(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210206281.0 (22)申请日 2022.03.01 (71)申请人 宁波大学 地址 315211 浙江省宁波市江北区风 华路 818号宁波大 学医学院 (72)发明人 王闯　田海华　徐佳　胡珍玉　 (74)专利代理 机构 宁波甬致专利代理有限公司 33228 专利代理师 张密密 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种用于抑郁症诊断的tsRNA生物标志物、 试剂盒及其应用 (57)摘要 本发明涉及生物 技术领域， 具体公开了一种 用于抑郁症诊断的tsRNA生物标志物、 试剂盒及 其应用。 所述标志物包 括编号为tiRNA ‑Gly‑GCC‑ 001的tsRNA； 所述编号为MINTbase数据库中RNA 的编号， 所述tiRNA ‑Gly‑GCC‑001的核苷酸序列 如序列表中SQEIDN O.1所示。 本发明将tsRNA作为 抑郁症诊断生物标记物和预测抗抑郁药物疗效 的生物标记物， 具有较高的稳定性， 同时也具备 较好的特异性和敏感性， 有较高的诊断参考价 值。 权利要求书1页 说明书8页 序列表1页 附图5页 CN 115141883 A 2022.10.04 CN 115141883 A 1.一种用于抑郁症诊断的tsRNA生物标志物， 其特征在于， 所述标志物包括编号为 tiRNA‑Gly‑GCC‑001的tsRNA； 所述tiRNA ‑Gly‑GCC‑001为MINTbase数据库中RNA的编号， 所 述tiRNA‑Gly‑GCC‑001的核苷酸序列如序列表中SQE  ID NO.1所示。 2.一种试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒中含有检测编号为tiRNA ‑Gly‑GCC‑001的 tsRNA的引物和探针， 所述tiRNA ‑Gly‑GCC‑001的引物序列如SQE  ID NO.2、 SQE  ID NO.3所 示， 所述试剂盒能够测定待测样品中编号 为tiRNA‑Gly‑GCC‑001的tsRNA的表达水平。 3.根据权利要求2所述的试剂盒， 其特征在于， 所述待测样品选自人体血液、 血浆或血 清中的至少一种。 4.根据权利要求2所述的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒含有检测试剂， 所述检测试 剂偶联有或带有检测标记。 5.根据权利要求4所述的试剂盒， 其特征在于， 所述检测标记选自生色团、 化学发光基 团、 荧光团、 同位素或 酶中的一种。 6.权利要求1所述的tsRNA生物标志 物在抑郁症诊断中的应用。 7.权利要求2所述的试剂盒在抑郁症诊断或评估抗抑郁症药物疗效中的应用。 8.根据权利要求7所述的试剂 盒在评估抗抑郁症药物疗 效中的应用， 其特征在于， 包括 以下步骤： S1、 采用所述试剂盒测定正常人群受试者中血液、 血浆或血清中的编号为tiRNA ‑Gly‑ GCC‑001的tsRNA的浓度， 记为对照参比值C 0； S2、 采用所述试剂盒测定检测对象的血液、 血浆或血清中的编号为tiRNA ‑Gly‑GCC‑001 的tsRNA的浓度， 记为标志 物表达量C1； S3、 根据C1/C0的比值判断检测对象是否患有抑郁症， 当所述标志物表达量C1与对照参 比值C0接近， 则表明通过抗抑郁药物有显著疗效。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115141883 A 2一种用于抑郁症诊断的tsRNA生物标志物、 试剂盒及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物技术领域， 具体而言， 涉及一种用于抑郁症诊断的  tsRNA生物标 志物、 试剂盒及其应用。 背景技术 [0002]抑郁症的核心症状是情 绪低落、 兴趣减退、 精力缺失， 在全球范围内  有超过3.5亿 人患有抑郁症。 据估计至2030年， 抑郁症所占伤残损失健康  生命年将达到全球第一位。 抑 郁症具有高患病率、 高复发率等特点， 甚至  会造成病人自杀、 自残 等严重后果。 抑郁症给病 人、 家庭及社会带来巨大  的经济压力和精神负担。 目前抑郁症的诊断主要依赖病人的主观 描述， 临 床医生对病 人症状的主观评估和相关问卷进行诊断存在一定主观性， 因缺  乏客 观有效的临床生物标志物， 容易造成误诊漏诊， 造成病程迁延， 给病  人造成不必要的经济 和精神负担 。 因此， 临床需要找到生物标志 物来帮助 临床医生对抑郁症 做出早期诊断。 [0003]非编码RNA(non ‑codingRNA,ncRNA)即不编 码蛋白质的RNA， 按  照其长短分为长非 编码RNA(>200bp)和短非编码RNA(<200bp)， 广义  上包括mRNA、 tRNA、 rRNA、 小干扰RNA、 miRNA以及功能尚未明确的  长链非编码RNA及环状RNA。 近年来， 来源于tRNA衍生的小分子 RNA (tRNA‑derived small RNAs,tsRNAs)引起了广泛关注。 其主要有2种类型，  即tRNA源 性应激诱导RNA(tRNA ‑derived stress‑induced RNA,tiRNA)和  tRNA源性片段(tRNA ‑ derived fragment,tRF)。 它们根据在前体或成熟tRNA  转录物的切割位置不同而产生。 这 些tRF&tiRNA分子的核苷酸组成、 生物  发生和功能上具有异质性。 近年来研究发现tsRNAs 不仅仅是tRNA降解的  碎片， 而且在许多特定的生理和病理过程中起着调节作用。 很多 学者 研究 了miRNA在抑郁症患者中的差异表达， 提示miRNA可能通过不同方式参  与抑郁症的发 生发展， 例如神经可塑性、 神经内分泌、 心理社会因素、 抗  抑郁药等， 而且认为miRNA ‑26b、 miRNA‑1972、 miRNA ‑4485、 miRNA ‑4498 和miRNA‑4743等可以作为抑郁症的生物标志物。 有 研究通过lncRNA芯片  发现多种lncRNA在抑郁症患者中异常表达， 6种lncRNAs在外周血中 的表 达可作为临床MDD诊断和治疗反应的潜在生物标志物。 随后研究发现环状  RNAhsa_ circRNA_103636在抑郁症患者中下调， 经过8周的抗抑郁治疗后  表达上升提示hsa_ circRNA_103636可作为抑郁症的一个重要的诊断和 治疗 生物标志物。 进一步在 Ⅱ型糖尿 病合并抑郁的病人中发现  hsa_circRNA_003251， hsa_circRNA_015115， hsa_circRNA_ 100918， hsa_circRNA_001520表达上调， 这些circRNA可能参与甲状腺激素， Wnt,  ErbB和 丝裂原活化蛋白激酶信号通路从而参与抑郁的发生、 发展， 研究阐  明了Ⅱ型糖尿病 抑郁症 的发病机制， 并且可以作为临床诊断和治疗的新靶  点。 但是， 上述抑郁症的生物标志物均 存在稳定性 不高的问题， 也限制了  其在临床上的应用。 [0004]而tsRNAs通过调控基因表达与基因沉默、 调节细胞增殖与凋亡、 调节  翻译等方式 在人类精神疾病中发挥重要作用。 tsRNAs组织特异性强、 高度  丰富且稳定、 广泛存在的特 征， 使其有望成为具 备高度敏感性、 特异性和  稳定性抑郁症诊断的生物标志 物。说　明　书 1/8 页 3 CN 115141883 A 3