(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210189620.9 (22)申请日 2022.03.01 (71)申请人 天津市农业科 学院 地址 300192 天津市南 开区航天道 26号 (72)发明人 张效生　郭晓飞　张金龙　李义海　 冯婧　姚大为　李玉鹏　 (74)专利代理 机构 天津市杰盈专利代理有限公 司 12207 专利代理师 朱红星 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种与绵羊奶乳糖率相关的SNP分子标记及 其应用 (57)摘要 本发明提供了一种与绵羊奶乳糖率性状相 关的SNP分子标记， 它位于第11号染色体第 42139093处； 其SNP分子标记的多态性为A/G； 所 述SNP位点信息基于的绵羊基因组序列信息版本 号为ARS‑UI_Ramb_v2.0， 2020年11月。 本发明所 提供的SNP分子标记， 不受绵羊年龄和性别的限 制， 可用于绵羊奶乳糖率性状的早期选育。 针对 刚出生的小母羊收集血液样本后， 经基因分型后 即可预测其成年后奶样中乳糖率的高低； 针对刚 出生的小公羊收集血液样本后， 经基因分型后即 可知道其是否携带乳糖率高的遗传特性， 以指导 其配种并预测其后代母羊产奶的乳糖率情况以 及评估后代母羊患乳房炎的风险。 权利要求书1页 说明书3页 序列表1页 附图2页 CN 114525333 A 2022.05.24 CN 114525333 A 1.一种与绵羊奶乳糖率数性状相关的SNP分子标记， 其特征在于它位于第11号染色体 第42139093处； 其SNP分子标记的多态性为A/G； 所述SNP位点信息基于的绵羊基因组序列信 息版本号 为ARS‑UI_Ramb_v2.0， 2020年1 1月。 2.一种如权利要求1所述的SNP分子标记的特异性引物， 其特征在于上游引物序列如 SEQ ID NO: 1所示， 下游引物序列如SEQ  ID NO: 2所示； SEQ ID NO: 1： AAGTCCCTGCTCAAGAACGA SEQ ID NO: 2： GAGCCTGTCAGTGTG GATCA。 3.一种如权利要求1所述的SNP分子标记在预测绵羊奶乳糖率中的应用。 4.一种如权利要求1所述的SNP分子标记在预测绵羊奶乳糖率中的方法， 其特征在于按 如下的步骤进行： （1） 颈静脉抽取目标绵羊的抗凝血， 并用于DNA提取； （2） 以提取的DNA为模板， 利用SNP分子标记的特异性引物进行PCR扩增， PCR扩增的退火 温度为60℃， 并获得目标PCR产物； （3） 对步骤 （2） 中的PCR产物进行sanger测序， 分析其基因型 （A A、 AG、 GG） ； （4） 结果判断： 根据基因型不同判断绵羊奶乳糖率高低， 以预测其患乳房炎的风险。 5.权利要求 4中所述的方法， 其中绵羊的DNA从其颈静脉抗凝血中提取。 6.一种如权利要求1中所述的SNP分子标记在选育高乳糖率 （低乳房炎患病率） 绵羊中 的应用。 7.一种利用如权利要求1中所述的SNP分子标记选育高乳糖率 （低乳房炎患病率） 绵羊 的方法， 其特征在于： 不断选择保留羊群中第11号染色体第42139093处SNP分子标记为G的 基因后代， 不断淘汰羊群中第1 1号染色体第42139093处SNP分子标记为A的基因后代。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114525333 A 2一种与绵羊奶 乳糖率相关的SNP分子标记及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及一种与绵羊奶乳糖率相关的S NP分子标记及其应用， 属于绵羊S NP分子 标记技术领域。 背景技术 [0002]绵羊奶中的乳糖是乳汁中的一种重要碳水化合物， 具有调节乳汁渗透压， 并能为 羔羊提供能量的主要物质。 葡萄糖经过乳腺上皮细胞合成后形成乳糖， 哺乳期的绵羊血液 中70%以上的葡萄糖都会参与该反应。 一般情况下， 乳汁中的乳糖率相对稳定， 但也会收到 营养水平、 饲养环 境等因素的影响。 乳糖率变化对于哺乳期绵羊的生产管理、 机体健康和羔 羊生长具有重要意 义。 [0003]在奶牛研究中， 研究人员发现牛奶中的乳糖率与奶牛的健康密切相关； 主要体现 在患有乳房炎的个体往往除了表现出较高的体细胞数性状外， 还会导致乳糖率的下降。 一 些报道直接指出， 奶中的乳糖率与其体细胞数存在负相关遗传。 在牧场管理和育种工作中， 乳糖率信息也被认 为是体细胞数指标和乳房炎的重要补 充信息。 并且， 在淘汰 奶牛中， 其乳 糖率通常也表现较低。 据报道， DGAT1和PRL等基因多态 性 （SNP变异） 与牛奶中的乳糖率存在 显著相关 关系。 [0004]目前， 尚没有发现与绵羊奶乳糖率 性状紧密相关的SNP位 点。 发明内容 [0005]本发明公开了一种与绵羊奶乳糖率相关的SNP分子标记及其应用， 通过本发明公 开的特异性引物， 所检测的SNP位点突变信息可以用于绵羊高乳糖率 （低乳房炎患病率） 性 状的分子标记辅助选 育工作。 [0006]为实现绵羊奶乳糖率的分子鉴定和未来的分子标记辅助选择高乳糖率 （低乳房炎 患病率） 绵羊品种， 本发明采用如下技 术方案。 [0007]一种与绵羊奶乳糖率相关的SNP分子标记， 其特征在于它位于第11号染色体第 42139093处； 其SNP分子标记的多态 性为A/G； 所述SNP位点信息基于的绵羊基因组序列信息 版本号为ARS ‑UI_Ramb_v2.0， 2020年11月。 其中所述的SNP分子标记的特异性引物， 其特征 在于， 上游引物序列如SEQ  ID NO: 1所示， 下游引物序列如SEQ  ID NO: 2所示； SEQ ID NO: 1： AAGTCCCTGCTCAAGAACGA SEQ ID NO: 2： GAGCCTGTCAGTGTG GATCA。 [0008]本发明进一步公开了所述的SNP分子标记在预测绵羊奶乳糖率中的应用。 实验结 果显示绵羊第11号染色体第42139093处SNP分子标记存在A/G突变， 且与乳糖率性状显著相 关； 其应用可用于绵羊奶乳糖率性状的早期选育。 同时本发明也公开了预测绵羊奶乳糖率 高低的方法， 其特 征在于按如下的步骤进行： （1） 颈静脉抽取目标绵羊的抗凝血 （绵羊的D NA从其颈静脉抗凝血中提取） ， 并用于 DNA提取；说　明　书 1/3 页 3 CN 114525333 A 3