22 (71)申请人 浙大城市学院 地址 310015 浙江省杭州市拱 墅区湖州街 51号 申请人 杭州安旭生物科技股份有限公司 (72)发明人 曾玲晖　张翀　李智娣　李杨玲　 凌世生　董文坤　 (74)专利代理 机构 杭州求是专利事务所有限公 司 33200 专利代理师 应孔月 (51)Int.Cl. C12N 15/113(2010.01) C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/11(2006.01)A61K 31/7105(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) (54)发明名称 一种用于肿瘤治疗靶点和诊断生物标志物 的circMTMR14及试剂盒和应用 (57)摘要 本发明公开了一种用于肿瘤治疗靶点和诊 断生物标志物的cir cMTMR14及试剂盒和应用， 属 于肿瘤诊断技术领域， 其碱基序列如图1所示， 为 MTMR14mRNA第5和第6外显子反向剪接形成的新 的环状RNA。 相比于正 常患者， 肺癌和结直肠癌患 者血液外泌体中circMTMR14呈现高表达， circMTMR14的表 达与肺癌 细胞的迁移、 侵袭和转 移的能力呈现正相关。 因此， circMTMR14作为肿 瘤治疗靶点和诊断生物标志物应用到肿瘤治疗、 肿瘤诊断中， 并为治疗相关的药物及诊断产品提 供了新思路和新方向。 权利要求书1页 说明书9页 序列表4页 附图9页 CN 114934048 A 2022.08.23 CN 114934048 A 1.一种用于肿瘤治疗靶点和诊断生物标志物的circMTMR14， 其特征在于， 所述 circMTMR14的碱基序列如SEQ  ID NO.1所示。 2.一种检测样本 中肿瘤标志物表达水平的试剂 盒， 其特征在于， 包括与权利要求1所述 的circMTMR14特异性互补配对的分子探针和/或用于扩增权权利要求1所述的circMTMR14 的引物对。 3.根据权利要求2所述的试剂盒， 其特征在于， 所述引物对选自 以下引物对1～6 中的至 少一种； 其中， 引物对1的碱基序列如SEQ  ID NO.2～3所示； 引物对2的碱基序列如SEQ  ID NO.4 ～5所示； 引物对3的碱基序列如SEQ  ID NO.6～7所示； 引物对4的碱基序列如SEQ  ID NO.8 ～9所示； 引物对5的碱基序列如SEQ  ID NO.16～17所示； 引物对6的碱基序列如SEQ  ID  NO.18～19所示。 4.根据权利要求2所述的试剂， 其特征在于， 所述分子探针对选自 以下分子探针对1～3 中的至少一种； 其中， 分子探针对1的碱基序列如SEQ  ID NO.10～11所示； 分子探针对2的碱基序列如 SEQ ID NO.12～13所示； 分子 探针对3的碱基序列如SEQ  ID NO.14～15所示。 5.根据权利要求2所述的试剂 盒， 其特征在于， 所述检测样本包括非小细胞肺癌组织和 非小细胞肺癌 癌旁组织中的至少一种。 6.权利要求1所述的circ MTMR14在制备 预防和/或治疗肿瘤的药物中的应用。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述肿瘤包括肺癌， 优选的， 所述肿瘤包括 非小细胞肺癌。 8.根据权利要求6所述的应用， 其特 征在于， 所述肿瘤包括原发瘤和转移瘤。 9.一种用于检测样本中肿瘤标志物表达水平的试剂在制备用于检测非小细胞肺癌的 试剂盒中的应用， 所述肿瘤标志 物circMTMR14碱基序列如SEQ  ID No.1所示。 10.一种用于预防和/或治疗肿瘤的药物， 所述药物以权利要求1所述circMTMR14为活 性成分。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114934048 A 2一种用于肿瘤治疗靶点和诊断生物标志物的circMTMR14及 试 剂盒和应用 技术领域 [0001]本申请涉及肿瘤诊断技术领域， 尤其涉及 一种用于肿瘤治疗靶点和诊断生物标志 物的circ MTMR14及试剂盒和应用。 背景技术 [0002]肺癌(Lung  cancer)是发病率和死亡率增长最快的恶性肿瘤之一， 且死亡率很高， 已经成为世界范围内男性和女性死亡 的主要原因。 吸烟仍然是诱发肺癌的主要原因， 近年 来二手烟和三手烟也逐渐成为肺癌的诱发因素。 但肺癌的具体病理机制尚不清楚。 肺癌的 诊断主要依靠影像学诊断、 血清肿瘤标志物检查和组织活检。 由于早期肺癌缺乏特异性症 状， 大多数肺癌患者在没有定期 筛查的情况下直到晚期才确诊， 预后一般较差且不可逆。 手 术是早期肺癌患者的推荐治疗方法。 对于晚期肺癌患者， 放疗和 化疗是主要的治疗手段然 而， 放疗和化疗往往会产生严重的副作用， 使患者无法耐受。 近年来， 分子靶向治疗和免疫 治疗日益流行， 但只适用于某些特定类型的肺癌患者。 因此， 迫切需要探索更具体、 更有效 的肺癌诊断和治疗方法。 [0003]只有不到2％的人类基因组序列是蛋白质编码基因， 而人类转录组大多数序列是 非编码RNA， 即没有编码蛋白质的能力。 circRNA是一类由mRNA前体反向剪接形成 的不具有 5’帽子和3’poly(A)尾的单链闭合的新型非编码RNA分子。 随着RNAseq技术和生物信息学分 析技术的不断更新和完善， 大量的circRNA被发现广泛表达于真核生物中， 例如在真核细胞 中就有近10％的基因转录可以剪接产生circRNA并发挥 生物学功能。 circRNA在真核细胞中 发挥着广泛的生物学功能， 例如作用于miRNA “海绵”、 蛋白质“海绵”、 调节mRNA的稳定性、 调 节亲本基因转录， 此外， 有研究表明部分circRNA具有翻译功能蛋白的能力。 多项研究表明， circRNA在肿瘤的发生发展和侵 袭或转移中起着至关重要的作用。 [0004]近年来， circRNA被广泛报道参与非小细胞肺癌的发生发展。 circRNA主要以吸 附 miRNA或编码蛋白的方式促进非小细胞肺癌进程。 Botai  Li等人发现circNDUFB2通过去稳 定IGF2BPs和激活抗肿瘤免疫从而抑制非小细胞肺癌的进展。 Daishi  Chen等人发现hsa_ circ_10039 5调控miR ‑1228/TCF21通路来抑制肺癌进展。 另外， Yongsh eng Zhao等人也认为 circCDR1as通过靶向miR ‑641/HOXA9轴调控非小细胞肺癌细胞的干性和顺铂耐药。 但总的 来说， 大多数circRNA在非小细胞肺癌的过程和发病机制中的具体作用仍 不清楚。 [0005]因此， 探索 circRNA在非小细胞肺癌发生发展中的具体作用和分子机制， 开发新型 早期诊断标志物和可行治疗靶标， 对非小细胞肺癌患者的诊断和治疗提供有潜力的临床诊 断和治疗背景。 [0006]鉴于此， 特提出本发明。 发明内容 [0007]有鉴于此， 本发明的目的在于提供一种用于肿瘤治疗靶点和诊断生物标志物的说　明　书 1/9 页 3 CN 114934048 A 3