(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210211009.1 (22)申请日 2022.03.03 (71)申请人 西安交通大 学医学院第一附属医院 地址 710061 陕西省西安市雁塔区雁塔西 路277号 (72)发明人 贺雅毅　马盼　郭辉　张宝　 (74)专利代理 机构 西安通大专利代理有限责任 公司 6120 0 专利代理师 范巍 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 与抗甲状腺药物引起的粒细胞缺乏相关的 MUC22基因突变位 点及其应用 (57)摘要 本发明公开了与抗甲状腺药物引起的粒细 胞缺乏相关的MUC22基因突变位点及其应用。 本 发明提供了序列如SEQ.ID.NO.2和SEQ.ID.NO.3 所示的特异性核酸引物， 可以以人基因组DNA为 模板扩增MUC22基因片段， 该片段中所含位点 rs1385372181的序列为TIA易感性鉴定、 早期诊 断以及探索新的TIA预防和治疗靶点提供了有效 的分子标记。 权利要求书1页 说明书6页 序列表1页 附图1页 CN 114438197 A 2022.05.06 CN 114438197 A 1.一种检测MUC22基因InDel位点rs1385372181多态性 的方法， 其特征在于： 包括以下 步骤： 1)利用特异性核酸引物扩增个体离体样本中包含有MUC22基因InDel位点 rs1385372181的DNA片段， 得扩增产物； 所述特异性核酸引物的序列如SEQ.ID.NO.2和 SEQ.ID.NO.3所示； 2)将扩增产物进行电泳检测 或进行测序， 根据电泳检测 或测序结果确定个体MUC22基 因InDel位点rs1385 372181的基因型。 2.根据权利要求1所述一种检测MUC22基因InDel位点rs1385372181多态性 的方法， 其 特征在于： 所述 步骤1中， 离体样本 选自体液、 组织细胞或毛发。 3.根据权利要求1所述一种检测MUC22基因InDel位点rs1385372181多态性 的方法， 其 特征在于： 所述步骤1中， 扩增条件包括： 95℃5～10min； 94℃0.5min， 60℃0.75min， 72℃ 1min， 30个循环； 72℃5mi n。 4.根据权利要求1所述一种检测MUC22基因InDel位点rs1385372181多态性 的方法， 其 特征在于： 所述步骤1中， 扩增 采用的PCR反应体系包括1～2 μl模板DNA以及10 μM上、 下游引 物各2 μl。 5.根据权利要求1所述一种检测MUC22基因InDel位点rs1385372181多态性 的方法， 其 特征在于： 所述 步骤1中， DNA片段的参 考序列如SEQ.ID.NO.1所示。 6.根据权利要求1所述一种检测MUC22基因InDel位点rs1385372181多态性 的方法， 其 特征在于： 所述步骤2中， 当扩增产 物的电泳检测结果显示存在长度为219b p的条带， 则表明 个体MUC22 基因InDel位点rs1385372181发生了缺失突变， 当扩增产物的电泳检测结果显示 仅存在长度为235bp的条带， 则表明个体MUC22基因InDel位点rs1385372181未发生缺失突 变。 7.一种检测MUC22基因InDel位点rs1385372181多态性 的试剂盒， 其特征在于： 该试剂 盒包括序列如SEQ.ID.NO.2和SEQ.ID.NO.3所示的特异性核酸引物。 8.一种MUC22基因遗传标记在制备用于检测TIA易感性的试剂盒中的应用， 其特征在 于： 所述遗传标记为MUC22基因InDel位点rs1385372181， 在rs1385372181位点发生缺失突 变的受试者属于TIA易感人群。 9.一种检测MUC22基因InD el位点rs1385372181的引物组在制备用于检测TIA易感性的 试剂盒中的应用， 其特征在于： 在rs1385372181位点发生缺失突变的受试者属于TIA易 感人 群。