(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210185993.9 (22)申请日 2022.02.28 (71)申请人 苏州宏元生物科技有限公司 地址 215123 江苏省苏州市苏州工业园区 星湖街218号 生物纳米园A5楼3 02单元 (72)发明人 钱自亮　王白云　徐文胜　陈红　 (74)专利代理 机构 北京精金石知识产权代理有 限公司 1 1470 专利代理师 朱宝莉 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种检测胆囊癌和胆管癌的试剂盒 (57)摘要 本发明提供了一组染色体不稳定区域在制 备胆囊癌和/或胆管癌的检测、 筛查、 诊断、 预后 评估或病情监测的药物或试剂盒中的应用， 所述 的染色体区域包括以下17个： 1p、 1q、 2q、 3q、 6p、 7p、 8p、 8q、 9p、 12p、 14q、 17p、 18p、 18q、 20p、 20q、 21q。 本发明17个常见染色体不稳定区域在胆囊 癌和胆管癌患者中总的携带率高达90.2％， 这对 临床胆囊癌和胆管癌的检测、 筛查、 诊断、 预后评 估或病情监测具有很大的意 义。 权利要求书1页 说明书7页 序列表4页 附图2页 CN 114438213 A 2022.05.06 CN 114438213 A 1.一组染色体不稳定区域在制备胆囊癌和/或胆管癌的检测、 筛查、 诊断、 预后评估或 病情监测的药物或试剂盒中的应用， 其特征在于， 所述的染色体区域包括以下17个： 1p、 1q、 2q、 3q、 6p、 7p、 8p、 8q、 9p、 12p、 14q、 17p、 18p、 18q、 20p、 20q、 21q。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特 征在于， 所述的试剂盒为 二代测序试剂盒。 3.根据权利要求1所述的应用， 其特 征在于， 所述的应用为药物药效检测。 4.一种用于胆囊癌和/或胆管癌的检测、 筛查、 诊断、 预后评估或病情监测的试剂 盒， 其 特征在于， 所述的试剂盒包含用于检测以下17个染色体不稳定 区域的试剂： 1p、 1q、 2q、 3q、 6p、 7p、 8p、 8q、 9p、 12p、 14q、 17p、 18p、 18q、 20p、 20q、 21q。 5.根据权利要求 4所述的试剂盒， 其特 征在于， 所述的试剂盒为 二代测序试剂盒。 6.根据权利要求5所述的试剂盒， 其特征在于， 所述的试剂 盒还包含： 阳性参考品、 阴性 参考品、 缓冲液、 酶、 文库接 头、 可检测标签、 核酸 提取试剂、 核酸纯化试剂中的一种或多种。 7.根据权利 要求6所述的试剂盒， 其特征在于， 所述的酶包含打断酶、 DNA聚合酶、 DNA连 接酶中的一种或多种。 8.根据权利要求6所述的试剂盒， 其特征在于， 所述的阳性参考品为混合有权利要求1 中所述的17个染色体不稳定区域变异的细胞系。 9.根据权利要求6所述的试剂盒， 其特征在于， 包括SEQ  ID NO.1‑8所示的P7端标签引 物中的一种或多种。 10.根据权利要求9所述的试剂盒， 其特征在于， 包括SEQ  ID NO.9‑16所示的P5端标签 引物中的一种或多种。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114438213 A 2一种检测胆囊癌和胆管癌的试剂盒 技术领域 [0001]本发明属于生物技 术领域， 具体涉及一种检测胆囊癌和胆管癌的试剂盒。 背景技术 [0002]胆囊癌指发生于胆囊(包括胆囊底部、 体部、 颈部及 胆囊管)的恶性肿瘤。 我国胆囊 癌的发病 率占同期胆道疾病的0.4％ ‑3.8％， 居消化道肿 瘤第六位， 胆囊癌患者5年总体生 存率仅为5％。 目前对于胆囊癌的发病机制尚未完全了解， 多为环 境、 遗传因素相关。 胆囊癌 的发生的危险因素包括： 胆囊结石、 胆囊息肉样病变、 胆囊慢性炎症和 “保胆取石 ”术后胆 囊， 其中约85％的胆囊癌患者合并胆囊结石。 胆囊结石患者胆囊癌的风险是无胆囊结石人 群的13.7倍。 [0003]胆囊癌无特异性临床症状， 常被胆囊炎、 胆囊结石及其并发症所掩盖， 如腹部不 适、 食欲下降或体重减轻。 一旦出现明显临床症状， 多属中晚期， 可表现为黄疸、 发热及腹痛 等。 目前血清CA19 ‑9和(或)癌胚抗原升高是最常用的诊断胆囊癌的肿瘤标志物， 其他还有 CA125、 CA724、 CA153等。 合并梗阻性黄疸 时， CA19‑9的诊断特异性低。 常见的影像学检查包 括超声、 内镜超声、 多层螺旋CT、 MRI和PET ‑CT， 临床上需要与黄色肉芽性肝胆炎、 肝癌侵犯 胆囊、 肝门胆管癌与萎缩性胆囊炎等疾病相鉴别。 [0004]胆管癌主要指肝外胆管细胞癌(extrahepat ic cholangiocarcinoma， ECC)是一类 起源于胆管粘膜上皮细胞、 以胆管细胞分化为特征 的相对罕见的高致死性恶性肿瘤， 约占 胆系恶性肿瘤的75％。 ECC主要的特点是恶性程度高、 确诊时间晚、 化学治疗效果差、 耐多 药、 预后差， 极易侵犯周围肝实质。 原发性恶性肝胆系统肿瘤中， ECC的发病率仅次于胆囊 癌， 位居第二。 ECC的发病率显著高于肝内胆管细胞癌， 而在ECC中发病率最高的是肝门部胆 管癌， 约占ECC总数的60 ‑70％， 占所有胆管癌的40 ‑60％， 又被称为高位胆管癌、 近端胆管 癌。 ECC多见于50‑70岁之间的中老年人， 男女发病比例约为2 ‑2.6:1。 [0005]染色体不稳定通常与肿瘤相关， 具体包括整个染色体或者染色体片段拷贝的缺失 或扩增。 含有与肿瘤发生相关的染色体 或者染色体片段的扩增和缺 失经常是肿瘤发生所特 有的， 检测肿瘤染色体不稳定区域对于研究肿瘤发生和开发肿瘤诊断技术都至关重要。 当 前临床上有使用原 位荧光杂交的方法对染色体上部 分区域的不稳定性进 行检测， 但缺少对 患者整个 基因组层面染色体不稳定性的分布特 征。 发明内容 [0006]为了解决上述问题， 本发明使用二代测序技术， 通过分析胆囊癌和胆管癌染色体 不稳定信息， 筛选出适宜表征胆囊癌和 胆管癌的17个区域， 通过该方法可以对胆囊癌和 胆 管癌的临床早期诊断和制定个 体化治疗方案提供 科学依据。 [0007]本发明中， 染色体不稳定是指正在进行的染色体改变， 它涉及染色体拷贝数 (numerical)或结构(structure)的扩增或缺失， 所述的染色体不稳定包括整个染色体或者 染色体片段拷贝的缺失或扩增。说　明　书 1/7 页 3 CN 114438213 A 3