(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210167267.4 (22)申请日 2022.02.23 (71)申请人 江西省农业科 学院畜牧兽医研究所 地址 330200 江西省南昌市南 莲路602号江 西省农业科 学院畜牧兽医研究所 申请人 南昌师范学院 (72)发明人 武艳平　周敏　朱学农　魏岳　 谭玉文　贡继尚　许继国　马荆鄂　 熊信威　 (74)专利代理 机构 北京东方盛凡知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11562 专利代理师 程小芳 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01)C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种与鸡肉垂厚相关的分子标记及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种与鸡肉垂厚相关的分子 标记及其应用， 属于生物基因技术领域， 本发明 提供一种与鸡肉垂厚相关的分子标记， 该分子标 记是以位于鸡INHA 基因内含子1上C22 056470T位 点为检测位点， 分析该位点多态 性与鸡肉垂厚性 状的相关性， 通过 实验发现， 该位点的等位基因T 有利于鸡肉垂厚的发育。 这为通过鸡肉垂厚性状 进行鸡种选育及分子标记辅助选择提供了理论 基础和参考数据。 利用本发明分子标记构建的检 测方法， 相对于传统的通过表型数据选育， 不仅 成本低、 操作简便， 而且 结果准确， 并且 该方法简 单易行， 可重复性强， 在普通实验室 即可进行。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图3页 CN 114438227 A 2022.05.06 CN 114438227 A 1.一种与鸡肉垂厚相关的分子标记， 其特 征在于， 所述分子标记如附图1所示。 2.根据权利要求1所述的与鸡肉垂厚相关的分子标记， 其特征在于， 附图1所示的序列 的C22056470T位点处存在C /T的碱基突变， 出现C C、 CT或TT的基因分型。 3.一种检测权利要求1所述的与鸡肉垂厚相关的分子标记的引物对， 其特征在于， 其核 苷酸序列如SEQ  ID No.3‑4或SEQ ID No.5‑6所示。 4.一种试剂盒， 其特 征在于， 包括权利要求3所述的引物对。 5.一种检测权利要求1或2所述的与鸡肉垂厚相关的分子标记的方法， 其特征在于， 包 括以下步骤： (1)提取待检测鸡的基因 组DNA； (2)利用权利要求3所述的引物对进行PCR扩增， 获取扩增产物； (3)当步骤(2)使用如SEQ  ID No.3‑4所示引物时， 对所得的扩增产物进行测序， 获得分 子标记的基因型； 当步骤(2)使用如SEQ  ID No.5‑6所示引物时， 对所得的扩增产物进行凝胶电泳， 根据 带型判定基因型； (4)根据基因分型 结果判断所述待测鸡的肉垂性状。 6.一种如权利要求1或2所述的分子标记、 权利要求3所述的引物对、 或权利要求4所述 的试剂盒在检测鸡肉垂厚相关性状中的应用。 7.一种如权利要求1或2所述的分子标记、 权利要求3所述的引物对、 或权利要求4所述 的试剂盒在鸡育种中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114438227 A 2一种与鸡肉垂厚相关的分子标记及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及 生物基因技术领域， 特别是涉及一种与鸡肉垂厚相关的分子标记及其 应用。 背景技术 [0002]禽类的性成熟受到下丘脑 ‑垂体‑性腺轴的高度调控， 垂体分泌的促卵泡素能促进 精细管的生长发育和精子生成； 促黄体素则刺激睾丸的间质细胞分泌雄激素， 并间接地有 助于精子的形成。 随着睾丸分泌雄激素进而刺激公禽出现第二性征。 家禽的第二性征是繁 殖性状的间接表征， 因而可通过对第二性征 的间接选择加快品种繁殖性能的选育进展。 优 质鸡公鸡一般在20 ‑30日龄鸡冠开始发育， 颜色变红、 鸡冠面积变大， 鸡冠变厚， 肉垂的颜 色、 大小、 长度与厚度也相应的发生变化(张德祥等， 2013)， 这些性状可以间接反映公鸡雄 性化发育的程度。 张德祥等(2013)研究发现睾丸重与肉垂发育的相关程度要高于鸡冠， 肉 垂发育的遗传力估计值为中等偏上程度(0.184 ‑0.626)， 变异系数也大(11.80％ ‑ 59.87％)， 可作为选择睾丸重的间接选种指标。 梁远东等(2008)以良凤花肉用型父母代种 公鸡为实验素材发现肉垂长的公鸡， 睾丸也相对大些， 认为 肉垂大小可作为衡量公鸡性腺 发育的依据及选择目标。 周敏等(2019)分析了本实验群体不同周龄肉垂厚的变异系数， 发 现变异系数也较大(15.40％ ‑22.00％)， 与16w睾丸重呈极显著正相关(P<0.01)， 肉垂厚在 12周龄前都是影响16周龄睾丸重的主要因素之一， 12周龄前是肉垂厚发育的快速时期。 近 几年来有关鸡性早熟性状选育大多是通过世代选育的方法不断从后备鸡群中选择早熟个 体， 建立核心群后扩繁和选育， 这种方法比较缓慢且稳定性较差。 目前对性早熟的研究主要 集中在母鸡中， 对于公鸡性早熟 的研究还未见报道。 随着分子遗传标记辅助选择在育种中 的应用， 候选基因法是家鸡进行性 早熟分子 选育行之有效、 易于操作的方法。 [0003]抑制素(inhibin， INH)是一种由卵巢颗粒细胞和睾丸支持细胞分泌的二聚体糖蛋 白激素， 属于转化生长因子β 超家族成员， 最基本的生物学作用是抑制促卵泡激素合成和分 泌， 并可通过复杂的反馈机制， 调节体液促卵泡激素水平， 还可通过局部作用， 调节卵巢内 卵泡的发育。 抑制素是由α和β 两个不同的亚单位通过二硫键结合在一起， α 单位上有糖基化 位点， β 单位有A、 B两种类型， 抑制素有抑制素A( α β A)和抑制素B( α β B)， 分离的α和β 亚单位均 无生物活性(马勇江等， 2000； 李晓丽等， 2003)。 INHA基因目前在鸡上的研究主要集中在该 基因多态 性及其与母鸡繁殖性能如300日龄产蛋量、 出雏体重、 开产体质量、 开产日龄、 开产 冠高、 开产胫长、 70日龄体重、 98日龄体重/冠高、 冠长等方面(金恒， 2016； 桂涛涛等， 2018； Cui等， 2019； 范迪等， 2 020)以及卵巢发育(Lovell等， 2 003； Cui等， 2019； Cui等， 2 020； Wasti 等， 2020； Cui等， 2021； Francoeur等， 2021)。 金恒(2016)发现该位点与母鸡21日龄体重、 70 日龄体重、 98日龄体重以及330日龄产蛋数显著相关(P<0.05)， 但 INHA基因与地方鸡种公禽 肉垂性状的相关性还未 见有报道。说　明　书 1/6 页 3 CN 114438227 A 3