(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210174815.6 (22)申请日 2022.02.24 (71)申请人 信阳师范学院 地址 464000 河南省信阳市浉河区长安路 237号 (72)发明人 张伟　王瑞芝　江昌俊　袁红雨　 朱超　舒全宏　 (74)专利代理 机构 南京思宸知识产权代理事务 所(特殊普通 合伙) 32548 专利代理师 陈常美 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12Q 1/686(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种茶树 抗寒品种的育种方法 (57)摘要 本发明涉及一种茶树抗寒品种的育种方法， 其特征在于包括如下步骤： 扩增茶树苗的cDNA， 对扩增产物进行凝胶电泳， 判断扩增产物在30kD 处左右是否具有条带； 所述扩增引物包括上游引 物SEQ ID NO.1和下游引物SEQ  ID NO.2。 本发明 的育种方法能够提高茶树品种在低温胁迫下的 存活率， 也能够提高茶树品种的越冬能力以及提 高茶叶中茶多酚的含量， 有良好的发展潜力和实 用推广价 值。 权利要求书1页 说明书3页 序列表1页 CN 114592082 A 2022.06.07 CN 114592082 A 1.一种茶树抗寒品种的育种方法， 其特征在于包括如下步骤： 扩增茶树苗的cDNA， 对扩 增产物进行凝胶电泳， 判断扩增产 物在29‑32kD处是否具有 条带； 所述扩增引物包括上游引 物SEQ ID NO.1和下游引物SEQ  ID NO.2。 2.根据权利要求1所述的育种方法， 所述茶树 苗为信阳毛尖茶树 苗。 3.根据权利要求1所述的育种方法， 所述扩增产物的序列为SEQ  ID NO.3。 4.根据权利要求1所述的育种方法， 所述茶树苗在移栽之前进行0 ‑4℃的低温胁迫培 养。 5.一种用于茶树抗寒品种育种的试剂盒， 所述试剂盒包括上游引物SEQ  ID NO.1和下 游引物SEQ  ID NO.2。 6.权利要求5所述的试剂盒的应用， 所述试剂盒用于茶树 抗寒品种育种。 7.根据权利要求6所述的应用， 所述试剂盒还用于提高茶叶中茶多酚的含量。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114592082 A 2一种茶树抗 寒品种的育种方 法 技术领域 [0001]本发明属于茶树种植 技术领域， 具体涉及一种茶树 抗寒品种的育种方法。 背景技术 [0002]茶树， 为多年生绿本植物， 其所生长的茶叶对世界及中国历史、 文化及政治产生了 深远的影响， 目前茶树已经有60多个国家种植。 茶树种植对环境要求相对较高， 其需要种植 环境温度在日平均气温10℃， 年降水量在1500mm以上， 此外茶树种 植需要充足的阳光照射 条件， 适当的紫外照射 强度可提高茶叶的产量和品质。 高山、 丘陵地区湿润、 砂质化土壤、 以 及充足的降雨量和阳光照射， 都是茶树种植的首选区域， 其湿润、 清新的空气， 所种植茶叶 具有品质高、 病虫害率低、 农药使用量少， 可有效提高茶叶销售价格， 降低种植成本， 提高茶 农的经济效益。 但是， 茶树的耐寒性较差， 冬季高山天气多变、 温度低， 茶树极易被造成冻 伤， 轻者会造成茶树减产， 重者则会造成茶树大面积死亡， 给茶农带来无法挽回的重大经济 损失； 并且茶树长期处于寒冷环 境中， 会造成茶树生长缓慢， 疾病率低， 所生长 茶叶品质差、 产量低。 [0003]针对如何培育茶树抗寒品种， 采用分子生物学的方法是目前的研究热点。 例如， 中 国授权专利CNl09112144B公开了茶树类甜蛋白基因CsTHA1在增强作物抗逆性中的应用。 中 国授权专利CN110747210B公开了茶树糖基转移酶基因UGT91Q2在提高植物抗寒性上的应 用， 其发现茶树糖基转移酶基因UGT91Q2与植物的抗寒性相关， 在茶树中沉默该基因可显著 降低茶树的抗冷能力， 在拟南芥和烟草中过量表达该基因后， 再对转基因植株低温处理， 显 著提高了模式植物的抗冻性。 再例如， 中国发明专利申请CN112391405A公开了茶树己糖激 酶CsHXK3基因在调控植物生长发育和增强抗寒能力中的应用， 其通过过表达实验首次验证 了CsHXK3基因的生物学功能， 可以为茶树 新品种选 育提供基因资源。 [0004]在茶树的生长过程中， 越冬管理极其重要， 因为茶树不耐寒冻， 在普通年份， 茶树 冻死者一二成， 如遇大寒年份， 茶树冻死者十有六七， 导致次年的春茶产量减产50％以上， 另外， 越冬处理不当极易带来严重的虫害， 导致茶树产量和质量的下降； 因此， 发明一种能 够获得茶树抗寒品种的育种方法， 从而有效解决茶树， 特别是信阳毛尖的越冬管理是目前 亟待解决的问题。 发明内容 [0005]为了提高茶树越冬的能力， 本发明提供一种茶树抗寒品种的育种方法。 具体而言， 本发明拟采用如下的技 术方案： [0006]本发明一方面涉及一种茶树抗寒品种的育种方法， 其特征在于包括如下步骤： 扩 增茶树苗的cDNA， 对扩增产物进行凝胶电泳， 判断扩增产物在29 ‑32kD处是否具有条带； 所 述扩增引物包括上游引物SEQ  ID NO.1和下游引物SEQ  ID NO.2。 [0007]在本发明的一个优选实施方式 中， 所述茶树 苗为信阳毛尖茶树 苗。 [0008]在本发明的另一个优选实施方式 中， 所述扩增产物的序列为SEQ  ID NO.3。说　明　书 1/3 页 3 CN 114592082 A 3