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特征在于： 所述引物组包括序列如SEQ.ID.NO.2和 SEQ.ID.NO.3所示的特异性核酸引物。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114438197 A 2与抗甲状腺药物引起的粒细胞缺乏相关的MUC2 2基因突变位 点及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物技术领域， 涉及位点rs1385372181在检测抗甲状腺药物引起的粒 细胞缺乏症(Antithyro id drug‑induced agranulocytosis， TIA)易感性中的应用。 背景技术 [0002]甲状腺机能亢进症(Hyperthyroidism)是一 组以甲状腺激素异常分泌增多为特征 的器官特异性自身免疫性疾病。 Grav es病(GD)是引起甲状腺机能亢进症(简称甲亢)的最常 见原因， 约占甲亢总人数的8 0％～85％。 Grav es病的主要临床表现为高代谢症 候群、 眼球突 出、 胫前粘液性水肿等， 可累及全身多个系统。 目前针对Gr aves病的治疗方法主要有三种： 抗甲状腺药物(Antithyroid  drug,ATD)、 放射碘治疗131I及手术治疗。 抗甲状腺药物主要 通过抑制体内过氧化物酶系统、 阻断碘的活化， 从而减少甲状腺激素的合成， 是目前治疗 Graves病的首选方案。 ATD包括甲巯咪唑(methimazole ,MMI)和丙基硫氧嘧啶 (propylthi ouracil,PTU)， 其中甲巯咪唑是临床主 要应用药物。 [0003]ATD治疗甲亢 的疗效肯定， 但用药过程中会出现包括皮肤瘙痒或者皮疹、 关节肌肉 疼痛和发热在内的副作用， 其发生率约为5％。 患者大多症状轻微， 对症处理或停药后一般 很快就缓解。 而严重的不良反应包括药物性肝损害、 中性粒细胞胞质抗体阳性的血管炎、 粒 细胞缺乏(简称粒缺)， 发生率约为0.1％～0.5％。 粒细胞缺乏症是服用ATD后最严重的不良 反应之一， 通常是指外周血中性粒细胞的绝对值低于0.5 ×109/l。 虽然TIA的发病在接受 ATD治疗的患者中只占0.1％～0.3％， 但 通常病情进展迅速， 极易并发消化系统、 呼吸系统、 泌尿系统等多系统的感染， 严重的患者还会继发脓毒 血症或败 血症， 甚至诱 发甲状腺危象， 因而TIA的病死率较高。 目前， 临床上仍缺乏对ATD所致粒细胞缺乏症发病的预测及预防机 制， 导致其延迟诊治的情况非常普遍， 而延迟诊治会延 长粒细胞缺乏症的恢复时间， 甚至增 加死亡风险。 [0004]近年来国内外学者对TIA的发病机制进行了大量的研究， 涉及到遗传易感性、 免疫 抑制、 药物对骨髓毒性作用以及过敏因素等， 虽然TIA的发病机制目前尚不明确， 但免疫遗 传因素与之密切相关的观点已得到了共识， 即认为ATD作为一种半抗原， 与体内特异蛋白结 合刺激机体产生抗体， 该抗体可与白细胞表面的抗原特异 性结合， 产生自身免疫破坏， 从而 导致粒细胞破坏。 [0005]人类主要组织相容性抗原(Major  Histocompatibility  Complex,MHC)系统是目 前已知的人类染色体中结构最为复杂的区域， 具有丰富的遗传多态性和高度的连锁不平 衡。 MHC区域位于6号染色体短臂6p21.31内， 由一群密切连锁的基因组成， 这些基因与多种 药物不良反应的遗传易感相关。 例如日本学者Tamai等研究发现人类白细胞抗原(Human   Leukocyte  Antigen,HLA)HLA ‑DRB1＊08032等位基因与MMI导致粒细胞减少症之间存在明 显的相关性； 学者Chen等人报道了 当地人群抗甲状腺药物所致粒细胞缺乏症的相关易感基 因HLA‑B＊38:02和HLA ‑DRB1＊08:03。 这些结果均证实MHC区域基因及相关位点与抗甲状腺说　明　书 1/6 页 3 CN 114438197 A 3