(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210177502.6 (22)申请日 2022.02.24 (71)申请人 北京组学生物科技有限公司 地址 100000 北京市大兴区北京经济技 术 开发区科创十四街20号院1号楼3 07室 (72)发明人 周小龙　黄莉莎　刘连成　王运斌　 (74)专利代理 机构 北京奇眸智达知识产权代理 有限公司 1 1861 专利代理师 樊进茹 (51)Int.Cl. C12Q 1/686(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C40B 50/06(2006.01) C12Q 1/6806(2018.01) C12Q 1/6876(2018.01)C12M 1/28(2006.01) C12M 1/34(2006.01) C12M 1/00(2006.01) (54)发明名称 基于数字PCR技术的ATRX和KDM5A突变检测 的试剂盒、 装置及应用 (57)摘要 本发明提供了基于数字PCR技术的ATRX和 KDM5A突变检测的试剂盒， 包括突变型探针、 浸润 剂和添加剂按照重量比4:2:1构成； 所述浸润剂 的制备方法为。 本发明试剂盒采用突变型探针、 浸润剂和添加剂配制而成， 突变型探针进行探测 基因， 浸润剂中的壳聚糖溶液、 十二烷基硫酸钠 能够将探针更好的探测基因， 效果更为精准， 同 时通过改性二氧化硅的高比表 面积， 增强了产品 原料的混合反应效果； 加入的添加剂为原料提高 能力， 进一 步的提高探测精准度。 权利要求书1页 说明书4页 CN 114736953 A 2022.07.12 CN 114736953 A 1.基于数字PCR技术的ATRX和KDM5A突变检测的试剂盒， 其特征在于， 包括突变型探针、 浸润剂和添加剂按照重量比4:2:1构成； 所述浸润剂的制备 方法为： 将十二烷基硫酸钠5 ‑10份、 盐酸1 ‑3份和壳聚糖溶液1 ‑5份进行混合， 混合转速为100 ‑ 300r/min， 混合时间为10 ‑20min， 混合结束； 然后再加入改性二氧化硅1 ‑5份， 继续以100 ‑200rmin的转速搅拌20 ‑30min， 搅拌结束， 随后再加入改性硅灰石1 ‑3份， 得到浸润剂。 2.根据权利要求1所述的DNA二代测序文库的构建方法， 其特征在于， 所述改性二氧化 硅的改性方法为： 将二氧化硅送入到100 ‑300℃下煅烧10 ‑20min， 煅烧结束， 然后变温降至 50‑60℃， 随后送入到水中静置， 冷却至室温。 3.根据权利要求2所述的DNA二代测序文库的构建方法， 其特征在于， 所述变温降至处 理的具体操作步骤为： 以1 ‑5℃/min的速率降至 50‑60℃。 4.根据权利要求2所述的DNA二代测序文库的构建方法， 其特征在于， 所述壳聚糖溶液 的质量分数为5 ‑10％。 5.根据权利要求4所述的DNA二代测序文库的构建方法， 其特征在于， 所述壳聚糖溶液 的质量分数为7.5％。 6.根据权利要求1所述的DNA二代测序文库的构建方法， 其特征在于， 所述改性硅灰石 的改性方法为： 将 硅灰石送入到煅烧炉中进行煅烧， 煅烧温度为100 ‑300℃， 煅烧时间为20 ‑ 30min， 煅烧结束， 自然冷却至室温， 得到改性硅灰石。 7.根据权利要求1所述的DNA二代测序文库的构建方法， 其特征在于， 所述添加剂为氯 化钠、 氯化镁按照重量比3:1混合而成。 8.一种如权利 要求1‑7所述基于数字PCR技术的ATRX和KDM5A突变检测的试剂盒用的装 置， 包括试剂盒、 样品采集、 基因采集和数据分析。 9.一种如权利 要求1‑8所述基于数字PCR技术的ATRX和KDM5A突变检测的试剂盒用的装 置在基因检测中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114736953 A 2基于数字PCR技术的ATRX和KDM5A突变检测的试剂盒、 装 置及 应用 技术领域 [0001]本发明涉及测序文库技术领域， 具体涉及基于数字PCR技术的ATRX和KDM5A  突变 检测的试剂盒、 装置及应用。 背景技术 [0002]二代测序也称深度测序、 大规模平行测序， 其核心思想是边合成边测序   (Sequenci ngby Synthesis)， 即通过捕捉 新合成的末端的标记来确定DNA [0003]的序列， 目前主要有三种主流的测序平台： illumina公司Hiseq平台； 高通量测序 技术是对传统测序一次革命性的改变， 一次对几十万到几百万条DNA  分子进行序列测定， 因此在有些文献中称其为下一代测序技术(next generation  sequencing)足见其划时代 的改变， 同时高通量测序使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可 能， 所以又被称为深度测序。 [0004]现有的基于数字PCR技术 的试剂盒检测效率差， 精准度不高， 基于此， 需进一步的 改进处理。 发明内容 [0005]本发明的目的在 于基于数字PCR技术的ATRX和KDM5A突变检测的试剂盒、 装置及应 用， 以解决上述背景技 术中提出的问题。 [0006]为实现上述目的， 本发明提供如下技 术方案： [0007]基于数字PCR技术的ATRX和KDM5A突变检测的试剂盒， 包括突变型探针、 浸润剂和 添加剂按照重量比4:2:1构成； [0008]所述浸润剂的制备 方法为： [0009]将十二烷基硫酸钠5 ‑10份、 盐酸1 ‑3份和壳聚糖溶液1 ‑5份进行混合， 混合转速为 100‑300r/min， 混合时间为10 ‑20min， 混合结束； [0010]然后再加入改性二氧化硅1 ‑5份， 继续以100 ‑200rmin的转速搅拌  20‑30min， 搅拌 结束， 随后再加入改性硅灰石1 ‑3份， 得到浸润剂。 [0011]优选地， 所述改性二氧化硅的改性方法为： 将二氧化硅送入到100 ‑300℃下煅烧 10‑20min， 煅烧结束， 然后变温降至 50‑60℃， 随后送入到水中静置， 冷却至室温。 [0012]优选地， 所述变温降至处理的具体操作步骤为： 以1 ‑5℃/min的速率降至  50‑60 ℃。 [0013]优选地， 所述壳聚糖溶 液的质量分数为5 ‑10％。 [0014]优选地， 所述壳聚糖溶 液的质量分数为7.5％。 [0015]优选地， 所述改性硅灰石的改性方法为： 将硅灰石送入到煅烧炉中进行煅烧， 煅烧 温度为10 0‑300℃， 煅烧时间为20 ‑30min， 煅烧结束， 自然冷却至室温， 得到改性硅灰石。 [0016]优选地， 所述添加剂为氯化钠、 氯化镁按照重量比3:1混合而成。说　明　书 1/4 页 3 CN 114736953 A 3