(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210161665.5 (22)申请日 2022.02.22 (71)申请人 浙大城市学院 地址 310015 浙江省杭州市拱 墅区湖州街 51号 (72)发明人 张翀　李杨玲　曾玲晖　李智娣　 张作艳　 (74)专利代理 机构 杭州求是专利事务所有限公 司 33200 专利代理师 应孔月 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/11(2006.01) A61K 38/17(2006.01) A61P 11/00(2006.01)A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) (54)发明名称 一种用于肿瘤治疗靶点和诊断生物标志物 的PDE1A及试剂盒和应用 (57)摘要 本发明公开了一种用于肿瘤治疗靶点和诊 断生物标志物的PDE1A及试剂盒和应用， 属于肿 瘤诊断和治疗技术领域， 本发明通过对PDE1A进 行检测， 利用PDE1A在NSCLC癌组织及NSCLC癌旁 组织的差异表达， 用于NSCLC的特异性标记， 同 时， 通过靶向PDE1A能显著抑制NSCLC 的转移， 用 于肿瘤抗转移的药物治疗靶标。 因此， PDE1A作为 肿瘤治疗靶点和标记的分子标志物应用到肿瘤 治疗、 肿瘤诊断中， 并为治疗相关的药物及诊断 产品提供了新思路和新方向。 权利要求书1页 说明书12页 序列表7页 附图12页 CN 114457157 A 2022.05.10 CN 114457157 A 1.一种用于肿瘤治疗靶点和诊断生物标志物的PDE1A， 其特征在于， 所述PDE1A的碱基 序列如SEQ  ID NO.1所示。 2.一种检测样本 中肿瘤标志物表达水平的试剂 盒， 其特征在于， 包括与权利要求1所述 的PDE1A特异性互补配对的分子 探针对和/或用于扩增权 权利要求1所述的P DE1A的引物对。 3.根据权利要求2所述的试剂盒， 其特征在于， 所述引物对选自 以下引物对1～9中的至 少一种； 其中， 引物对1的碱基序列如SEQ  ID NO.2～3所示； 引物对2的碱基序列如SEQ  ID NO.4 ～5所示； 引物对3的碱基序列如SEQ  ID NO.6～7所示； 引物对4的碱基序列如SEQ  ID NO.8 ～9所示； 引物对5的碱基序列如SEQ  ID NO.10～11所示； 引物对6的碱基序列如SEQ  ID  NO.12～13所示； 引物对7的碱基序列如SEQ  ID NO.14～15所示； 引物对8的碱基序列如SEQ   ID NO.16～17 所示； 引物对9的碱基序列如SEQ  ID NO.18～19所示。 4.根据权利要求2所述的试剂， 其特征在于， 所述分子探针对选自 以下分子探针对1～7 中的至少一种； 其中， 分子探针对1的碱基序列如SEQ  ID NO.20～21所示； 分子探针对2的碱基序列如 SEQ ID NO.22～23所示； 分子探针对3的碱基序列如SEQ  ID NO.24～25所示； 分子探针对4 的碱基序列如SEQ  ID NO.26～27所示； 分子探针对5的碱基序列如SEQ  ID NO.28～29所示； 分子探针对6的碱基序列如SEQ  ID NO.30～31所示； 分子探针对7的碱基序列如SEQ  ID  NO.32～33所示。 5.根据权利要求2所述的试剂 盒， 其特征在于， 所述检测样本包括非小细胞肺癌组织和 非小细胞肺癌 癌旁组织中的至少一种。 6.权利要求1所述的P DE1A在制备 预防和/或治疗肿瘤的药物中的应用。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述肿瘤包括肺癌， 优选的， 所述肿瘤包括 非小细胞肺癌。 8.根据权利要求6所述的应用， 其特 征在于， 所述肿瘤包括原发瘤和转移瘤。 9.一种用于检测样本中肿瘤标志物表达水平的试剂在制备用于检测非小细胞肺癌的 试剂盒中的应用， 所述肿瘤标志 物PDE1A碱基序列如SEQ  ID No.1所示。 10.一种用于预防和/或治疗肿瘤的药物， 所述药物以权利要求1所述PDE1A为活性成 分。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114457157 A 2一种用于肿瘤治疗靶点和诊断生物标志物的PDE1A及 试剂盒 和应用 技术领域 [0001]本申请涉及肿瘤诊断技术领域， 尤其涉及一种用于肿瘤治疗靶点和诊断生  物标 志物的PDE1A及试剂盒和应用。 背景技术 [0002]肺癌在中国以及全球 的发病率位于恶性肿瘤首位， 也是造成所有癌症死亡  率高 的主要原因。 中国每年有70多万的肺癌确诊患者和60万死亡病例， 其中  近90％的肺癌患者 属于非小细胞肺癌患者。 近年来， 针对肺癌的手术、 放化疗  等医疗技术不断优化， 包括分子 靶向和免疫治疗等在内的治疗手段也在不断突  破取得新进展， 但是， 大部 分中晚期肺癌患 者的治疗率并没有提高很多， 5年生  存率仅有16％， 几乎没有提升， 肺癌也成为当下危害国 民生命健康安全的最主  要恶性肿瘤之一。 转移被认为是肺癌死亡率居高不下的主要原因。 一项研究表 明， 近80％的肺癌患者在就诊时就出现了转移的II， III， IV期病情， 针对肿瘤   转移的患者， 传统手术、 放化疗法以及新兴生物疗法带来的获益很小。 对于确  诊较早的肺 癌患者而言， 虽然治疗有效缓解了病情， 但后期复发以及出现肿瘤  转移的可能性依旧较 高， 降低肿 瘤转移发生率是降低NSCLC患者死亡率的关键，  因此， 深入研 究NSCLC发生转移 的分子机制， 研发可靠的预防及治疗手段 是目 前肺癌研究最 为迫切的难题。 [0003]PDE1A(phosphodiesterase  1A)是PDE家族成员PDE1的亚型， 此外还有  PDE1B和 PDE1C。 PDE1A主要是由Ca2+和钙调蛋白(CaM)组成， 发挥作用  主要是通过钙 ‑钙调蛋白结合 到PDE1的CaM结构域， 缓解催化位点的N端自  动抑制， 从而促进酶活性。 PDE1作为最早发现 的同工酶， 能够同时水解cGMP  和cAMP。 PDE1A常见分布在血管平滑肌系统， 具有紧张调节功 能， 而PDE1B  主要是在神经系统中， 与记忆， 免疫调节等有关。 PDE1C则在两种系统中都有   分布， 共同参与血 管平滑肌系统的生物学功能。 [0004]PDE1A可将cAMP水解， 降低其在胞内表达量， 从而调控人体内各种生 理 过程。 降低 PDE1A表达能减弱白血病细胞的增殖， 影响细胞周期， 诱导白血病  细胞发生凋亡。 Tehranoli de是一种具有过氧化物基团的天然倍半萜内酯， Noori  等研究发现它能够抑制 CaM的活性， 进一步抑制PDE1A活化， 导致细胞内cAMP  积累和PKA激活， 最终抑制癌细胞增 殖。 [0005]因此， 探索PDE1A在非小细胞肺癌发生发展中的具体作用和分子机制， 开  发新型 早期诊断标志物和可行治疗靶标， 对非小细胞肺癌患者的诊断和治疗提  供有潜力的临床 诊断和治疗背景。 发明内容 [0006]有鉴于此， 本发明的目的在于提供一种用于肿瘤治疗靶点和诊断生物标志  物的 PDE1A及试剂盒和应用。 [0007]根据本发明实施例的第一方面， 提供了一种用于肿瘤治疗靶点和诊断生物  标志说　明　书 1/12 页 3 CN 114457157 A 3